Name: Un modello murino dellassociazione della partizione epatica e della legatura della vena porta per la procedura di epatectomia in stadi con lausilio della microscopia (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-01-19T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 45 s
Description: Scopri la tecnica ALPPS per la rigenerazione epatica utilizzando modelli murini PMX e microscopia. Questo metodo chirurgico aiuta a studiare i meccanismi molecolari e cellulari coinvolti nella rigenerazione del fegato dopo lesioni gravi.

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<meta charset="utf8"></head><body>Studio della rigenerazione epatica di ALLPS in modelli animali per l'epatectomia in stadi

<ol><li>Michalopoulos, G. K., Bhushan, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liver+regeneration%3A+Biological+and+pathological+mechanisms+and+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Gastroenterol+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Liver regeneration: Biological and pathological mechanisms and implications.</a> Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 18 (1), 40-55 (2021).</li>
<li>Chapelle, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estimation+of+the+future+remnant+liver+function+is+a+better+tool+to+pr+edict+post-hepatectomy+liver+failure+than+platelet-based+liver+scores%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Surg+Oncol%22%5BJournal%5D)">Estimation of the future remnant liver function is a better tool to pr edict post-hepatectomy liver failure than platelet-based liver scores.</a> Eur J Surg Oncol. 43 (12), 2277-2284 (2017).</li>
<li>Isfordink, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Portal+vein+ligation+versus+portal+vein+embolization+for+induction+of+hypertrophy+of+the+future+liver+remnant%3A+A+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Surg+Oncol%22%5BJournal%5D)">Portal vein ligation versus portal vein embolization for induction of hypertrophy of the future liver remnant: A systematic review and meta-analysis.</a> Surg Oncol. 26 (3), 257-267 (2017).</li>
<li>Linecker, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Risk+adjustment+in+alpps+is+associated+with+a+dramatic+decrease+in+ear+ly+mortality+and+morbidity%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">Risk adjustment in alpps is associated with a dramatic decrease in ear ly mortality and morbidity.</a> Ann Surg. 266 (5), 779-786 (2017).</li>
<li>Darnis, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subtotal+hepatectomy+in+swine+for+studying+small-for-size+syndrome+and+portal+inflow+modulation%3A+Is+it+reliable%5BTitle%5D)+AND+%22HPB+%28Oxford%29%22%5BJournal%5D)">Subtotal hepatectomy in swine for studying small-for-size syndrome and portal inflow modulation: Is it reliable.</a> HPB (Oxford). 17 (10), 881-888 (2015).</li>
<li>Casellas, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inbred+mouse+strains+and+genetic+stability%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Animal%22%5BJournal%5D)">Inbred mouse strains and genetic stability: A review.</a> Animal. 5 (1), 1-7 (2011).</li>
<li>Zhang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+of+associating+liver+partition+and+portal+vein+ligation+for+staged+hepatectomy+from+2012+to+2021%3A+A+bibliometric+analysis.+Review%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Surg%22%5BJournal%5D)">Evolution of associating liver partition and portal vein ligation for staged hepatectomy from 2012 to 2021: A bibliometric analysis. Review.</a> Int J Surg. 103, 106648(2022).</li>
<li>Parola, M., Pinzani, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liver+fibrosis%3A+Pathophysiology%2C+pathogenetic+targets+and+clinical+iss+ues%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Aspects+Med%22%5BJournal%5D)">Liver fibrosis: Pathophysiology, pathogenetic targets and clinical iss ues.</a> Mol Aspects Med. 65, 37-55 (2019).</li>
<li>Kikuchi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+associating+liver+partition+and+portal+vein+occlusion+for+st+aged+hepatectomy+on+tumor+growth+in+a+mouse+model+of+liver+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Surg+Oncol%22%5BJournal%5D)">Impact of associating liver partition and portal vein occlusion for st aged hepatectomy on tumor growth in a mouse model of liver metastasis.</a> Eur J Surg Oncol. 44 (1), 130-138 (2018).</li>
<li>Schlegel, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alpps%3A+From+human+to+mice+highlighting+accelerated+and+novel+mechanism+s+of+liver+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">Alpps: From human to mice highlighting accelerated and novel mechanism s of liver regeneration.</a> Ann Surg. 260 (5), 839-846 (2014).</li>
<li>Dili, A., Lebrun, V., Bertrand, C., Leclercq, I. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Associating+liver+partition+and+portal+vein+ligation+for+staged+hepate+ctomy%3A+Establishment+of+an+animal+model+with+insufficient+liver+remnan+t%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Invest%22%5BJournal%5D)">Associating liver partition and portal vein ligation for staged hepate ctomy: Establishment of an animal model with insufficient liver remnan t.</a> Lab Invest. 99 (5), 698-707 (2019).</li>
<li>Schadde, E., Hertl, M., Breitenstein, S., Beck-Schimmer, B., Schläpfer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+model+of+the+associating+liver+partition+and+portal+vein+ligation+for+staged+hepatectomy+%28alpps%29+procedure%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Rat model of the associating liver partition and portal vein ligation for staged hepatectomy (alpps) procedure.</a> J Vis Exp. (126), e55895(2017).</li>
<li>Allaire, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+frontiers+in+liver+resection+for+hepatocellular+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22JHEP+Rep%22%5BJournal%5D)">New frontiers in liver resection for hepatocellular carcinoma.</a> JHEP Rep. 2 (4), 100134(2020).</li>
<li>Memi, F., Ntokou, A., Papangeli, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Crispr%2Fcas9+gene-editing%3A+Research+technologies%2C+clinical+applications+and+ethical+considerations%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Perinatol%22%5BJournal%5D)">Crispr/cas9 gene-editing: Research technologies, clinical applications and ethical considerations.</a> Semin Perinatol. 42 (8), 487-500 (2018).</li>
<li>Saviano, A., Henderson, N. C., Baumert, T. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+genomics+and+spatial+transcriptomics%3A+Discovery+of+novel+cell+states+and+cellular+interactions+in+liver+physiology+and+disease+biology%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Single-cell genomics and spatial transcriptomics: Discovery of novel cell states and cellular interactions in liver physiology and disease biology.</a> J Hepatol. 73 (5), 1219-1230 (2020).</li>
</ol>

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un modello murino dell'associazione della partizione epatica e della legatura della vena porta per la procedura di epatectomia in stadi con l'ausilio della microscopia

A Mouse Model of the Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy Procedure Aided by Microscopy

A differenza della PVL (fasi 2, 3, 4 e 5 del protocollo), i topi sottoposti all'intervento chirurgico ALPPS (fasi 2, 3, 4, 5 e 6) hanno dimostrato una maggiore propensione alla proliferazione cellulare. La Figura 2 delinea la demarcazione ischemica del lobo medio del fegato dopo la legatura della vena porta, insieme al campo visivo durante la transezione epatica, che rappresenta una distinzione chiave tra ALPPS e PVL. In particolare, i livelli di mediatori dell'infiammazione, tra cui (Tumor Necrosis Factor-α (TNF-α), interleuchine e fattore di crescita epatico (HGF), all'interno del tessuto epatico, superano quelli osservati nel gruppo PVL. Questo è visto nella Figura 4C dove il gruppo ALPPS aveva livelli di IL-6 più elevati rispetto al gruppo PVL, suggerendo che l'infiammazione può essere coinvolta nella rapida rigenerazione del fegato. Per corroborare ulteriormente questi risultati, è stata effettuata un'analisi comparativa del rapporto peso/fegato e dei livelli di espressione di ki67, un marcatore ampiamente riconosciuto di proliferazione cellulare, all'interno del tessuto epatico, due giorni dopo l'intervento. Le figure 4A, B e 5 mostrano che il fegato nel gruppo ALPPS dimostra una maggiore capacità proliferativa.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66098/66098fig01.jpg"> Figura 1: Strumenti chirurgici e materiali di consumo. (A) 1: Antibiotici topici per incisioni; 2: 6-0, 8-0 Suture chirurgiche; 3: spugne di gelatina emostatica. (B) 1: Le forbici e 2: i portaaghi sono impiegati per l'incisione e la sutura della cavità addominale. (C) Le procedure microscopiche richiedono l'uso di 1: forbici, 2: pinze, 3, 4: pinze da dissezione, 5: divaricatori addominali. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66098/66098fig01large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66098/66098fig02.jpg"> Figura 2: La procedura chirurgica epatica. (A) Legatura e transezione della vena porta. La legatura sequenziale di 1, 2 e 3 viene eseguita meticolosamente, in concomitanza con la meticolosa divisione del parenchima epatico all'interno del lobo medio. (B) La linea di demarcazione del lobo medio è rappresentata visivamente dalla presenza di una linea tratteggiata bianca. (C) Dopo l'esame microscopico, il fegato viene meticolosamente sezionato lungo il limite ischemico delineato. Abbreviazioni: RLL = lobo laterale destro; LML = lobo medio sinistro; LLL = lobo laterale sinistro; RML = lobo mediano destro. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66098/66098fig02large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66098/66098fig03.jpg"> Figura 3: Legatura della vena porta. (A) La legatura della vena porta del lobo laterale destro; l'area tratteggiata corrisponde all'RLL legato. (B) La legatura della vena porta del lobo medio sinistro e del lobo laterale sinistro; L'area tratteggiata rappresenta l'ingresso per la legatura dei rami della vena porta. (C) L'area tratteggiata corrisponde al legame LML e LLL. (D) La legatura della vena porta del lobo caudato; La regione tratteggiata delinea il lobo medio destro fisiologicamente perfuso, mentre le frecce delimitano il ramo della vena porta del lobo caudato, discretamente incastonato all'interno del parenchima epatico. Abbreviazioni: RLL = lobo laterale destro; LML = lobo medio sinistro; LLL = lobo laterale sinistro. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66098/66098fig03large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66098/66098fig04v2.jpg"> Figura 4: Confronto dei futuri residui epatici, del rapporto di crescita cinetica, del tasso di sopravvivenza e dell'ALT plasmatica durante la prima settimana tra ALPPS e PVL. (A) La FLR è stata valutata nel gruppo PVL e nel gruppo PVL+T dopo l'intervento chirurgico. (B) Il KGR è stato valutato come l'aumento del rapporto LMR/peso corporeo al giorno. Il KGR nel gruppo ALPPS è aumentato rapidamente entro 2 giorni dall'intervento chirurgico, poi è diminuito gradualmente, ma era ancora superiore a quello nel gruppo PVL. (C) IL-6 plasmatico tra PVL e ALPPS. (D) Curva di sopravvivenza dopo PVL e ALPPS. (E) AST plasmatico tra PVL e ALPPS. Abbreviazioni: FLR = futuri resti epatici; PVL = legatura della vena porta; PVL + T = legatura della vena porta + transezione; KGR = rapporto di crescita cinetica; LMR = sinistra ; ALPPS = associazione di partizione epatica e legatura della vena porta per l'epatectomia in stadi; ALT = Alanina aminotransferasi. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66098/66098fig04largev2.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66098/66098fig05.jpg"> Figura 5: Marcatori e morfologia della rigenerazione epatica dopo legatura della vena porta o transezione combinata. (A) La morfologia epatica è stata valutata nel gruppo di chirurgia fittizia, nel gruppo PVL e nel gruppo PVL+T 2 giorni dopo l'intervento. L'area delineata indica i lobi epatici rigenerati; barra della scala = 1 cm. (B) La colorazione a fluorescenza ha rivelato livelli eterogenei di proliferazione cellulare in distinte coorti chirurgiche del fegato; barra di scala = 100 μm, ***P &lt; 0,001. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66098/66098fig05large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66098/66098fig06.jpg"> Figura 6: Immagini dell'HE dalla vena porta alla vena centrale dopo l'ALPPS. (A) Il fegato dell'ALPPS che colora l'HE da 0 giorni a 2 giorni. (B) Colorazione HE da 3 giorni a 7 giorni. Barra di scala = 100 μm. Abbreviazioni: HE = ematossilina ed eosina; ALPPS = associazione della partizione epatica e legatura della vena porta per l'epatectomia in stadi. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66098/66098fig06large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>

Un modello murino dell'associazione della partizione epatica e della legatura della vena porta per la procedura di epatectomia in stadi con l'ausilio della microscopia

Hepatectomy is widely regarded as the primary treatment for hepatic malignancies; yet, postoperative liver failure remains a major cause of perioperative ...

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Modello del ratto della partizione del fegato associando i e legatura della vena portale per procedura di messa in scena epatectomia (ALPPS)

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