Microscopia a due fotoni sensibile alla polarizzazione per una caratterizzazione strutturale dell'amiloide label-free

Il nostro obiettivo è quello di sviluppare nuovi marcatori ottici e tecniche per la rilevazione di aggregati proteici chiamati amiloidi. Sono coinvolti in una serie di malattie come il morbo di Alzheimer e il diabete di tipo due. Quindi, per curare queste malattie, abbiamo bisogno di tecniche per visualizzare gli amiloidi.

Abbiamo dimostrato che la microscopia a due fotoni può essere utilizzata per rilevare l’orientamento delle fibrille amiloidi all’interno delle sovrastrutture amiloidi. Può essere ottenuto non solo utilizzando coloranti specifici per l’amiloide, ma anche utilizzando l’autofluorescenza degli amiloidi. Poiché la nostra tecnica opera su fenomeni ottici non lineari, può ottenere una fotoselezione angolare ridotta, migliorare la risoluzione assiale, una minore diffusione della luce, una minore fototossicità e una penetrazione del campione più profonda rispetto alla tecnica microscopica a fluorescenza a un fotone.

La microscopia a fluorescenza a due fotoni sensibile alla polarizzazione è uno strumento promettente per l’imaging della struttura interna di varie strutture biologiche complesse, non solo aggregati proteici, ma anche vescicole di DNA e membrane lipidiche.