Fibre muscolari scheletriche corte, intermedie e lunghe intatte ottenute dalla dissociazione enzimatica di sei muscoli degli arti posteriori di topi: oltre il flessore breve delle dita

Descriviamo un protocollo per ottenere fibre enzimaticamente dissociate di diverse lunghezze e tipologie da sei muscoli di topi adulti: tre di essi già descritti (flessore breve delle dita, estensore lungo delle dita, soleo) e tre di essi dissociati con successo per la prima volta (estensore lungo dell'alluce, peroneo lungo, peroneo delle dita quarti).

In questo studio, descriviamo un metodo per isolare fibre di diverse lunghezze e tipi da sei muscoli degli arti posteriori dei topi. Inoltre, abbiamo testato l'idoneità delle fibre per esperimenti fisiologici riguardanti lo studio del meccanismo di accoppiamento eccitazione-contrazione. Per anni, ottenere fibre muscolari lunghe è stata una sfida, limitando la portata di molti studi sul campo.

Ora mostriamo che è possibile ottenere fibre magre con flessori, estensori ed evertori di topo con lunghezze fino a sei millimetri. Ad esempio, l'ottenimento di fibre da sei diversi muscoli ci ha permesso di dimostrare che la cinetica transitoria del calcio, nota come morfologia di tipo II, può essere generalizzata al tipo IIB e IIX indipendentemente dalla posizione o dalla funzione della loro fonte muscolare. Riteniamo che il modello di fibre enzimaticamente isolate sia adatto a una varietà di approcci sperimentali con diversi tipi di tecnologie che ci consentono di rispondere a domande meccanicistiche nell'ambito della biochimica, della fisiologia, della biofisica, della biologia cellulare e della biologia molecolare.