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Preparazione di semi di palma dura per l'analisi di spettrometria di massa con desorbimento/ioniz...
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Biochemistry
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JoVE Journal Biochemistry
Preparation of Hard Palm Seeds for Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization-Imaging Mass Spectrometry Analysis

Preparazione di semi di palma dura per l'analisi di spettrometria di massa con desorbimento/ionizzazione-imaging laser assistita da matrice

Full Text
1,501 Views
07:55 min
June 30, 2023

DOI: 10.3791/65650-v

Gabriel R. Martins*1,2, Felipe L. Brum*1,2,3, Davi Marconi Miranda Carvalho da Silva*1,2, Livia C. Barbosa3, Ronaldo Mohana-Borges3, Ayla Sant'Ana da Silva1,2

1Laboratório de Biocatálise (LABIC),Instituto Nacional de Tecnologia, 2Departamento de Bioquímica, Instituto de Química,Universidade Federal do Rio de Janeiro, 3Centro de Espectrometria de Massas de Biomoléculas, Instituto de Biofísica Carlos Chagas Filho,Universidade Federal do Rio de Janeiro

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Questo protocollo mirava a descrivere una guida dettagliata sulla preparazione di sezioni di campioni di semi duri a basso contenuto d'acqua per l'analisi MALDI-IMS, mantenendo la distribuzione e l'abbondanza originali degli analiti e fornendo un segnale di alta qualità e una risoluzione spaziale.

La nostra ricerca si concentra sulla valorizzazione della biomassa vegetale della biodiversità tropicale. Per questo, è molto importante caratterizzare bene questi materiali in modo da poter dare loro il miglior valore e proporre le migliori destinazioni. Per questo, in questo lavoro, impieghiamo l'analisi di spettrometria di massa MALDI come tecnica caratterizzante perché è un metodo molto preciso che può darci un imaging molecolare-specifico del tessuto biologico.

Con i risultati, possiamo avere una panoramica dei principali componenti di questa biomassa vegetale e anche la loro localizzazione, e questo può guidare la nostra esplorazione di nuovi prodotti e processi da quel materiale. Tuttavia, per avere un'ottima analisi di spettrometria di massa con immagini MALDI, è molto importante avere un buon metodo di preparazione del campione, ed è esattamente quello che descriviamo in questo lavoro. I progressi tecnologici hanno portato a molte sfide nell'analisi di spettrometria di massa per immagini.

I tessuti vegetali, in particolare, rappresentano una sfida complessa a causa dei loro organi specializzati. È fondamentale per questa tecnica, questa preparazione del campione, se la preparazione del campione viene eseguita in modo inadeguato, i segnali non verranno rilevati o appariranno artefatti, portando a risultati imprecisi. Questi protocolli ci permettono di preparare una fetta sottile di semi di palma resistenti all'intestino, fungendo da prova di un concetto per la mappatura molecolare all'interno di un tessuto di semi vivi.

Quindi questa tecnica offre preziose informazioni sugli oligosaccaridi presenti in questi semi. Quindi speriamo che questa tecnica sia utile per i ricercatori con ostacoli simili. Questa tecnica può aiutare nello studio di altri semi duri o di qualsiasi altro materiale biologico che impone una sfida per essere tagliato a fette di pinna.

Ad esempio, questo protocollo può essere uno strumento per lo studio dello sviluppo e della germinazione dei semi se si sta studiando un seme duro.

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Biochimica Numero 196 Preparazione del campione Materiali botanici Fette sottili Euterpe oleracea Mappatura molecolare Semi Inclusione di gelatina Sezionamento del criostato Deposizione di matrice Ionizzazione elettrospray Acido 2 5-diidrossibenzoico Soluzione di metanolo Acido trifluoroacetico E. precatoria E. edulis Modelli di metaboliti oligomeri esoso

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