Name: Modellazione dei disturbi dello spettro alcolico fetale nel pesce zebra per caratterizzare limpatto di un ambiente embrionale avverso sul comportamento sociale adulto (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-02-09T13:20:00.000+00:00
Duration: 4 min 58 s
Description: Scopri come modellare i disturbi dello spettro alcolico fetale nel pesce zebra per caratterizzare l'impatto dell'esposizione embrionale all'etanolo sul comportamento sociale adulto. Questo metodo utilizza Danio rerio per studiare le interazioni gene-ambiente.

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</ol>

<table><tbody><tr><td>Serbatoi Aquaneering ZT140 da 1,4 l Aquaneering</td><td></td><td>ZT140&nbsp;</td><td>Serbatoi per lo stimolo sociale</td></tr><tr><td>Aqueon 20 "Deluxe fluorescente Full Hood acquario luce</td><td>https://www.petco.com/shop/en/petcostore/product/aqueon-aquarium-black-24-fluorescent-deluxe-full-hood-215740</td><td></td><td>luce per il serbatoio 37-I</td></tr><tr><td>Aqueon Standard Open-Glass Glass Glass Aquarium Tank, 10 galloni</td><td>https://www.petco.com/shop/en/petcostore/product/aga-10g-20x10x12bk-tank-170917</td><td></td><td>serbatoio 37-l per il test sociale</td></tr><tr><td>Etanolo</td><td>Fisher Scienticfic&nbsp;</td><td></td><td></td>BP28184</tr><tr><td>sistema di tracciamento Ethovision XT</td><td>https://www.noldus.com/ethovision-xt</td><td></td><td></td></tr><tr><td>telecamera Basler GigE a colori compatibile</td><td>con R https://www.noldus.com/ethovision-xt</td><td></td><td></td></tr><tr><td>plastica ondulata bianca</td><td></td><td></td> https://www.homedepot.com/p/Coroplast-48-in-x-96-in-x-0-157-in-4mm-White-Corrugated-Twinwall-Plastic-Sheet-CP4896S/205351385 <td>Plastica per rivestire la parte posteriore e inferiore del serbatoio 37-I e il retro dei serbatoi utilizzati per lo stimolo sociale</td></tr></tbody></table>

modellazione dei disturbi dello spettro alcolico fetale nel pesce zebra per caratterizzare l'impatto di un ambiente embrionale avverso sul comportamento sociale adulto

Modeling Fetal Alcohol Spectrum Disorders in Zebrafish to Characterize the Impact of an Adverse Embryonic Environment on Adult Social Behavior

La Figura 2 è stata modificata da Fernandes et al.17 e mostra che l'esposizione all'etanolo embrionale attenua la risposta di shoaling esaminando la distanza dallo stimolo. I dati in Figura 2 rappresentano la distanza dallo stimolo sociale durante la prova di 20 minuti. L'asse Y mostra la distanza in centimetri mentre l'asse X mostra la prova di 20 minuti suddivisa in intervalli di 1 minuto. La barra nera lungo l'asse X rappresenta il momento in cui le barriere opache sono state rimosse e lo stimolo sociale è visibile al pesce di prova. In tutti i gruppi inizialmente c'è una rapida diminuzione verso lo stimolo sociale una volta che è reso visibile, che può essere determinato dalla forte diminuzione della distanza tra i minuti 9 e 10, tuttavia, mentre i pesci di controllo rimangono molto vicini allo stimolo sociale l'alcol trattato non lo è; Ciò suggerisce che l'esposizione all'etanolo embrionale influisce sul comportamento sociale degli adulti12,18.
La Figura 3 è stata modificata da Fernandes et al.17 e utilizza i dati raccolti misurando la distanza dallo stimolo per mostrare ulteriormente l'effetto che l'esposizione all'etanolo embrionale ha sulla risposta allo shoaling. I dati nella Figura 3 rappresentano la riduzione della distanza verso lo stimolo sociale una volta che è visibile. Calcolare la riduzione media della distanza dallo stimolo; La distanza media dallo stimolo durante il periodo di stimolo (quando lo stimolo è visibile) è stata sottratta dalla distanza media dallo stimolo durante l'assuefazione (quando lo stimolo sociale non è visibile), quindi un valore negativo maggiore rappresenta una risposta sociale più forte.
La Figura 4 mostra il tempo trascorso nelle zone rispetto alla distanza dallo stimolo. La Figura 4 è stata modificata da Fernandes et al.17. La Figura 4A mostra la quantità di tempo (asse Y) che i pesci trascorrono in ciascuna zona (asse X) mentre lo stimolo è visibile. Mentre i pesci di tutti i gruppi sembrano mostrare una preferenza per la zona più vicina al controllo dello stimolo sociale, i pesci trascorrono quasi il doppio del tempo nella zona 1 rispetto ai pesci trattati con alcol (Figura 4B). La Figura 4C mostra che l'esposizione embrionale all'etanolo non ha compromesso la mobilità, poiché non vi era alcuna differenza tra i gruppi tra le zone. Infine, la Figura 4D mostra che in assenza di uno stimolo sociale i pesci non trascorrono del tempo nella zona più vicina allo stimolo sociale. Pertanto, i risultati mostrano che i pesci di controllo si avvicinano e rimangono molto vicini allo stimolo sociale quando sono visibili, mentre i pesci trattati con etanolo non lo fanno. Inoltre, i dati mostrati nella Figura 2 e nella Figura 4C suggeriscono che l'esposizione embrionale all'etanolo non compromette la capacità dei pesci di vedere lo stimolo sociale (Figura 2) o di muoversi (Figura 4C), fornendo quindi una forte evidenza che l'esposizione all'etanolo embrionale compromette il comportamento sociale nel pesce zebra adulto.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65834/65834fig01.jpg"> 
Figura 1: Schema dell'apparato comportamentale. Una vasca da 37 litri è stata utilizzata per analizzare il comportamento sociale del pesce zebra adulto (denominato ZT140) con e senza esposizione embrionale all'etanolo. Questa cifra è stata modificata da Fernandes et al.17. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65834/65834fig01large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65834/65834fig02.jpg"> 
Figura 2: L'esposizione embrionale all'etanolo attenua il comportamento sociale nel pesce zebra adulto. Distanza media tra il pesce sperimentale adulto e il banco vivo tracciata per intervalli di 1 minuto della sessione comportamentale di 20 minuti. Vengono visualizzati la media ± il SEM. Controllo (n = 12); 1% di etanolo (EtOH; n = 11). La barra orizzontale sopra l'asse X, da 10 a 20 minuti, raffigura una linea temporale durante la quale il banco vivo è visibile ai soggetti sperimentali. La concentrazione di alcol è mostrata sopra i grafici. Questa cifra è stata modificata da Fernandes et al.17. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65834/65834fig02large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65834/65834fig03.jpg"> 
Figura 3: I pesci trattati con alcol sono significativamente più lontani dal banco vivo. Le barre rappresentano la differenza tra la distanza dei pesci dal banco vivo prima e dopo che il banco vivo è visibile. Valori negativi più grandi suggeriscono una risposta più forte ai conspecifici. Vengono visualizzati la media ± il SEM. Vengono visualizzati la media ± il SEM. Controllo (n = 12); 1% di etanolo (EtOH; n = 11). Questa cifra è stata modificata da Fernandes et al.17. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65834/65834fig03large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65834/65834fig04.jpg"> 
Figura 4: L'esposizione all'etanolo embrionale altera la durata del tempo trascorso nella zona 1 solo quando il banco vivo è visibile. (A) Le barre rappresentano il tempo trascorso in tutte le 10 zone durante la presentazione dello stimolo. (B) Le barre rappresentano il tempo trascorso nella zona 1 durante la presentazione dello stimolo. La zona 1 è la zona più vicina al banco vivo, mentre la zona 10 è la più lontana dal banco vivo. Si noti la differenza significativa nella quantità di tempo che i pesci di controllo trascorrono nella zona. (C) Le barre rappresentano la percentuale media di tempo trascorso in tutte le zone durante l'assuefazione, i primi 10 minuti. (D) Le barre rappresentano il tempo trascorso nella zona 1 durante l'assuefazione. Vengono visualizzati la media ± il SEM. Le dimensioni del campione sono le seguenti: Controllo (n = 12); etanolo (EtOH; n = 11). Questa cifra è stata modificata da Fernandes et al.17. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65834/65834fig04large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>

Modellazione dei disturbi dello spettro alcolico fetale nel pesce zebra per caratterizzare l'impatto di un ambiente embrionale avverso sul comportamento sociale adulto

Fetal alcohol spectrum disorders (FASD) describe all alcohol-induced birth defects. Birth defects such as growth deficiencies, craniofacial, behavioral, ...

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Al fine di comprendere i meccanismi molecolari del danno indotto da etanolo di sviluppo, abbiamo sviluppato un modello di esposizione zebrafish etanolo e stanno esplorando le caratteristiche fisiche, alterazioni cellulari e genetiche che si verificano dopo l'esposizione...

Valutare i cambiamenti teratogeni in un modello di Zebrafish di esposizione alcolica fetale

Il nostro laboratorio ha sviluppato un sistema di imaging automatizzato romanzo ad alta produttività che è utile per il rilevamento di diversi comportamenti differenti in 7 giorni di età zebrafish larve. Il sistema può essere usato per rilevare sottili cambiamenti nel comportamento dopo le larve sono stati esposti agli agenti tossici ambientali o farmaceutici.

Automatizzati high-throughput analisi comportamentali nelle larve Zebrafish

L'obiettivo del protocollo qui presentato è descrivere le procedure per esporre i ratti a livelli moderati di alcol durante lo sviluppo cerebrale prenatale e quantificare le alterazioni risultanti nel comportamento sociale durante l'età adulta.

Moderata esposizione prenatale di alcool e quantificazione di comportamento sociale in ratti adulti

Questo protocollo descrive le analisi istologiche dei fegati delle larve di zebrafish che sono state trattate con 2% di etanolo per 24 ore. Tale trattamento di etanolo acuto provoca steatosi epatica e gonfiore della vasculatura epatica.

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Questo lavoro descrive un protocollo per quantificare i livelli di etanolo in un embrione di pesce zebra utilizzando la cromatografia del gas dello spazio della testa da metodi di esposizione adeguati alla lavorazione degli embrioni e all'analisi dell'etanolo.

Quantificazione dei livelli di etanolo negli embrioni di pesce zebra utilizzando la cromatografia dello spazio della testa

Un protocollo sperimentale dettagliato è presentato in questo documento per la valutazione della tossicità neurocomportamentale degli inquinanti ambientali utilizzando un modello di larva di pesce zebra, compreso il processo di esposizione e i test per gli indicatori neurocomportamentali.

Studiare gli effetti neurocomportamentali degli inquinanti ambientali sulle larve dei pesci zebra

Questo lavoro descrive un protocollo per il sistema modulare di transgenesi Tol2, un metodo di clonazione basato su gateway per creare e iniettare costrutti transgenici in embrioni di zebrafish.

Il sistema Zebrafish Tol2: un approccio di transgenesi modulare e flessibile basato su gateway

Qui, presentiamo una batteria di test comportamentali completa, tra cui il nuovo serbatoio, Shoaling e i test di preferenza sociale, per determinare efficacemente i potenziali effetti neurotossici delle sostanze chimiche (ad esempio, metanfetamina e glifosato) sul pesce zebra adulto utilizzando un singolo acquario. Questo metodo è rilevante per la neurotossicità e la ricerca ambientale.

Valutazione della neurotossicità in Danio rerio adulto utilizzando una batteria di test comportamentali in un singolo serbatoio

Descriviamo il flusso di lavoro di un sistema di screening e l'analisi dei dati per valutare la tossicità dei composti chimici in base alla risposta di trasalimento dell'embrione di zebrafish. Il sistema registra i movimenti degli embrioni di zebrafish in seguito all'esposizione a uno stimolo vibrazionale e consente una valutazione integrata della tossicità/letalità generale e della tossicità neuromuscolare.

Valutazione della tossicità delle sostanze chimiche utilizzando un sistema di screening della risposta all'allievo delle vibrazioni del pesce zebra

Questo lavoro descrive un protocollo per quantificare la forma della cartilagine craniofacciale utilizzando software liberi (tpsDigs2, MorphoJ e PAST) per misurare i cambiamenti nella struttura facciale nelle larve di pesce zebra.

Analisi morfometriche della forma: il software di analisi per la quantificazione della forma craniofacciale nel pesce zebra

I compiti di preferenza sociale multi-camera sono stati adattati dai roditori al pesce zebra, facilitando lo studio del comportamento sociale negli organismi modello. Questo protocollo convalida un compito a basso costo a 3 camere in vasca aperta utilizzando webcam e software open source per misurare la preferenza sociale dei pesci zebra, rendendolo accessibile alla ricerca e all'insegnamento degli studenti universitari.

Alternativa a basso costo per esaminare la preferenza sociale nel pesce zebra (Danio rerio) utilizzando il compito a 3 camere in acquario libero libero

Scopri come modellare i disturbi dello spettro alcolico fetale nel pesce zebra per caratterizzare l'impatto dell'esposizione embrionale all'etanolo sul comportamento sociale adulto. Questo metodo utilizza Danio rerio per studiare le interazioni gene-ambiente.

Modellazione dei disturbi dello spettro alcolico fetale nel pesce zebra per caratterizzare limpatto di un ambiente embrionale avverso sul comportamento sociale adulto (Video) | JoVE Journal

Modellazione dei disturbi dello spettro alcolico fetale nel pesce zebra per caratterizzare l'impatto di un ambiente embrionale avverso sul comportamento sociale adulto

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