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Utilizzo del test Cleavage Under Targets and Tagmentation (CUT&Tag) nella ricerca sui mioblas...
Utilizzo del test Cleavage Under Targets and Tagmentation (CUT&Tag) nella ricerca sui mioblas...
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Developmental Biology
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JoVE Journal Developmental Biology
Using Cleavage Under Targets and Tagmentation (CUT&Tag) Assay in Mouse Myoblast Research

Utilizzo del test Cleavage Under Targets and Tagmentation (CUT&Tag) nella ricerca sui mioblasti di topo

Full Text
1,403 Views
07:09 min
March 1, 2024

DOI: 10.3791/66066-v

Yuefeng Li1,2, Xiaofen Wu1,2, Ping Hu1,2

1Guangzhou Laboratory, 2The Key Laboratory of Biological Targeting Diagnosis, Therapy and Rehabilitation of Guangdong Higher Education Institutes,The Fifth Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

I ricercatori che non conoscono il campo epigenetico troveranno CUT&Tag un'alternativa significativamente più semplice ai saggi ChIP. CUT&Tag ha apportato enormi benefici agli studi epigenetici su popolazioni cellulari rare e primarie, generando dati di alta qualità da pochissime cellule. Questo protocollo descrive l'esecuzione di saggi H3K4me1 CUT&Tag su mioblasti di topo isolati dai muscoli degli arti posteriori di topo.

La ricerca del nostro gruppo si concentra su come la struttura del genoma e la trascrizione nelle cellule staminali del muscolo scheletrico adulto sono regolate e mantenute, in particolare durante i cambiamenti del solfato, come l'impegno, la differenziazione e la tinasi delle cellule staminali. Le cellule staminali muscolari scheletriche adulte, che comprendono solo l'1% delle cellule mononucleate nel tessuto muscolare, rappresentano una sfida per gli studi sulle caratteristiche della cromatina che utilizzano High-C, ChIPs e ATAC seq, a causa della loro scarsità di sospensioni a singola cellula ottenute dalla digestione muscolare. L'immunoprecipitazione della cromatina, ChIP, è stata uno strumento chiave per profilare le caratteristiche del genoma.

Una tecnica di taglio e tag più semplice ed efficiente, sviluppata dal Dr. Steven Henikoff, spesso supera la ChIP, soprattutto nello studio dell'epigenetica nelle popolazioni cellulari rare. La sua facilità d'uso amplia l'accessibilità per i ricercatori, compresi gli esperti non epigenetici.

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Parole chiave: CUT&Tag Scissione sotto bersagli e tagmentazione Mioblasti di topo Cellule staminali muscolari Fattori leganti la cromatina Segni istonici Varianti istoniche ChIP Immunoprecipitazione della cromatina ChIP reticolante ChIP nativo Nucleasi micrococcica Sequenziamento Posizioni genomiche

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