Name: Un metodo point-of-care con uno strumento di supporto decisionale integrato per stimare lanemia a livello di popolazione (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-01-19T13:20:00.000+00:00
Duration: 5 min 35 s
Description: Scopri un metodo point-of-care con software integrato per stimare rapidamente l'emoglobina e classificare l'anemia. Questo sistema riduce i tempi di attesa e supporta decisioni cliniche immediate nei programmi di salute pubblica.

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Il team ringrazia il signor J Suresh, il signor Medappa, la signora Madhu e l'intero team di Kavintech Corporation, Bangalore, che hanno sviluppato con successo lo strumento di supporto decisionale e il software. Gli autori desiderano anche ringraziare il Consiglio indiano per la ricerca medica, il governo indiano per i finanziamenti e il Dipartimento della salute pubblica e del benessere della famiglia, Telangana per aver facilitato lo studio.

Il protocollo segue le linee guida dell'Institutional Review Board dell'ICMR-National Institute of Nutrition, Hyderabad, India (IRB. n. 08/I/2018).
1. Raccolta di campioni capillari aggregati per l'analisi dell'Hb utilizzando l'analizzatore ematologico 10,11
<ol><li>Configurazione della stampante e dello scanner di codici a barre<ol><li>Collegare la stampante di codici a barre al sistema portatile.</li>
		<li>Installare il driver della stampante di codici a barre sul laptop.</li>
		<li>Condividere la stampante nelle proprietà della stampante.</li>
		<li>Verificare la presenza di eventuali errori nella stampa del codice a barre nell'applicazione.</li>
		<li>Collegare lo scanner di codici a barre all'analizzatore automatico e si configurerà automaticamente.</li>
		<li>Fare doppio clic sull'icona per aprire il software applicativo installato sul computer desktop/portatile. Immettere le credenziali autorizzate nella pagina di accesso. NOTA: La home page dell'applicazione è costituita da schede per il caricamento dei risultati di laboratorio, i rapporti di controllo della qualità (QC) della stampa di codici a barre e il rapporto ematologico finale.</li>
		<li>Per generare codici a barre, fare clic sulla scheda Stampa codici a barre . L'elenco dei partecipanti viene visualizzato automaticamente nella scheda di stampa del codice a barre dopo aver inserito dettagli geografici come i nomi dei villaggi.</li>
		<li>Fare clic sulla selezione del display. Viene visualizzato l'elenco. Fare clic su Stampa codice a barre.</li>
	</ol></li>
	<li>Raccolta di campioni di sangue capillare aggregato (Figura 1)<ol><li>Utilizzare una delle tre dita medie della mano sinistra per il prelievo di sangue capillare in un paziente adulto.</li>
		<li>Chiedere al partecipante di sedersi in una posizione comoda, che fornisca al flebotomo l'accesso al dito.</li>
		<li>Pulisci il dito con una salvietta imbevuta di alcol (contenente il 70% di alcol isopropilico) e lascialo asciugare.</li>
		<li>Etichettare i microtainer con le informazioni relative al partecipante (codice a barre) subito dopo l'identificazione del partecipante e prima della puntura cutanea.</li>
		<li>Raccogliere il campione di sangue utilizzando una lancetta di sicurezza monouso (lancetta attivata dal contatto 2,0 X 1,5 mm). Per raccogliere il campione di sangue, perforare la pelle a circa 1 cm dalla punta del dito tra il punto medio e il lato del dito. La puntura deve avvenire sulla superficie del palmo rivolto verso l'alto del polpastrello del medio o dell'anulare.</li>
		<li>Pulisci la prima goccia di sangue e raccogli i campioni di sangue successivi in un microtainer rivestito.</li>
		<li>Non massaggiare il dito.</li>
		<li>Posizionare il microtainer verticalmente sotto il sito di puntura in modo che le goccioline di sangue fluiscano liberamente nel tubo senza applicare pressione. Ripetere fino a raccogliere 4-6 gocce (circa 200 μL).</li>
		<li>Mescolare delicatamente il contenuto agitando e capovolgendo solo dopo aver tappato il contenitore del microtainer.</li>
		<li>Una volta raccolte 3-4 gocce di sangue, premere un batuffolo di cotone sulla punta del dito e far sedere il partecipante. Applicare una pressione manuale per fermare l'emorragia.</li>
		<li>Smaltire immediatamente la lancetta secondo le linee guida per lo smaltimento dei rifiuti biologici.</li>
	</ol></li>
</ol>2. Analisi con analizzatore ematologico
<ol><li>Configurazione dell'autoanalizzatore con il software<ol><li>Scarica e installa i componenti del server FileZilla (127.0.0.1) sul laptop. Nota: disabilita il firewall di Windows o qualsiasi firewall di terze parti.</li>
		<li>Installare il software personalizzato sul laptop e copiare il percorso del percorso del file dell'American Society for Testing and Materials (ASTM) (C/programfiles x86/intended folder/ Web/wb/astmfiles)</li>
		<li>Nell'applicazione server FileZilla, creare l'utente e la password e mappare la posizione del file astm.</li>
		<li>Nel computer dell'analizzatore automatico, configurare la stessa serie IP (nelle impostazioni principali).</li>
		<li>Nell'analizzatore automatico, modificare l'opzione di sincronizzazione astm in FTP e fornire l'IP e le credenziali configurate sul laptop (ad esempio, 192.168.1.1 e nome utente e password FileZilla configurati).</li>
		<li>Riavviare l'analizzatore automatico e testare il processo di sincronizzazione dei file una volta pronto.</li>
	</ol></li>
	<li>Analisi dei campioni di sangue mediante autoanalizzatore<ol><li>Utilizzare un analizzatore ematologico completamente automatizzato e portatile in modo che possa essere utilizzato con l'impostazione POC per fornire una misurazione istantanea dell'Hb e di altri indici dei globuli rossi (volume corpuscolare medio [MCV], emoglobina corpuscolare media [MCH], concentrazione media di emoglobina corpuscolare [MCHC] e larghezza di distribuzione dei globuli rossi [RDW]).</li>
		<li>Controllare i livelli di solventi (almeno 1/4 del flacone di reagente è pieno) e verificare se sono presenti in quantità sufficienti. NOTA: I solventi sono costituiti da soluzione enzimatica, soluzione lisante e soluzione isotonica tamponata (Tabella dei materiali).</li>
		<li>Accendere lo strumento facendo clic sull'interruttore ON/OFF sulla macchina. Assicurarsi che lo strumento sia collegato a un laptop tramite un cavo FTP (Twined Pair).</li>
		<li>Controllare lo schermo del display a cristalli liquidi (LCD) per capire se la temperatura esterna è suscettibile di avviare l'analisi o meno. Una temperatura >35 °C non è consigliabile. Collocare la macchina in un ambiente in cui la temperatura ambiente sia di <35 °C.</li>
		<li>Una volta completata l'inizializzazione, consentire all'analizzatore di eseguire automaticamente un ciclo di avvio (la funzione di avvio automatico è attivata di default).</li>
		<li>Dopo il ciclo di avvio, controllare il display dello strumento per il conteggio dei pezzi grezzi di riferimento. Assicurarsi che il numero di pezzi grezzi di riferimento non superi i seguenti limiti di parametro: Hb < 0,3 g/dL e WBC < 0,3 x 103/mm3, RBC < 0,02 x 106/mm3; HCT 0% e PLT < 10 x 103/mm3. Quindi, premere il pulsante √ per convalidare i risultati vuoti.</li>
		<li>Se l'analizzatore non esegue automaticamente un ciclo di avvio al termine della fase di inizializzazione, premere il tasto START-UP sul pannello frontale dello strumento per avviare il ciclo.</li>
		<li>A questo punto, l'analizzatore mostrerà una pagina di accesso. Immettere il nome utente e la password predefiniti. Premere il pulsante √ per procedere ulteriormente.</li>
		<li>Prima dell'analisi del campione, eseguire tre livelli di controlli (basso, normale e alto) per verificare la precisione dell'analizzatore. Conservare il controllo a 2-8 °C e portarlo a temperatura ambiente (RT) prima dell'uso. Mescolare delicatamente i controlli più volte prima dell'uso. NOTA: I controlli vengono acquistati come reagenti pronti all'uso dal produttore e caricati così come sono. I flaconcini vengono conservati a 4 °C. La normale durata di conservazione è di 15 giorni. I controlli dovrebbero essere monitorati regolarmente utilizzando la trama di Levey Jenning. Se il valore di controllo scende al di sopra o al di sotto di 3 SD, eseguire una pulizia concentrata utilizzando la soluzione di lavaggio fornita dal fornitore.</li>
		<li>Una volta conclusa con successo la fase di controllo qualità, prepararsi per l'analisi del campione.</li>
		<li>Scansionare il codice a barre attaccato al contenitore del campione con lo scanner collegato all'analizzatore e premere il segno X .</li>
		<li>Menziona il sesso del soggetto (maschio o femmina) e premi il pulsante √ per procedere ulteriormente.</li>
		<li>Lo strumento mostrerà i dettagli del soggetto insieme a un codice. Premere X se i dati inseriti sono errati.</li>
		<li>Prima di caricare il campione di sangue nella macchina, mescolare delicatamente e accuratamente il campione di sangue.</li>
		<li>Rimuovere il tappo con cautela per non consentire la fuoriuscita di sangue.</li>
		<li>Posizionare la provetta sotto l'ago di campionamento e muovere la provetta verso l'alto fino a quando l'ago di campionamento non entra nel sangue.</li>
		<li>Premere l'interruttore di avvio . L'ago di campionamento aspira 10 μL di sangue. Il ciclo di analisi durerà circa 60 s. Al termine del ciclo, il risultato verrà visualizzato sul pannello LED.</li>
		<li>Stampa i risultati facendo clic sull'icona Stampante .</li>
		<li>Fare clic sulla freccia indietro per procedere con il secondo campione.</li>
		<li>Una volta terminata l'analisi, carica i risultati del test di laboratorio.</li>
	</ol></li>
	<li>Caricare i dati dall'analizzatore al server.<ol><li>Collegare il sistema a qualsiasi provider di servizi Internet che fornisca una velocità minima di 20 mbps.</li>
		<li>Fare doppio clic sull'icona per aprire l'icona del software applicativo, che appare sul desktop dopo l'installazione. Immettere le credenziali autorizzate nella pagina di accesso. NOTA: La home page dell'applicazione è costituita da schede per il caricamento dei risultati di laboratorio, la stampa di codici a barre, i rapporti QC e il rapporto ematologico finale. La pagina di caricamento dei risultati dei test di laboratorio mostra i test completati. Il nome del file è costituito dall'ID della macchina e dalla data dell'analisi in formato .astm.</li>
		<li>Fare clic sul pulsante Carica risultati . Una volta che i risultati sono stati caricati correttamente, nel server, i file .astm vengono convertiti in .csv formato e i file convertiti appariranno nel referto ematologico. Scaricare i file in formato .astm per i record. NOTA: La pagina visualizzerà che i file popup sono stati caricati correttamente. Se sono presenti file duplicati, verranno identificati.</li>
		<li>Per i partecipanti per i quali vengono caricati i file ASTM, la decisione sullo stato dell'anemia (basata sulla Tabella 1 e sulla Tabella 2) verrà generata come report nell'applicazione web. Per visualizzare la decisione sull'anemia, accedere all'applicazione Web, fare clic su Rapporti, quindi fare clic su EDSS. Un report sarà visibile come tabella per tutti i partecipanti.</li>
		<li>Per visualizzare i risultati dei singoli test e le decisioni sullo stato dell'anemia, nonché il regime di trattamento, accedere all'applicazione di follow-up, cercare il partecipante utilizzando l'ID o il nome, fare clic sul pulsante EDSS e visualizzare i risultati.</li>
	</ol></li>
</ol>

Metodo POC e strumento integrato di supporto alle decisioni per la stima dell'anemia

<ol><li>Abhiyan, P. Ministry of Women and Child Developmen. Press Information Bureau, Government of India. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://pib.gov.in/Pressreleaseshare.aspx?PRID=1797687">https://pib.gov.in/Pressreleaseshare.aspx?PRID=1797687</a> (2020).</li>
<li>Ministry of Health and Family Welfare Government of India. , New Delhi. Available from: 
 <a target="_blank" href="https://main.mohfw.gov.in/">https://main.mohfw.gov.in/</a> (2018).</li>
<li>Neufeld, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemoglobin+concentration+and+anemia+diagnosis+in+venous+and+capillary+blood%3A+biological+basis+and+policy+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+New+York+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Hemoglobin concentration and anemia diagnosis in venous and capillary blood: biological basis and policy implications.</a> Annals of New York Academy of Sciences. 1450 (1), 172-189 (2019).</li>
<li>Haggenmüller, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Smartphone-based+point-of-care+anemia+screening+in+rural+Bihar+in+India%5BTitle%5D)+AND+%22Community+Medicine+%28Lond%29%22%5BJournal%5D)">Smartphone-based point-of-care anemia screening in rural Bihar in India.</a> Community Medicine (Lond). 3 (1), 38(2023).</li>
<li>Neogi, S. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnostic+accuracy+of+point-of-care+devices+for+detection+of+anemia+in+community+settings+in+India%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Health+Service+Research%22%5BJournal%5D)">Diagnostic accuracy of point-of-care devices for detection of anemia in community settings in India.</a> BMC Health Service Research. 20 (1), 468(2020).</li>
<li>Sharma, S., Zapatero-Rodríguez, J., Estrela, P., O'Kennedy, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Point-of-care+diagnostics+in+low+resource+settings%3A+Present+status+and+future+role+of+microfluidics%5BTitle%5D)+AND+%22Biosensors+%28Basel%29%22%5BJournal%5D)">Point-of-care diagnostics in low resource settings: Present status and future role of microfluidics.</a> Biosensors (Basel). 5 (3), 577-601 (2015).</li>
<li>Augustine, L. F., Dasi, T., Palika, R., Pullakhandam, R., Kulkarni, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Point+of+care+diagnosis+of+anemia+using+portable+auto+analyzer%5BTitle%5D)+AND+%22Indian+Pediatrics%22%5BJournal%5D)">Point of care diagnosis of anemia using portable auto analyzer.</a> Indian Pediatrics. 57 (6), 568-569 (2020).</li>
<li>Dasi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemoglobin+measurement+in+capillary+blood+by+a+portable+autoanalyzer+for+population+level+screening+of+anemia%3A+validation+in+cross-sectional+and+longitudinal+studies%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Nutrition%22%5BJournal%5D)">Hemoglobin measurement in capillary blood by a portable autoanalyzer for population level screening of anemia: validation in cross-sectional and longitudinal studies.</a> British Journal of Nutrition. 128 (6), 1108-1117 (2022).</li>
<li>Briggs, C., Kimber, S., Green, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Where+are+we+at+with+point-of-care+testing+in+haematology%5BTitle%5D)+AND+%22British+J+Haematology%22%5BJournal%5D)">Where are we at with point-of-care testing in haematology.</a> British J Haematology. 158 (6), 679-690 (2012).</li>
<li>Krleza, J. L., Dorotic, A., Grzunov, A., Maradin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Capillary+blood+sampling%3A+national+recommendations+on+behalf+of+the+Croatian+Society+of+Medical+Biochemistry+and+Laboratory+Medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Biochemical+Medicine+%28Zagreb%29%22%5BJournal%5D)">Capillary blood sampling: national recommendations on behalf of the Croatian Society of Medical Biochemistry and Laboratory Medicine.</a> Biochemical Medicine (Zagreb). 25 (3), 335-358 (2015).</li>
<li>World Health Organization. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((WHO+Guidelines+on+Drawing+Blood%3A+Best+Practices+in+Phlebotomy%29%5BTitle%5D)+AND+%22World+Health+Organization%22%5BJournal%5D)">WHO Guidelines on Drawing Blood: Best Practices in Phlebotomy).</a> World Health Organization. , (2010).</li>
<li>World Health Organization. Iron Deficiency Anaemia. Assessment Prevention and Control. A Guide for Programme Managers. World Health Organization. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://cdn.who.int/media/docs/default-source/2021-dha-docs/ida_assessment_prevention_control.pdf">https://cdn.who.int/media/docs/default-source/2021-dha-docs/ida_assessment_prevention_control.pdf</a> (2001).</li>
<li>Zaidi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Operability%2C+usefulness%2C+and+task-technology+fit+of+an+mHealth+app+for+delivering+primary+health+care+services+by+community+health+workers+in+underserved+areas+of+Pakistan+and+Afghanistan%3A+Qualitative+study%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Medical+Internet+Research%22%5BJournal%5D)">Operability, usefulness, and task-technology fit of an mHealth app for delivering primary health care services by community health workers in underserved areas of Pakistan and Afghanistan: Qualitative study.</a> Journal of Medical Internet Research. 22 (9), e18414(2020).</li>
<li>Meena, S., Rathore, M., Kumawat, P., Singh, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Challenges+faced+by+ASHAs+during+their+field+works%3A+A+cross+sectional+observational+study+in+rural+area+of+Jaipur%2C+Rajasthan%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Medicine+and+Public+Health%22%5BJournal%5D)">Challenges faced by ASHAs during their field works: A cross sectional observational study in rural area of Jaipur, Rajasthan.</a> International Journal of Medicine and Public Health. 10 (3), 97-99 (2020).</li>
<li>Neogi, S. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cost-effectiveness+of+point-of-care+devices+for+detection+of+anemia+in+community+settings+in+India%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Epidemiology+and+Global+Health%22%5BJournal%5D)">Cost-effectiveness of point-of-care devices for detection of anemia in community settings in India.</a> Clinical Epidemiology and Global Health. 14, 100995(2022).</li>
</ol>

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Il presente documento descrive un metodo point-of-care che utilizza un campione di sangue capillare aggregato e un analizzatore automatico. Il metodo è stato integrato con un software personalizzato, in grado di caricare automaticamente i risultati dell'analizzatore sul server e generare decisioni sull'anemia. Inoltre, potrebbe fornire le dosi di trattamento di IFA secondo il protocollo del programma nazionale2.
Il software personalizzato è stato progettato per integrare la stampa di codici a barre, l'esportazione dei dati ematologici e la visualizzazione dei dati. È stato progettato utilizzando un'applicazione desktop online basata su PHP che utilizza il linguaggio di scripting PHP e PHP desktop chrome con Visual Studio Code come ambiente di sviluppo integrato. HTML 5, CSS e JavaScript sono stati utilizzati per progettare l'interfaccia utente. I servizi web sono stati sviluppati utilizzando il linguaggio di scripting PHP. Un utente può stampare più codici a barre utilizzando questa applicazione desktop tramite una stampante di codici a barre. Uno scanner di codici a barre è stato utilizzato per accedere ai dati del codice a barre e inviarli all'analizzatore automatico. I dati sono stati archiviati localmente utilizzando SqlLite e sul server utilizzando il database MySql con MySql workbench come ambiente. I referti ematologici possono essere scaricati anche in formato PDF. Un protocollo di trattamento dettagliato basato sulle linee guida Anemia Mukt Bharat12 è stato integrato nell'applicazione Android (Tabella 1 e Tabella 2)2. Questo modulo ha calcolato la dose di IFA (il tipo e il numero di compresse di IFA) in base all'età, al sesso, allo stato fisiologico e al livello di Hb del partecipante. Nel caso di bambini piccoli che avranno bisogno di sciroppo di ferro, la dose (in millilitri di sciroppo) è stata calcolata in base al peso corporeo del bambino. I componenti del display del sistema elettronico di supporto alle decisioni (EDSS) includevano (i) lo stato di anemia del partecipante (grado di anemia o assenza di anemia), (ii) rappresentazione visiva della confezione IFA prescritta (rosa per una compressa da 45 mg, blu per una compressa da 60 mg per gli adolescenti e rosso per una compressa da 60 mg per gli adulti), (iii) dose (numero di compresse da somministrare per 1 mese), iv) frequenza e tempistica (giornaliera o settimanale dopo il pasto) (Figura 3).
L'attuale programma di anemia in India copre otto gruppi di età e sesso. Le dosi di trattamento sono diverse, con 5 tipi di dosi profilattiche e 7 tipi di dosi di trattamento. A causa di ciò, c'è la possibilità di errori nel processo decisionale da parte degli operatori sanitari in prima linea che hanno un'istruzione e competenze limitate. Utilizzando questo software, gli errori possono essere eliminati e l'erogazione del trattamento può essere più rapida e accurata. Pertanto, il software ha il potenziale per diventare un aiuto lavorativo per i lavoratori in prima linea per implementare programmi di controllo dell'anemia a livello di popolazione. Studi precedenti hanno dimostrato che gli operatori sanitari in prima linea potrebbero utilizzare con successo le tecnologie digitali per la raccolta dei dati e la tenuta dei registri13. Ricevere un aiuto elettronico al lavoro migliorerebbe anche l'identità percepita di questo importante personale di contatto sanitario di prima linea per la comunità14.
Il costo di base dell'analisi con questo metodo era di circa 75 INR per campione e includeva lancette, microtainer e reagenti. Anche se finora non è stata effettuata un'analisi sistematica dei costi su questo metodo, riteniamo che il costo complessivo sarebbe paragonabile ad altri metodi PoC comunemente usati come l'emoglobinometro digitale, che costa circa 104-177 INR per analisi del campione15. Inoltre, considerando gli importanti vantaggi dell'analizzatore automatico in cui è possibile ottenere marcatori come gli indici RBC, il metodo basato sull'analizzatore automatico potrebbe essere considerato promettente per l'uso in indagini basate sulla popolazione.
Per un uso ottimale del metodo integrato in ambienti di campo, è necessario seguire diversi passaggi critici. Durante la raccolta del campione di sangue, è necessario prendere precauzioni per non premere le dita. Un altro passaggio critico è stata la miscelazione dei campioni. Subito dopo la raccolta e prima dell'analisi, il campione deve essere miscelato correttamente per ottenere risultati accurati. Durante il caricamento dell'esempio, i firewall installati sul laptop dovevano essere disattivati. Il sistema è stato utilizzato al punto di utilizzo con l'ausilio di batterie da 1 KVA, che hanno sostenuto l'analizzatore per circa 4 ore.
Un limite del metodo era la sua sensibilità alla temperatura. Quando la temperatura ambiente è superiore a 35 °C, l'analizzatore funziona meglio all'interno di un veicolo con un condizionatore d'aria. Se i dati di esempio analizzati sono stati caricati due volte, il sistema ha visualizzato automaticamente il caricamento più recente, anche se tutti i file sarebbero stati disponibili nel back-end. Lo strumento di supporto alle decisioni è stato accurato nel fornire decisioni. Ma per il suo utilizzo, gli operatori sanitari in prima linea dovevano essere alfabetizzati digitalmente. Poiché il software era bilingue, non sarebbe stato difficile per l'operatore sanitario in prima linea comprendere la lingua di visualizzazione. Tuttavia, se il software deve essere scalato per stati diversi dal Telangana, la nuova lingua deve essere incorporata.
Con l'aiuto di uno strumento di supporto decisionale basato su algoritmi e di un output visivo semplificato, gli operatori sanitari in prima linea saranno in grado di trattare gli anemici e seguirli durante tutto il periodo di trattamento. Il metodo integrato ha il potenziale per lo scale-up, è completamente progettato utilizzando piattaforme open source ed è interoperabile. Questo strumento digitale fornirà un impulso sostanziale per l'implementazione degli interventi di "screening and treat" per la riduzione dell'anemia in contesti con risorse limitate.

L'anemia è un grave problema di salute pubblica a livello globale, in particolare in India. È noto che l'anemia ha un impatto negativo sulla produttività lavorativa della popolazione e sulla crescita economica del paese1. Per sfruttare gli sforzi a livello nazionale per ridurre l'anemia, l'ultimo programma di salute pubblica avviato nel 2018 è il programma Anemia Mukt Bharat (AMB). L'AMB identifica il "test" seguito da un "trattamento" personalizzato come uno degli approcci più promettenti per ridurre la prevalenza dell'anemia nei gruppi di età vulnerabili2. Tuttavia, per implementare la strategia "test and treat" dell'AMB è necessaria una stima accurata dell'emoglobina (Hb) al punto di cura (POC) per diagnosticare l'anemia. Inoltre, metodi robusti sono utili per stimare con precisione l'anemia nelle indagini comunitarie su larga scala. Gli attuali metodi POC includono dispositivi non invasivi e minimamente invasivi e utilizzano campioni di sangue capillare per la stima dell'Hb3. Tuttavia, diversi fattori pre-analitici, come la variazione delle dimensioni della puntura del dito, lo spessore della pelle e la stabilità dei dispositivi POC in condizioni ambientali, portano a misurazioni imprecise e si traducono in grandi differenze nelle stime di prevalenza 3,4,5. Pertanto, è necessario stabilire un metodo di stima dell'Hb che sia mobile, abbia un breve tempo di risposta (TAT) e sia adatto a contesti poveri di risorse6. Al fine di soddisfare queste esigenze, è stato sviluppato un metodo di raccolta del sangue capillare aggregato utilizzando una lancetta attivata al tocco (per garantire una profondità e una dimensione uniformi della puntura) per facilitare 6-8 gocce del campione di sangue a flusso libero in provette microtainer di acido etilendiamminotetraacetico di potassio (EDTA). L'Hb in questi campioni è stato poi misurato utilizzando un auto-analizzatore portatile posizionato in un veicolo presso il POC dotato di un'alimentazione ininterrotta o in un centro vicino con elettricità (Anganwadi, clinica sanitaria, Panchayath o famiglia). Uno studio di validazione che ha confrontato questo metodo con due metodi gold standard (campioni di sangue venoso appaiato e metodo della cianometamoglobina) ha mostrato un'elevata accuratezza e precisione 7,8.
Oltre a mettere a punto un metodo POC valido e affidabile, c'è bisogno di un rapido processo decisionale per facilitare lo screening e il trattamento dell'anemia a livello di popolazione. Ciò non è attualmente fattibile quando la stima dell'Hb viene effettuata presso la struttura sanitaria e un ufficiale medico supervisiona direttamente la somministrazione di integratori di ferro e acido folico (IFA). A causa della grande popolazione assistita dagli ufficiali medici presso i centri sanitari di base, c'è un ritardo significativo nell'avvio dell'intervento. C'è bisogno di una tecnologia in grado di ridurre l'onere lavorativo dell'ufficiale medico e consentire agli operatori sanitari in prima linea di eseguire l'intervento senza il coinvolgimento diretto del personale medico. Pertanto, lo studio mirava a sviluppare un'applicazione personalizzata (app eSTAR) in grado di trasmettere automaticamente i dati dalla macchina e un algoritmo integrato che fornisca supporto decisionale ai lavoratori in prima linea sul dosaggio di IFA in base ai valori di Hb, all'età e ai gruppi di genere. Il software è stato progettato utilizzando strumenti open source come PHP: linguaggio di scripting PHP (hypertext preprocessor) e PHP desktop chrome con Visual Studio Code come ambiente di sviluppo integrato. Un protocollo di trattamento dettagliato basato sulle linee guida dell'anemia Mukt Bharat è stato integrato nell'applicazione Android2.
Questo metodo integrato risponde alla crescente richiesta di ridurre i tempi di consegna dei risultati dei test, pur mantenendo l'accuratezza e la precisione. Inoltre, la capacità di fornire risultati in pochi minuti consente un rapido processo decisionale sull'inizio del trattamento e si traduce in una migliore erogazione dell'intervento9. Questo metodo integrato può essere adattato per qualsiasi indagine a livello di campo o programma di intervento che includa il test dell'Hb. Inoltre, può essere utilizzato presso la struttura sanitaria come aiuto lavorativo per il personale medico per decidere sul trattamento IFA.

<table><tbody><tr><td>ABX Miniclean&nbsp;</td><td>Horiba Ltd, Giappone</td><td>23-450-004</td><td>Soluzione enzimatica</td></tr><tr><td>ABX Minidil LMG&nbsp;</td><td>Horiba Ltd, Giappone</td><td>23-450-008</td><td>Soluzione isotonica tamponata per diluizione, manicotto e pulizia di RBC/PLT</td></tr><tr><td>ABX Minilyse&nbsp;</td><td>Horiba Ltd, Giappone</td><td>23-450-006</td><td>Misurazione dell'Hb; soluzione di lisi</td></tr><tr><td>ABX Minocal</td><td>Horiba Ltd, Giappone&nbsp;</td><td>Calibratore 2032002</td><td></td></tr><tr><td>ABX Minoclair&nbsp;</td><td>Horiba Ltd, Giappone</td><td>23-450-003</td><td>Reagente di pulizia</td></tr><tr><td>ABX Minotrol 16 - 2H</td><td>Horiba Ltd, Giappone&nbsp;</td><td>2042209</td><td>Controllo del sangue</td></tr><tr><td>ABX Minotrol 16 - 2L</td><td>Horiba Ltd, Giappone&nbsp;</td><td>2042208</td><td>Controllo del sangue</td></tr><tr><td>ABX Minotrol 16 - 2N</td><td>Horiba Ltd, Giappone&nbsp;</td><td>2042202</td><td>Autoanalizzatore per il controllo del sangue</td></tr><tr><td>&nbsp;</td><td>Horiba Ltd, Giappone</td><td>ABX Micros ES 60</td><td>La porta FTP deve essere funzionante</td></tr><tr><td>Stampante di codici a barre</td><td>Technology service corporation, USA</td><td>TSC Modello TE 244</td><td>400 Mhz 32 bit Processore RISC con 16 MB di SDRAM, 8 MB di memoria Flash</td></tr><tr><td>Scanner di codici a barre</td><td>Retsol</td><td>LS-450</td><td>Qualsiasi azienda in grado di fornire uno scanner con le seguenti specifiche: CPU a 32 bit capacità di decodifica veloce, IP 54 nominale, Fonte di luce &ndash; diodo laser visibile 650 nm, modello di scansione singolo con velocità di scansione di 100 scansioni/secondo, larghezza di scansione di 200 mm e precisione di 4 mil, angolo di scansione &ndash; Imbardata 65 gradi, rotazione 30 gradi & Passo 55 gradi, indicazione di scansione &ndash; cicalino, indicatore luminoso, modalità di scansione sia manuale che continua la scansione</td></tr><tr><td>del portaaghi BD</td><td>Becton, Dickinson and company Ltd, Dublino, Irlanda</td><td>364879</td><td></td></tr><tr><td>Lancetta attivata a contatto</td><td>Becton, Dickinson and company Ltd, Dublino, Irlanda</td><td>366594, 366593</td><td>Per i bambini di età inferiore a 1 anno, è stato raccolto un campione di sangue venoso.</td></tr><tr><td>Software personalizzato&nbsp;</td><td>Kavin Corporation, Bangalore</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>K2-EDTA Microtainer-5 mL</td><td>Becton, Dickinson and company Ltd, Dublino, Irlanda</td><td>363706</td><td>Provetta EDTA per l'analisi del profilo sanguigno con 1,0 mg di K2 EDTA, dimensioni 13 x 75 mm</td></tr><tr><td>Etichette</td><td>G-Technologies, Secunderabad, telangana</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Computer portatile</td><td>Qualsiasi</td><td>N/A</td><td>Intel Core I3-1005G1,&nbsp; 8 GB DDR4, HDD da 1 TB, 15,6 FHD LED, WIN 11 HOME&nbsp; e MS OFFICE H& S&nbsp;</td></tr></tbody></table>

un metodo point-of-care con uno strumento di supporto decisionale integrato per stimare l'anemia a livello di popolazione

A Point-of-Care Method with Integrated Decision Support Tool to Estimate Anemia at Population Level

Sono necessari solidi metodi point-of-care per stimare l'anemia a livello di popolazione. I metodi accurati sono basati sul laboratorio e non possono essere utilizzati presso il punto di cura. Per rispondere a questo avvertimento, è stato sviluppato un nuovo metodo basato su sangue capillare aggregato e un autoanalizzatore portatile per la stima dell'Hb. Inoltre, è stato sviluppato un software personalizzato per l'integrazione quasi in tempo reale dei valori di Hb dall'analizzatore automatico al server. Inoltre, è stato sviluppato uno strumento di supporto decisionale in grado di classificare immediatamente i partecipanti in diversi stadi dell'anemia. Lo strumento di supporto decisionale è stato progettato sulla base del cut-off dell'Organizzazione Mondiale della Sanità (OMS) per l'anemia a livello di popolazione ed era disponibile per tutti i gruppi di età e sesso. Questo strumento semplice e intuitivo potrebbe essere facilmente utilizzato dagli operatori sanitari in prima linea che hanno competenze tecniche limitate. Nel complesso, il metodo sviluppato potrebbe essere utilizzato presso il punto di cura ed è accurato. Questo metodo ad alto rendimento potrebbe essere utilizzato per lo screening dell'anemia a livello di popolazione per tutti i gruppi di età e sesso.

Testare la validità del metodo La validità di questo metodo è stata stabilita confrontandolo con il gold standard, che era il metodo basato sull'autoanalizzatore del sangue venoso. Lo studio di convalida è stato descritto in dettaglio altrove8. In breve, 748 volontari apparentemente sani hanno fornito un campione venoso e un campione capillare consecutivamente lo stesso giorno. Le analisi sono state condotte presso il POC. I partecipanti avevano un'ampia gamma di valori di Hb e appartenevano a categorie di stato di anemia assente, lieve, moderata e grave. Per stabilire la validità del metodo, sono state calcolate le differenze medie e i loro intervalli di confidenza. La distorsione e i limiti di accordo tra i diversi metodi sono stati stimati utilizzando l'analisi di Bland-Altman.
La differenza nei valori medi di Hb era piccola rispettivamente per il metodo dell'auto-analizzatore del sangue capillare e per il metodo dell'auto-analizzatore del sangue venoso gold standard (Tabella 3). Il grafico di Bland-Altman per il confronto tra i due metodi è presentato nella Figura 2. La differenza media e i limiti di accordo erano di 0,1 g/dL (da -1,0 a 0,8).
La stima della prevalenza dell'assenza di anemia differiva di 2,2 punti percentuali tra i due metodi. Anche le stime di prevalenza dei diversi gradi di anemia erano molto vicine, stabilendo la validità del metodo rispetto al metodo gold standard (Tabella 3).
Test del software integrato e dello strumento di supporto alle decisioni Il metodo integrato è stato sperimentato tra 68 partecipanti provenienti dal villaggio di Buggabai, Ghatkesar, Narapally. Lo strumento di supporto decisionale ha fornito con precisione lo stato dell'anemia e le dosi di IFA di questi partecipanti, che sono state verificate manualmente dall'ufficiale medico sul campo in base all'algoritmo (Tabella 4).
I risultati mostrano che il metodo POC integrato è valido e può essere utilizzato per stimare la prevalenza dell'anemia a livello di popolazione. Ad oggi, circa 16.539 decisioni sono state generate per diversi gradi di anemia utilizzando questo metodo.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65810/65810fig01.jpg"> Figura 1: Raccolta del campione e configurazione dell'analizzatore automatico. (A,B) Raccolta di un campione capillare aggregato. (C) Configurazione automatica dell'analizzatore presso il punto di cura. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65810/65810fig01large.jpg" target="_blank">Fare clic qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65810/65810fig02.jpg"> Figura 2: Trama di Bland Altman. Il grafico confronta la differenza media e i limiti di accordo tra il metodo sviluppato (metodo dell'auto-analizzatore del sangue capillare) rispetto al gold standard (metodo dell'auto-analizzatore del sangue venoso). La differenza media tra i due metodi è stata di -0,1 (IC 95%, -0,2; -0,1). Questa cifra è stata modificata con il permesso di Dasi et al.8. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65810/65810fig02large.jpg" target="_blank">Fare clic qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65810/65810fig03.jpg"> Figura 3: Strumento di supporto alle decisioni. Lo strumento visualizza il grado di anemia e la dose di trattamento con ferro e acido folico. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65810/65810fig03large.jpg" target="_blank">Fare clic qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>Popolazione</td>
			<td>Cut-off (g/dL)</td>
			<td>Anemia lieve e moderata</td>
			<td>Anemia grave</td>
		</tr><tr><td>Bambini 6-59 mesi</td>
			<td>≥11,0</td>
			<td>≥7,0–&lt;11,0</td>
			<td>&lt;7,0</td>
		</tr><tr><td>5-11 anni</td>
			<td>≥11.5</td>
			<td>≥8,0–&lt;11,5</td>
			<td>&lt;8.0</td>
		</tr><tr><td>12–19 anni (Ragazze)</td>
			<td>≥12</td>
			<td>≥8,0–&lt;12</td>
			<td>&lt;8.0</td>
		</tr><tr><td>12–14 anni (Ragazzi)</td>
			<td>≥12</td>
			<td>≥8,0–&lt;12</td>
			<td>&lt;8.0</td>
		</tr><tr><td>15–19 anni (Ragazzi)</td>
			<td>≥13</td>
			<td>≥8,0–&lt;13</td>
			<td>&lt;8.0</td>
		</tr><tr><td>Uomini</td>
			<td>≥13</td>
			<td>≥8,0–&lt;13</td>
			<td>&lt;8.0</td>
		</tr><tr><td>NPNL e donne che allattano</td>
			<td>≥12</td>
			<td>≥8,0–&lt;12</td>
			<td>&lt;8.0</td>
		</tr><tr><td>Incinta</td>
			<td>≥11</td>
			<td>≥7,0–&lt;11,0</td>
			<td>&lt;7,0</td>
		</tr></tbody></table>Tabella 1: Criteri per classificare i partecipanti a diversi gradi di anemia
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>Popolazione</td>
			<td>Dose giornaliera (dose terapeutica)</td>
		</tr><tr><td>Bambini 6-59 mesi</td>
			<td>3 mg/kg di peso corporeo (sciroppo di ferro contenente 20 mg di ferro e 100 μg di acido folico)</td>
		</tr><tr><td rowspan="2">5-9 anni</td>
			<td>45 mg di ferro + 400 μg di acido folico/giorno (fino a quando il peso corporeo non è sceso a 18,5 kg, compressa rosa)</td>
		</tr><tr><td>60 mg di ferro + 500 μg di acido folico /giorno (&gt;18,5 kg, compressa blu)</td>
		</tr><tr><td>10-11 anni</td>
			<td>120 mg di ferro + 1 mg di acido folico (compressa blu)</td>
		</tr><tr><td>12–19 anni (Ragazze)</td>
			<td>120 mg di ferro + 1 mg di acido folico (compressa blu)</td>
		</tr><tr><td>12–14 anni (Ragazzi)</td>
			<td>120 mg di ferro + 1 mg di acido folico (compressa blu)</td>
		</tr><tr><td>15–19 anni (Ragazzi)</td>
			<td>120 mg di ferro + 1 mg di acido folico (compressa blu)</td>
		</tr><tr><td>Uomini</td>
			<td>120 mg di ferro + 1 mg di acido folico (compressa rossa)</td>
		</tr><tr><td>NPNL e donne che allattano</td>
			<td>120 mg di ferro + 1 mg di acido folico (compressa rossa)</td>
		</tr><tr><td>Incinta</td>
			<td>120 mg di ferro + 1 mg di acido folico (compressa rossa)</td>
		</tr></tbody></table>Tabella 2: Protocollo di trattamento. Il dosaggio deve essere somministrato in base al peso corporeo (se il peso corporeo è inferiore rispetto all'età). I partecipanti anemici gravi sono stati indirizzati al centro sanitario di base locale. Per le dosi profilattiche, è stata seguita 1 compressa di IFA a settimana, ad eccezione delle donne in gravidanza, dove è stata somministrata 1 compressa al giorno. Per i bambini, questo era di 1 ml bisettimanale. Il trattamento è stato somministrato per 3 mesi.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td rowspan="2">Metodi</td>
			<td rowspan="2">Hb media (DS) g/dL</td>
			<td rowspan="2">Prevalenza dell'anemia (Totale) (%)</td>
			<td colspan="3">Prevalenza dei gradi di anemia (%)</td>
		</tr><tr><td>Lieve</td>
			<td>Moderato</td>
			<td>Forte</td>
		</tr><tr><td>Metodo dell'analizzatore automatico del sangue capillare</td>
			<td>11.0 (2.1)</td>
			<td>34.9</td>
			<td>19.7</td>
			<td>36.4</td>
			<td>9.1</td>
		</tr><tr><td>Metodo dell'analizzatore automatico del sangue venoso</td>
			<td>10.9 (2.0)</td>
			<td>32.2</td>
			<td>20.7</td>
			<td>37</td>
			<td>10</td>
		</tr></tbody></table>Tabella 3: Confronto tra le stime dell'Hb ottenute con il metodo dell'autoanalizzatore di sangue capillare aggregato e il metodo dell'autoanalizzatore di sangue venoso.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td rowspan="2">Fascia d'età</td>
			<td rowspan="2">N</td>
			<td rowspan="2">Hb media</td>
			<td rowspan="2">SD</td>
			<td colspan="3">Decisioni generate dal sistema integrato*</td>
		</tr><tr><td>Lieve</td>
			<td>Moderato</td>
			<td>Non anemico</td>
		</tr><tr><td>6–59 m s.l.m.</td>
			<td>11</td>
			<td>9.7</td>
			<td>1.41</td>
			<td>4</td>
			<td>5</td>
			<td>2</td>
		</tr><tr><td>5-11 anni</td>
			<td>9</td>
			<td>11.4</td>
			<td>1.59</td>
			<td>2</td>
			<td>2</td>
			<td>5</td>
		</tr><tr><td>12–14 anni</td>
			<td>4</td>
			<td>12.4</td>
			<td>1.56</td>
			<td>1</td>
			<td>1</td>
			<td>2</td>
		</tr><tr><td>NPNL</td>
			<td>28</td>
			<td>11.7</td>
			<td>1.29</td>
			<td>8</td>
			<td>6</td>
			<td>14</td>
		</tr><tr><td>Uomini</td>
			<td>16</td>
			<td>14.7</td>
			<td>1.34</td>
			<td>0</td>
			<td>3</td>
			<td>13</td>
		</tr><tr><td>Totale</td>
			<td>68</td>
			<td>11.98</td>
			<td>1.44</td>
			<td>15</td>
			<td>17</td>
			<td>36</td>
		</tr><tr><td colspan="7">*Le decisioni automatizzate sono state verificate da un ufficiale medico sul campo</td>
		</tr></tbody></table>Tabella 4: Valori medi di Hb e decisioni generate dal sistema integrato.

Un metodo accurato di stima dell'emoglobina manca al punto di cura e può ostacolare i programmi basati sulla popolazione per il trattamento dell'anemia. Pertanto, abbiamo sviluppato un metodo point-of-care basato su sangue capillare aggregato e un auto-analizzatore integrato in un'applicazione software personalizzata per classificare i valori di emoglobina in diversi gradi di anemia.

Un metodo point-of-care con uno strumento di supporto decisionale integrato per stimare l'anemia a livello di popolazione

Robust point-of-care methods are required to estimate anemia at the population level. The accurate methods are lab-based and cannot be used at the point ...

L'anemia è un grave problema di salute pubblica in India. L'approccio di screening e trattamento è considerato una strategia promettente per affrontare l'anemia. Tuttavia, finora non ci sono metodi stabiliti che potrebbero renderlo possibile al punto di cura.Abbiamo cercato di stabilire un metodo point-of-care per la stima dell'emoglobina. Abbiamo anche cercato di integrare questo metodo in un software personalizzato, che decide se un partecipante è anemico o meno, e in base ai livelli di emoglobina, l'algoritmo integrato nel software guida anche il trattamento, e tutto questo avviene in pochi secondi. Utilizzando questo protocollo, possiamo ottenere risultati accurati sulla stima dell'emoglobina, riducendo al contempo i tempi di consegna dei risultati dei test.Ciò consentirà un rapido processo decisionale sull'inizio del trattamento. Inoltre, si tradurrebbe in una migliore erogazione degli interventi. Questo metodo integrato può essere utilizzato come aiuto lavorativo per il personale medico per decidere il trattamento IFA presso la struttura sanitaria.Può anche essere adottato per qualsiasi servizio o programma di intervento a livello di campo che preveda il test dell'Hb. In futuro, vorremmo confrontare il nostro metodo con altri metodi invasivi e non invasivi di stima dell'emoglobina disponibili presso il punto di cura. Vorremmo anche studiare l'efficacia in termini di costi del nostro metodo in ambito campo.

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