Name: Un metodo efficiente e riproducibile per la produzione di piante composite mediante trasformazione delle radici pelose a base di Agrobacterium rhizogenes (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-06-30T14:20:00.000+00:00
Duration: 4 min 9 s
Description: Scopri un metodo efficiente di trasformazione delle radici pelose con Agrobacterium rhizogenes per produrre piante composite. Questa tecnica semplificata migliora gli studi sulla funzione genica vegetale.

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Questo lavoro è stato sostenuto dal Fondo di ricerca dell'Università di Liaocheng (318012028) e dalla Fondazione di Scienze Naturali della Provincia di Shandong (ZR2020MC034).

1. Condizioni di crescita delle piante e coltura di A. rhizogenes 
<ol><li>Semina di semi NOTA: I semi di soia selvatica sono stati raccolti nella contea di Yanggu, Liaocheng, Cina; semi di S. americanum e zucca varietà locale Yinsu sono stati acquistati da un mercato.<ol><li>Raccogli semi di soia selvatica, S. americanum e la varietà locale di zucca, seminali in vermiculite ad una profondità di 1 cm e annaffiali accuratamente. Pianta 20 semi in scatole di plastica da 8 cm x 11 cm x 9 cm. Coltivare le piante in una camera di crescita a 24 ± 2 °C con un ciclo di 16 ore di luce/8 ore di buio a circa il 70% di umidità relativa. NOTA: I manti di semi di soia selvatica devono essere rotti prima della semina. Se la domanda di ricerca si concentra sulle interazioni tra piante e microrganismi, semi, vermiculite, scatole di plastica e acqua devono essere sterilizzati prima dell'uso.</li>
		<li>Attivazione e coltura di A. rhizogenes K599 NOTA: Il ceppo A. rhizogenes K599 aveva un vettore binario pRed13052 portatore di un gene reporter fluorescente rosso DsRed2.
		<ol><li>Rimuovere il ceppo K599 di A. rhizogenes da un congelatore a -80 °C e attivare i batteri su un terreno solido LB (con 50 mg/L di kanamicina e 50 mg/L di streptomicina) a 28 °C per 48 ore.</li>
			<li>Prelevare un singolo clone del ceppo K599 e coltivarlo in 1 mL di terreno liquido contenente antibiotici LB per 12 ore.</li>
			<li>Distribuire uniformemente 500 μL della sospensione batterica su terreno solido contenente antibiotico, seguito da incubazione a 28 °C per 24 ore.</li>
		</ol></li>
	</ol></li>
</ol>2. Metodo di trasformazione della radice pelosa mediata da A. rhizogenes
<ol><li>Incisione ipocotilicica<ol><li>Dopo 7 giorni (definire la semina dei semi come giorno 0), le cotiledoni della piantina si sono appena dispiegate (Figura 1A), utilizzare un bisturi sterilizzato e affilato per tagliare circa 0,5-1 cm dell'ipocotile (Figura 1B). Scartare la radice primaria e parte dell'ipocotile parziale. NOTA: Utilizzare il bisturi con cura.</li>
	</ol></li>
	<li>Inoculazione K599<ol><li>Rivestire l'incisione ipocotilicica con batteri K599 (Figura 1C).</li>
		<li>Piantare le piantine in vermiculite umida (Figura 1D).</li>
		<li>Infettare 30 piante di ogni specie attraverso la trasformazione delle radici pelose mediata da A. rhizogenes. Innaffia ogni pianta con 5 ml di sospensione batterica K599 risospesa (OD600 = 0,5-0,6) in un quarto di forza (0,25x) Gamborg B-5 terreno di base (Figura 1E).</li>
		<li>Coprire i vasi con un sacchetto di plastica altamente trasparente (Figura 1F) e metterli in una camera di crescita.</li>
	</ol></li>
</ol>3. Produzione di radici pelose
<ol><li>Coltiva le piante per ~ 12 giorni dopo l'inoculazione, nuove radici pelose saranno indotte e generate nel sito di incisione. Dopo 15 giorni, le lunghezze delle radici pelose raggiungono tipicamente i 2-5 cm (Figura 2).</li>
	<li>Per determinare se le radici pelose prodotte sono transgeniche, esaminare l'espressione dei geni reporter dipendenti dal vettore trasformato in K599.<ol><li>Rilevare l'espressione del gene reporter DsRed2 utilizzando un sistema di imaging a chemiluminescenza con luce di eccitazione verde a 540 nm ed emissione a 600 nm (Figura 2B, Figura 2D e Figura 2F).</li>
	</ol></li>
</ol>

Metodo di trasformazione della radice pelosa in un solo passaggio per l'avanzamento della biologia correlata alle radici

<ol><li>Chilton, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Agrobacterium+rhizogenes+inserts+T-DNA+into+the+genome+of+the+host+plant+root+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Agrobacterium rhizogenes inserts T-DNA into the genome of the host plant root cells.</a> Nature. 295, 432-434 (1982).</li>
<li>Fan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+fast%2C+simple%2C+high+efficient+and+one-step+generation+of+composite+cucumber+plants+with+transgenic+roots+by+Agrobacterium+rhizogenes-mediated+transformation%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Cell%2C+Tissue+and+Organ+Culture+%28PCTOC%29%22%5BJournal%5D)">A fast, simple, high efficient and one-step generation of composite cucumber plants with transgenic roots by Agrobacterium rhizogenes-mediated transformation.</a> Plant Cell, Tissue and Organ Culture (PCTOC). 141, 207-216 (2020).</li>
<li>Du, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+targeted+mutagenesis+in+soybean+by+TALENs+and+CRISPR%2FCas9%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Efficient targeted mutagenesis in soybean by TALENs and CRISPR/Cas9.</a> Journal of Biotechnology. 217, 90-97 (2016).</li>
<li>Nguyen, D. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+efficient+hairy+root+system+for+validation+of+plant+transformation+vector+and+CRISPR%2FCas+construct+activities+in+cucumber+%28Cucumis+sativus+L.%29%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Plant+Science%22%5BJournal%5D)">An efficient hairy root system for validation of plant transformation vector and CRISPR/Cas construct activities in cucumber (Cucumis sativus L.).</a> Frontiers in Plant Science. 12, 770062(2022).</li>
<li>Liu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AtGCS+promoter-driven+clustered+regularly+interspaced+short+palindromic+repeats%2FCas9+highly+efficiently+generates+homozygous%2Fbiallelic+mutations+in+the+transformed+roots+by+Agrobacterium+rhizogenes-mediated+transformation%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Plant+Science%22%5BJournal%5D)">AtGCS promoter-driven clustered regularly interspaced short palindromic repeats/Cas9 highly efficiently generates homozygous/biallelic mutations in the transformed roots by Agrobacterium rhizogenes-mediated transformation.</a> Frontiers in Plant Science. 13, 952428(2022).</li>
<li>Irigoyen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plant+hairy+roots+enable+high+throughput+identification+of+antimicrobials+against+Candidatus+Liberibacter+spp%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Plant hairy roots enable high throughput identification of antimicrobials against Candidatus Liberibacter spp.</a> Nature Communications. 11 (1), 5802(2020).</li>
<li>Plasencia, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eucalyptus+hairy+roots%2C+a+fast%2C+efficient+and+versatile+tool+to+explore+function+and+expression+of+genes+involved+in+wood+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Biotechnology+Journal%22%5BJournal%5D)">Eucalyptus hairy roots, a fast, efficient and versatile tool to explore function and expression of genes involved in wood formation.</a> Plant Biotechnology Journal. 14 (6), 1381-1393 (2016).</li>
<li>Gutierrez-Valdes, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hairy+root+cultures-a+versatile+tool+with+multiple+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Plant+Science%22%5BJournal%5D)">Hairy root cultures-a versatile tool with multiple applications.</a> Frontiers in Plant Science. 11, 33(2020).</li>
<li>Stougaard, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Agrobacterium+rhizogenes+as+a+vector+for+transforming+higher+plants.+Application+in+Lotus+corniculatus+transformation%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Agrobacterium rhizogenes as a vector for transforming higher plants. Application in Lotus corniculatus transformation.</a> Methods in Molecular Biology. 49, 49-61 (1995).</li>
<li>Kereszt, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Agrobacterium+rhizogenes-mediated+transformation+of+soybean+to+study+root+biology%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">Agrobacterium rhizogenes-mediated transformation of soybean to study root biology.</a> Nature Protocols. 2 (4), 948-952 (2007).</li>
<li>Ho-Plágaro, T., Huertas, R., Tamayo-Navarrete, M. I., Ocampo, J. A., García-Garrido, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+improved+method+for+Agrobacterium+rhizogenes-mediated+transformation+of+tomato+suitable+for+the+study+of+arbuscular+mycorrhizal+symbiosis%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Methods%22%5BJournal%5D)">An improved method for Agrobacterium rhizogenes-mediated transformation of tomato suitable for the study of arbuscular mycorrhizal symbiosis.</a> Plant Methods. 14, 34(2018).</li>
<li>Yu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Overexpression+of+phosphatidylserine+synthase+IbPSS1+affords+cellular+Na%2B+homeostasis+and+salt+tolerance+by+activating+plasma+membrane+Na%2B%2FH%2B+antiport+activity+in+sweet+potato+roots%5BTitle%5D)+AND+%22Horticulture+Research%22%5BJournal%5D)">Overexpression of phosphatidylserine synthase IbPSS1 affords cellular Na+ homeostasis and salt tolerance by activating plasma membrane Na+/H+ antiport activity in sweet potato roots.</a> Horticulture Research. 7, 131(2020).</li>
<li>Boisson-Dernier, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Agrobacterium+rhizogenes-transformed+roots+of+Medicago+truncatula+for+the+study+of+nitrogen-fixing+and+endomycorrhizal+symbiotic+associations%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Plant-Microbe+Interactions%3A+MPMI%22%5BJournal%5D)">Agrobacterium rhizogenes-transformed roots of Medicago truncatula for the study of nitrogen-fixing and endomycorrhizal symbiotic associations.</a> Molecular Plant-Microbe Interactions: MPMI. 14 (6), 695-700 (2001).</li>
<li>Fan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((One-step+generation+of+composite+soybean+plants+with+transgenic+roots+by+Agrobacterium+rhizogenes-mediated+transformation%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Plant+Biology%22%5BJournal%5D)">One-step generation of composite soybean plants with transgenic roots by Agrobacterium rhizogenes-mediated transformation.</a> BMC Plant Biology. 20 (1), 208(2020).</li>
<li>Fan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anthocyanin%2C+a+novel+and+user-friendly+reporter+for+convenient%2C+non-destructive%2C+low+cost%2C+directly+visual+selection+of+transgenic+hairy+roots+in+the+study+of+rhizobia-legume+symbiosis%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Methods%22%5BJournal%5D)">Anthocyanin, a novel and user-friendly reporter for convenient, non-destructive, low cost, directly visual selection of transgenic hairy roots in the study of rhizobia-legume symbiosis.</a> Plant Methods. 16, 94(2020).</li>
<li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+AtMYB75+as+a+reporter+gene+in+the+study+of+symbiosis+between+tomato+and+Funneliformis+mosseae%5BTitle%5D)+AND+%22Mycorrhiza%22%5BJournal%5D)">Application of AtMYB75 as a reporter gene in the study of symbiosis between tomato and Funneliformis mosseae.</a> Mycorrhiza. 33 (3), 181-185 (2023).</li>
<li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+set+of+novel+binary+expression+vectors+for+plant+gene+function+analysis+and+genetic+transformation%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Plant+Science%22%5BJournal%5D)">Development of a set of novel binary expression vectors for plant gene function analysis and genetic transformation.</a> Frontiers in Plant Science. 13, 1104905(2023).</li>
<li>Li, Q. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phytochrome+B+inhibits+darkness-induced+hypocotyl+adventitious+root+formation+by+stabilizing+IAA14+and+suppressing+ARF7+and+ARF19%5BTitle%5D)+AND+%22The+Plant+Journal%3A+For+Cell+and+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Phytochrome B inhibits darkness-induced hypocotyl adventitious root formation by stabilizing IAA14 and suppressing ARF7 and ARF19.</a> The Plant Journal: For Cell and Molecular Biology. 105 (6), 1689-1702 (2021).</li>
</ol>

Gli autori non hanno conflitti di interesse da dichiarare.

Il metodo della radice pelosa mediata da A. rhizogenes è un metodo più semplice ed efficiente per la produzione di piante composite rispetto al metodo di iniezione ipocotile. Il metodo ARM in un'unica fase migliora significativamente l'efficienza della trasformazione delle radici pelose, riduce il tempo per produrre radici pelose, aumenta il numero di radici pelose e riduce la quantità di lavoro coinvolto. Il protocollo di trasformazione migliorato è ottimale per studi sulle simbiosi tra leguminose e rizobie e t...

Agrobacterium rhizogenes è un batterio del suolo gram-negativo della famiglia Rhizobiaceae. A. rhizogenes può infettare quasi tutte le dicotiledoni, alcune monocotiledoni e singole gimnosperme attraverso le ferite, producendo radici pelose nelle piante infette. Il batterio trasporta il plasmide Ri (che induce la radice) e il T-DNA del plasmide Ri trasporta il gene di sintesi dell'opina e i geni rol (geni del locus radicale). Dopo che il T-DNA del plasmide Ri entra in una cellula vegetale ed è integrato in un cromosoma ospite, l'espressione dei geni rol induce la produzione di radici pelose1. Un vettore di espressione binaria vegetale che trasporta un gene bersaglio viene trasformato in A. rhizogenes e l'A. rhizogenes trasformato viene utilizzato per infettare una pianta. Le radici transgeniche possono essere indotte nelle piante infette, producendo piante composite contenenti radici transgeniche e steli e gemme non transgenici. Generalmente, una pianta composita può essere ottenuta entro 14-20 giorni. A. La trasformazione delle radici pelose mediata da rizogeni non è generalmente limitata dal genotipo nelle piante dicotiledoni2. Le radici pelose prodotte da piante infette da A. rhizogenes sono caratterizzate da un rapido tasso di crescita, ereditarietà stabile e facilità d'uso. La trasformazione della radice pelosa mediata da A. rhizogenes è attualmente ampiamente utilizzata per studiare la biologia correlata alle radici. Inoltre, la trasformazione delle radici pelose può anche essere utilizzata per convalidare e ottimizzare l'efficienza di target-editing del sistema CRISPR/Cas9 3,4,5 e la localizzazione subcellulare delle proteine. Pertanto, la trasformazione delle radici pelose è uno strumento importante nella ricerca sulla funzione genica delle piante, sull'ingegneria metabolica e sulle interazioni tra radici e microrganismi della rizosfera 6,7,8.
Le piante composite contenenti radici transgeniche ottenute attraverso la trasformazione delle radici pelose sono state ampiamente prodotte nelle piante dicotiledoni, specialmente nei legumi. Il metodo tradizionale di iniezione dell'ipocotile con A. rhizogenes è stato utilizzato per produrre Lotus corniculatus 9, soia 10, pomodoro11, patate dolci12 e molte altre piante 5,8. Il metodo di iniezione di ipocotile è inefficiente ed è probabile che causi la morte di piante ipocotiliche giovani o minuscole. Pertanto, il metodo è stato migliorato tagliando le radici embrionali, rivestendo l'incisione della piantina con A. rhizogenes e quindi posizionando l'ipocotile su terreno di coltura sterile per la coltivazione del radicamento13. Tuttavia, questi passaggi vengono eseguiti in un ambiente sterile e le fasi operative sono relativamente ingombranti. In particolare, le piante composite risultanti devono essere trapiantate, il che aumenta la quantità di lavoro. Nel lavoro precedente, la trasformazione della radice pelosa mediata da A. rhizogenes (ARM) è stata stabilita in cetriolo, soia, Lotus japonicus, Medicago truncatula e pomodoro 2,14,15,16,17. La radice primaria e l'ipocotile parziale sono stati rimossi, il sito di incisione dell'ipocotile rimanente è stato rivestito con A. rhizogenes trasformato e la piantina è stata quindi piantata in vermiculite sterile umida. Dopo 12 giorni di coltivazione, le radici pelose sono state prodotte nel sito di incisione. Il metodo ARM one-step è altamente efficiente e richiede meno tempo per produrre radici pelose. Anche il trapianto dopo aver formato radici pelose non è necessario. Poiché la contaminazione microbica può essere evitata senza trapianto, il metodo ARM in un'unica fase può essere particolarmente utile quando si studiano le interazioni tra piante e microrganismi, come la fissazione simbiotica dell'azoto tra leguminose e rizobia e le simbiosi tra piante e funghi micorrizici arbuscolari. In questo articolo, viene fornito un dettagliato protocollo di trasformazione delle radici pelose mediato da A. rhizogenes con esempi di piante composite prodotte in soia selvatica, Solanum americanum e zucca. Con il protocollo, i ricercatori possono eseguire senza problemi la trasformazione ARM in un solo passaggio.

<table><tbody><tr><td>kanamicina</td><td>Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.</td><td></td><td></td>A506636</tr><tr><td>LB medium</td><td>Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.</td><td></td><td></td>B540113</tr><tr><td>scatola di plastica</td><td>LiaoSu</td><td></td><td>8 cm x 11 cm x 9 cm</td></tr><tr><td>zucca</td><td></td><td></td><td>varietà locale Yinsu</td></tr><tr><td>streptomicina</td><td>Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd.</td><td>A610494&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Tanon-5200Multi macchina</td><td>Tanon Co., Ltd., Cina</td><td>5200Multi</td><td>chemiluminescenza sistema</td></tr><tr><td></td><td></td><td></td> di imaging pomodoro <td>varietà locale Zhongshu4</td></tr><tr><td>soia</td><td></td><td></td> selvatica <td>raccolta nella contea di Yanggu, Liaocheng, Cina</td></tr></tbody></table>

un metodo efficiente e riproducibile per la produzione di piante composite mediante trasformazione delle radici pelose a base di agrobacterium rhizogenes

An Efficient and Reproducible Method for Producing Composite Plants by Agrobacterium rhizogenes-Based Hairy Root Transformation

La produzione di piante composite con radici transgeniche e steli e gemme non transgenici utilizzando la trasformazione delle radici pelose mediata da Agrobacterium rhizogenes è un potente strumento per studiare la biologia correlata alle radici. La trasformazione della radice pelosa è stabilita in una vasta gamma di dicotiledoni e in diverse specie di monocotiledoni ed è quasi indipendente dal genotipo. Il metodo tradizionale di iniezione di ipocotile con A. rhizogenes per ottenere piante composite è inefficiente, richiede tempo, laborioso e spesso causa la morte di piante ipocotiliche tenere e minuscole. In precedenza è stata stabilita una trasformazione delle radici pelose in un solo passaggio altamente efficiente, mediata da A. rhizogenes , che elimina la necessità di trapianto dopo aver prodotto radici pelose. In questo studio, un ipocotile parziale e la radice primaria sono stati rimossi, il sito di incisione ipocotilicica è stato rivestito con A. rhizogenes, e quindi gli ipocotili sono stati piantati in vermiculite sterile. Dopo 12 giorni di coltivazione, l'incisione ipocotilicica si è espansa e sono state indotte nuove radici pelose. Questo articolo fornisce il protocollo dettagliato di un metodo di trasformazione in un'unica fase mediato da A. rhizogenes, con la sua efficacia dimostrata dalla produzione di piante composite di soia selvatica, Solanum americanum e zucca.

Trasformazione della radice pelosa mediata da A. rhizogenes altamente efficiente Le radici pelose sono state prodotte nel sito di incisione ipocotilicica 12 giorni dopo l'inoculazione con K599 ingegnerizzato. Le radici pelose transgeniche sono state determinate in base all'espressione del gene reporter contenuto nel vettore binario. Le radici transgeniche trasformate con il gene reporter DsRed2 della soia selvatica composita, S. americanum e la zucca sono state osservate sot...

Qui, forniamo il protocollo dettagliato di un metodo di trasformazione in un'unica fase mediato da Agrobacterium tumefaciens per produrre piante composite.

Un metodo efficiente e riproducibile per la produzione di piante composite mediante trasformazione delle radici pelose a base di Agrobacterium rhizogenes

Producing composite plants with transgenic roots and nontransgenic stems and buds using Agrobacterium rhizogenes-mediated hairy root transformation is a ...

Il nostro team si concentra sulla trasformazione delle radici pelose a base di Agrobacterium rhizogenes. La trasformazione delle radici pelose è cruciale nello studio della funzione genica delle piante, dell'ingegneria metabolica e delle interazioni tra radici e microrganismi della rizosfera. Questo articolo fornisce un metodo di trasformazione in un'unica fase, mediato da Agrobacterium rhizogenes.La trasformazione della radice pelosa è stabilita in varie specie di dicotiledoni e monocotiledoni ed è quasi indipendente dal genotipo. Il metodo one-step mediato da Agrobacterium rhizogenes per indurre radici pelose è più semplice ed efficiente per la creazione di piante composite rispetto al metodo di iniezione ipocotile. Il metodo di iniezione dell'ipocotile è inefficiente ed è probabile che causi la morte di piante ipocotiliche giovani o minuscole.Il metodo mediato da Agrobacterium rhizogenes in un'unica fase è altamente efficiente e richiede meno tempo per produrre radici pelose. Inoltre, non è necessario trapiantare oltre la formazione di radici pelose. I geni di regolazione del segno alfa e i geni di sintesi del segno beta sono stati utilizzati come marcatori di screening virale nella trasformazione delle radici pelose mediata da Agrobacterium rhizogenes.

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Si dimostra come le piante radice pelosa compositi possono essere utilizzati per studiare le interazioni pianta-Rhizobium e nodulazione nelle difficili da trasformare la...

Generazione di piante Composite in Medicago truncatula Per saggi nodulazione

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Scopri un metodo efficiente di trasformazione delle radici pelose con Agrobacterium rhizogenes per produrre piante composite. Questa tecnica semplificata migliora gli studi sulla funzione genica vegetale.

Un metodo efficiente e riproducibile per la produzione di piante composite mediante trasformazione delle radici pelose a base di Agrobacterium rhizogenes (Video) | JoVE Journal

Un metodo efficiente e riproducibile per la produzione di piante composite mediante trasformazione delle radici pelose a base di Agrobacterium rhizogenes

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