Imaging delle cellule vive di Drosophila melanogaster Terzo stadio Larvale Cervelli

Qui, discutiamo di un flusso di lavoro per preparare, sezionare, montare e visualizzare cervelli di espianti vivi da larve di terzo stadio di Drosophila melanogaster per osservare le dinamiche cellulari e subcellulari in condizioni fisiologiche.

La nostra ricerca si concentra sullo studio dell'impatto della divisione cellulare asimmetrica o ACD, sulla proliferazione e differenziazione delle cellule staminali. Utilizziamo cellule staminali neurali o neuroblasti di Drosophila come modello per comprendere i meccanismi, le regolazioni e gli impatti della divisione cellulare asimmetrica sullo sviluppo e sulla neurogenesi. I recenti sviluppi dell'intelligenza artificiale hanno fatto passi da gigante nella quantificazione e nell'analisi delle immagini, che ha fatto avanzare significativamente il campo dell'imaging delle cellule viventi.

Mantenere la qualità del campione per un film a lungo termine è una sfida di lunga data. Mentre è perspicace osservare un campione per otto o 10 ore, i vincoli logistici, come i requisiti di imaging del campione e gli strumenti di imaging disponibili, lo rendono difficile. Il nostro protocollo affronta questo problema dimostrando l'imaging a lungo termine senza influire sulla qualità del campione.

La nostra tecnica potrebbe essere facilmente adottata e applicata sul campo dai nuovi arrivati. Con un po 'di tempo e pratica, è possibile generare film a breve e lungo termine, che hanno il potenziale per produrre dati approfonditi e significativi.