Name: Effetto antagonista di Jiawei Shengjiang San su un modello di nefropatia diabetica di ratto: correlato alla via di segnalazione EGFR/MAPK3/1 (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-05-10T13:50:00.000+00:00
Duration: 8 min 15 s
Description: Scopri la farmacologia di rete e il docking molecolare per studiare il meccanismo d'azione di Jiawei Shengjiang San nella nefropatia diabetica. Questo metodo identifica componenti attivi e costruisce reti bersaglio per terapie erboristiche.

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<meta charset="utf8"></head><body>Jiawei Shengjiang San affronterà la nefropatia diabetica utilizzando la farmacologia di rete

<table><tbody><tr><td>2&volte; SYBR Miscela Master qPCR verde&nbsp;</td><td>Servicebio, Wuhan, Cina</td><td>G3320-05</td><td></td></tr><tr><td>Quantificazione delle proteine urinarie 24 ore su 24 (UTP)</td><td>Nanjing Jiancheng Institute of Biological Engineering</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>3,3'-Diaminobenzidina</td><td>Shanghai Huzheng Biotech, Cina</td><td>91-95-2</td><td></td></tr><tr><td>Strumento automatico di analisi biochimica</td><td>Hitachi, Giappone</td><td>7170A</td><td></td></tr><tr><td>Etanolo anidro</td><td>Biosharp, Tianjin, Cina</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>BAX Anticorpi primari&nbsp;</td><td>Affinity, USA</td><td>AF0120</td><td>Rat</td></tr><tr><td>BCL-2 Anticorpi primari&nbsp;</td><td>Affinity, USA</td><td>AF6139</td><td>Rat</td></tr><tr><td>BX53 microscopio</td><td>Olimpo, Giappone</td><td>BX53</td><td></td></tr><tr><td>cloroformio sostituto</td><td>ECOTOP, Guangzhou, Cina</td><td>ES-8522</td><td></td></tr><tr><td>Desmond software&nbsp;</td><td>New York, NY, USA</td><td>Rilascio 2019-1</td><td></td></tr><tr>Digitale<td>Bagno d'acqua a temperatura costante</td><td>Changzhou Jintan Liangyou Instrument, Cina</td><td>DK-8D</td><td></td></tr><tr><td>EGFR Anticorpi primari.</td><td>Affinity, USA</td><td>AF6043</td><td>Rat</td></tr><tr><td>Embed-812 RESIN</td><td>Shell Chemical, USA</td><td>14900</td><td></td></tr><tr><td>Glicemia a digiuno (FBG)</td><td>Nanjing Jiancheng Institute of Biological</td><td>Engineering N/A</td><td></td></tr><tr><td>Analizzatore di etichette enzimatiche a lunghezza d'onda intera di tipo FC</td><td>Multiskan; Thermo, USA</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>GAPDH&nbsp; Anticorpi primari&nbsp;</td><td>Affinity, USA</td><td>AF7021</td><td>Proteina</td></tr><tr><td>sierica glicata di ratto (GSP)</td><td>Nanjing Jiancheng Institute of Biological Engineering</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio elettronico a trasmissione</td><td>Hitachi, Giappone</td><td>H-7650</td><td></td></tr><tr><td>Soluzione colorante per ematossilina/eosina (HE)</td><td>Servicebio, USA</td><td>G1003</td><td></td></tr><tr><td>Image-Pro Plus</td><td>MEDIA CYBERNETICS, USA</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Strumento di amplificazione PCR in tempo reale</td><td>Applied Biosystems, USA</td><td>iQ5&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Compresse di Irbesartan</td><td>Hangzhou Sanofi Pharmaceuticals</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Isopropanolo</td><td>Biosharp, Tianjin, Cina</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>&nbsp; Granuli JWSJS</td><td>Guangdong Yifang Pharmaceutical</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Kodak Image Station 2000 MM sistema di imaging</td><td>Kodak, USA</td><td>IS2000</td><td></td></tr><tr><td>Colesterolo a bassa densità (LDL-C)</td><td>Nanjing Jiancheng Institute of Biological Engineering</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>MAPK3/1Anticorpi primari&nbsp;</td><td>Affinity, USA</td><td>AF0155</td><td>Rat</td></tr><tr><td>Medical Centrifuge</td><td>Hunan Xiangyi Laboratorio Strumento di Sviluppo, Cina&nbsp;</td><td>TGL-16K</td><td></td></tr><tr><td>Mini sistema di trasferimento trans-blot</td><td>Bio-Rad, USA</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Sistema di elettroforesi Mini-PROTEAN</td><td>Bio-Rad, USA</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Spettrofotometro NanoVue Plus Healthcare</td><td>Bio-Sciences AB, Svezia</td><td>111765</td><td></td></tr><tr><td>p-EGFR Anticorpi primari&nbsp;</td><td>Affinity, USA</td><td>AF3044</td><td>Rat</td></tr><tr><td>Soluzione di colorazione periodica acido-Schiff (PAS)</td><td>Servicebio, USA</td><td>G1008</td><td></td></tr><tr><td>p-MAPK3/1 Anticorpi primari&nbsp;</td><td>Affinity, USA</td><td>AF1015</td><td>Anticorpi secondari per ratto</td></tr><tr><td></td><td>&nbsp; Santa Cruz, USA</td><td>sc-2357</td><td>Coniglio</td></tr><tr><td>Streptozotocina</td><td>Sigma, USA</td><td>S0130</td><td></td></tr><tr><td>SureScript Kit di sintesi del cDNA del primo filamento</td><td>GeneCopeia, USA</td><td>QP056T</td><td></td></tr><tr><td>Reagente TriQuick</td><td>Solarbio, Pechino, Cina</td><td>R1100</td><td></td></tr><tr><td>Banco di lavoro ultra-pulito</td><td>Suzhou Apparecchiature di purificazione, Cina</td><td>SW-CJ-1F&nbsp;</td><td></td></tr></tbody></table>

effetto antagonista di jiawei shengjiang san su un modello di nefropatia diabetica di ratto: correlato alla via di segnalazione egfr/mapk3/1

Antagonistic Effect of Jiawei Shengjiang San on a Rat Model of Diabetic Nephropathy: Related to EGFR/MAPK3/1 Signaling Pathway

Seguendo il protocollo, 90 principi attivi di JWSJS sono stati infine ottenuti dall'analisi dopo lo screening e la deduplicazione secondo gli standard stabiliti di OB e DL. Questi includevano 20 tipi di Hedysarum Multijugum Maxim, 23 tipi di Epimrdii Herba, 15 tipi di Smilacis Glabrae Rhixoma, 16 tipi di Radix Rhei et Rhizome, quattro tipi di Curcumaelongae Rhizoma, 15 tipi di Cicadae Periostracum e sei tipi di componenti di Bombyx Batryticatus . Poiché ci sono molti ingredienti attivi in JWSJS, solo 20 sono elencati (vedi Tabella 1). Dopo la deduplicazione, sono stati infine ottenuti 396 target corrispondenti ai principi attivi di JWSJS.
Dopo la ricerca di geni correlati alla malattia, sono stati finalmente ottenuti 3035 geni bersaglio correlati a DN dopo la fusione e la deduplicazione. I corrispondenti bersagli di DN sono stati confrontati e analizzati con i bersagli dei principi attivi dei farmaci. L'intersezione è stata determinata, il che ha portato a 227 obiettivi di intersezione di JWSJS e DN. È stato quindi disegnato un diagramma di Wayne (vedi Figura 1A). Il diagramma di rete "farmaco-ingrediente-bersaglio" è stato costruito utilizzando il software Cytoscape 3.8.0 (vedi Figura 1B) ed è stata eseguita l'analisi topologica. Ogni nodo è stato classificato da alto a basso in base al valore del grado. I primi cinque componenti del farmaco erano quercetina, acido palmitoleico, luteolina, kaempferolo e naringenina, mentre i primi cinque bersagli erano PTGS2, PTGS1, NCoA2, AR e ESR1.
Successivamente, è stata sviluppata una rete PPI per obiettivi di intersezione JWSJS e DN (196 nodi e 1714 bordi con un valore medio di grado di 17,4). Inoltre, dopo tre screening sono stati ottenuti sette bersagli chiave che potrebbero essere i bersagli chiave della JWSJS per il trattamento della DN: MAPK14, TP53, MAPK3, MYC, HIF1A, ESR1 e MAPK1 (vedi Figura 1C).
Quindi, è stata eseguita l'analisi dell'arricchimento di OB per speculare sulle caratteristiche biologiche del bersaglio di JWSJS nel trattamento della DN. Tra BP, CC e MF, le prime dieci voci arricchite sono tracciate nella Figura 1D. I risultati mostrano che JWSJS potrebbe regolare la proliferazione, la differenziazione e l'apoptosi cellulare legandosi con fattori di trascrizione e protein chinasi in zattere di membrana e microdomini di membrana, determinando così un effetto terapeutico sulla DN. L'analisi dell'arricchimento della via KEGG è stata eseguita sui bersagli partecipanti per esplorare le potenziali vie d'azione di JWSJS nella DN. I primi trenta percorsi arricchiti sono tracciati nella Figura 1E. I risultati mostrano che il trattamento JWSJS della DN potrebbe agire su 181 vie di segnalazione, che coinvolgono principalmente lipidi e aterosclerosi, la via di segnalazione PI3K-Akt, la carcinogenesi chimica, l'epatite, il cancro alla prostata, l'apoptosi, la via di segnalazione HIF-1 e la via di segnalazione TNF.
Per esplorare ulteriormente i bersagli dei primi 30 percorsi arricchiti con KEGG, abbiamo utilizzato il software Cytoscape 3.8.0 per costruire una mappa della rete di relazioni tra le vie di segnalazione KEGG per i DN trattati con JWSJS. MAPK1, MAPK3, EGFR e AKT1 sono risultati essere bersagli di più percorsi che agiscono insieme (vedi Figura 1F), suggerendo che queste proteine possono svolgere un ruolo centrale nel mediare gli effetti di JWSJS sul DN.
Per convalidare ulteriormente i potenziali bersagli di JWSJS nel trattamento della DN, abbiamo successivamente esaminato tre bersagli chiave, MAPK1, MAPK3 ed EGFR, con valori di grado elevati nella rete PPI e nella rete della via di segnalazione KEGG. Questi sono stati agganciati molecolarmente con quercetina, acido palmitoleico e luteolina, i primi tre componenti principali di JWSJS per il trattamento DN. Le condizioni per lo screening dell'ID PDB sono le seguenti: (1) Essere derivato dall'uomo; (2) La risoluzione conformazionale ≤ 2,5 Å, cioè la più piccola possibile; (3) La sequenza conformazionale deve essere il più completa possibile, cioè il complesso strutturale deve avere informazioni sul ligando di piccole molecole; e (4) Il valore del pH cristallino dovrebbe essere il più vicino possibile al normale intervallo fisiologico del corpo umano35. Infine, gli ID PDB di MAPK1, MAPK3 ed EGFR erano 4QTA, 4QTB e 7JXQ.
Per verificare l'affidabilità del software AutoDock rispetto al sistema di docking in questo studio36, abbiamo prima riagganciato le tre proteine di MAPK1, Mapk3 ed EGFR. La conformazione del ligando nella struttura cristallina originale delle tre proteine bersaglio è stata sovrapposta ai ligandi dopo l'aggancio (Figura 2A). Sono stati quindi calcolati i valori di deviazione quadratica media (RMSD) tra la conformazione del ligando post-docking e la struttura cristallina originale. I valori RMSD erano rispettivamente 1,129, 1,201 e 1,877 Å, tutti ≤ 2Å. Ciò ha dimostrato che il metodo di docking era affidabile e poteva essere utilizzato per la successiva verifica del docking molecolare. Per confrontare e dichiarare il potenziale inibitorio dei componenti principali, sono stati quindi utilizzati come controlli i ligandi originali di MAPK1, MAPK3 ed EGFR. L'analisi di docking ha predetto con successo l'energia di legame tra luteolina, acido palmitoleico e quercetina e i tre bersagli principali. Questi erano tutti negativi e inferiori a -637; vedi Tabella 2. Da notare che l'aggancio molecolare tra luteolina e MAPK1 ha la più alta dimensione della cavità e la più bassa energia di legame. Nel complesso, i risultati del docking molecolare hanno mostrato che la luteolina, l'acido palmitoleico e la quercetina avevano una buona attività di legame con tre bersagli principali (Figura 2B, C).
L'RMSD viene utilizzato per quantificare le variazioni medie di spostamento di un gruppo selezionato di atomi in relazione a un sistema di riferimento. Nel frattempo, l'RMSF caratterizza efficacemente le alterazioni localizzate lungo la catena proteica. Il grafico RMSD (Figura 2D) mostra che i valori RMSD del complesso composto luteolina-MAPK1 e del complesso quercetina-MAPK3 si sono stabilizzati entro 5 ns. Il complesso luteolina-EGFR ha mostrato un RMSD fluttuante che varia da 0 a 35 ns; questo valore si è stabilizzato a 35 ns fino alla fine della simulazione MD a 100 ns. Tutti i complessi hanno interagito stabilmente alla fine della simulazione MD a 100 ns. Il valore RMSF è stato valutato dalla traiettoria di simulazione MD: gli atomi nel sito attivo e nella catena principale che fluttuavano implicavano minimamente un cambiamento conformazionale minimo, suggerendo che il composto guida menzionato è saldamente ancorato all'interno della cavità della tasca di legame della proteina bersaglio. I risultati del RMSF hanno mostrato fluttuazioni limitate nelle strutture complesse.
Infine, verifichiamo i risultati di cui sopra in vivo. Per prima cosa abbiamo osservato che il peso dei ratti nel gruppo modello diminuiva significativamente e GSP, LDL-C, UTP e FBG aumentavano significativamente (P &lt; 0,05). Il peso corporeo dei ratti è aumentato significativamente nel gruppo irbesartan e in ciascun gruppo JWSJS rispetto al gruppo modello. GSP, LDL-C, UTP e FBG sono diminuiti in misura diversa (P &lt; 0,05; vedi Tabella 3).
Quindi, la colorazione HE ha mostrato che i glomeruli nel gruppo normale avevano una dimensione normale. Avevano una struttura regolare e chiara e una membrana basale liscia, tubuli renali ben disposti e nessuna infiltrazione di cellule infiammatorie. Nel gruppo modello, i glomeruli erano ipertrofici, la membrana basale era ispessita e la matrice mesangiale era aumentata. L'interstizio è stato infiltrato da cellule infiammatorie. Le manifestazioni patologiche di ciascun gruppo di somministrazione sono state alleviate in misura diversa rispetto al gruppo modello (vedi Figura 3A).
La colorazione PAS ha mostrato che il gruppo modello aveva un aumento dei volumi glomerulari, una membrana basale ispessita e una matrice mesangiale aumentata rispetto al gruppo normale. Queste manifestazioni patologiche sono state significativamente alleviate da ciascun gruppo di somministrazione (vedi Figura 3B). Utilizzando la microscopia elettronica a trasmissione, abbiamo scoperto che la membrana basale glomerulare nel gruppo modello era ispessita rispetto al gruppo normale. La matrice mesangiale è cresciuta e i processi del piede dei podociti sono stati ampiamente fusi. Le manifestazioni microscopiche dei ratti in ciascun gruppo di somministrazione sono state alleviate in misura variabile rispetto al gruppo modello (vedi Figura 3C).
Infine, sono state rilevate le espressioni di EGFR totale, p-EGFR, MAPK3/1 e p-MAPK3/1 per vedere se cambiavano nei ratti DN trattati con JWSJS. Non c'è stato alcun cambiamento significativo nell'espressione totale di EGFR e MAPK3/1 nei gruppi modello rispetto al gruppo normale. L'espressione di p-EGFR, p-MAPK3/1 e BAX è aumentata significativamente e l'espressione di BCL-2 è diminuita in modo significativo. Rispetto al gruppo modello, l'espressione di p-EGFR, p-MAPK3/1 e BAX era significativamente ridotta e l'espressione di BCL-2 era significativamente sovraregolata a vari livelli nei tessuti renali di ratto in ciascun gruppo di dosaggio (Figura 3D, E). Questo risultato è stato confermato dall'immunoistochimica (Figura 3F, G). Questo studio ha dimostrato che JWSJS potrebbe proteggere i reni nei ratti DN regolando l'espressione delle proteine p-EGFR, p-MAPK3/1, BAX e BCL-2 e riducendo l'apoptosi cellulare. Inoltre, la qPCR è stata utilizzata per valutare i livelli di espressione dell'mRNA di MAPK3, MAPK1 ed EGFR in vari gruppi. I risultati hanno rivelato che l'espressione relativa nel gruppo DN era significativamente più alta rispetto al gruppo di controllo, così come nei gruppi Irbesartan, JWSJS-L, JWSJS-M e JWSJS-H. Questo risultato corrobora ulteriormente i risultati iniziali (Figura 3H).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66179/66179fig01.jpg"> Figura 1: La farmacologia di rete ha chiarito i potenziali bersagli e le vie di segnalazione della JWSJS nella nefropatia diabetica. (A) Diagramma di Venn dei bersagli intersecanti della JWSJS e della nefropatia diabetica. Il verde rappresenta il numero di bersagli terapeutici dei componenti JWSJS e il viola rappresenta il numero di bersagli rilevanti di DN. La parte intersecante rappresenta il numero di bersagli intersecanti (cioè il numero di bersagli di JWSJS per DN). (B) Diagramma di rete "Drug-ingredient-target" di JWSJS nel trattamento della DN. L'azzurro rappresenta gli obiettivi rilevanti della JWSJS per il trattamento della DN. Il fucsia rappresenta il principio attivo del Bombyx Batryticatus. Il verde rappresenta i principi attivi di Hedysarum Multijugum Maxim. Il blu scuro rappresenta i principi attivi di Radix Rhei et Rizoma. Il rosso rappresenta i principi attivi di Cicadae Periostracum. Il viola rappresenta i principi attivi di Epimrdii Herba. Il giallo rappresenta i principi attivi di Smilacis Glabrae Rhixoma. L'azzurro cielo rappresenta i principi attivi della Curcumaelongae Rhizoma. (C) Rete PPI di obiettivi di intersezione JWSJS e DN. (D) I 10 geni più significativi identificati tramite l'analisi ontologica dei geni bersaglio della terapia implicati nel trattamento della DN da parte della JWSJS. (E) I 30 geni più significativi identificati tramite l'analisi del percorso dei geni bersaglio della terapia implicati nel trattamento della DN da parte della JWSJS. (F) La rete di relazioni della via di segnalazione KEGG nel trattamento della DN da parte della JWSJS. Le icone gialle rappresentano le vie di segnalazione. Le icone blu rappresentano gli obiettivi dell'azione. Un grafo più grande implica che ad esso sono collegati più percorsi. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66179/66179fig01large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66179/66179fig02.jpg"> Figura 2: Docking molecolare e visualizzazione delle traiettorie di dinamica molecolare di JWSJS nel trattamento della nefropatia diabetica. (A) Le conformazioni del ligando nella struttura cristallina originale dei tre complessi proteici bersaglio 7JXQ (a), 4QTA (b) e 4QTB (c) sono confrontate con le conformazioni del ligando dopo il docking. Verde, arancione e rosa sono rispettivamente le proteine bersaglio di EGFR, MAPK1 e MAPK3. L'oro è la molecola originale del ligando e il blu è la molecola del ligando dopo l'attracco. (B) Visualizzazione 3D del docking molecolare di JWSJS nel trattamento della nefropatia diabetica. Verde, arancione e rosa sono le proteine bersaglio 7JXQ, 4QTA e 4QTB, rispettivamente. 1a-3a rappresenta il diagramma di interazione di 7JXQ, 4QTA e 4QTB con l'inibitore originale (blu). 1b-3b rappresenta il diagramma di interazione di 7JXQ, 4QTA, 4QTB e luteolina (giallo). 1c-3c rappresenta il diagramma di interazione di 7JXQ, 4QTA, 4QTB e acido palmitoleico (fucsia). 1d-3d rappresenta il diagramma di interazione di 7JXQ, 4QTA, 4QTB e quercetina (viola). (C) Visualizzazione 2D del docking molecolare di JWSJS nel trattamento della nefropatia diabetica. 1a-3a rappresenta il diagramma di interazione di 7JXQ, 4QTA e 4QTB con l'inibitore originale. 1b-3b rappresenta il diagramma di interazione di 7JXQ, 4QTA, 4QTB e luteolina. 1c-3c rappresenta il diagramma di interazione di 7JXQ, 4QTA, 4QTB e acido palmitoleico. 1d-3d rappresenta il diagramma di interazione di 7JXQ, 4QTA, 4QTB e quercetina. (D) Analisi RMSD e RMSF delle traiettorie di dinamica molecolare di (a) luteolina e proteina bersaglio 7JXQ, (b) luteolina e proteina bersaglio 4QTA, e (c) quercetina e complessi 4QTB della proteina bersaglio. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66179/66179fig02large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66179/66179fig03.jpg"> Figura 3: JWSJS allevia il danno renale e sopprime l'attivazione della via di segnalazione EGFR/MAPK3/1 in esperimenti in vivo . (A) colorazione HE e (B) colorazione periodica acido-Schiff (PAS) di tessuti renali di ratto in diversi gruppi (ingrandimento, 200x; n = 10). (C) Microscopia elettronica a trasmissione di tessuto renale in diversi gruppi di ratti (Ingrandimento, 5000x; n = 3). (D) EGFR, p-EGFR, MAPK3/1, p-MAPK3/1, BAX e BCL-2 nel tessuto renale di ratto diabetico attraverso western blotting (n = 3). (E) Analisi statistica dell'espressione di p-EGFR, p-MAPK3/1, BAX e BCL-2. (F) Analisi immunoistochimica dell'espressione di p-EGFR E p-MAPK3/1 nei sei gruppi (n = 6). (G) Analisi statistica dell'espressione di p-EGFR E p-MAPK3/1. (H) analisi qPCR dell'espressione dell'mRNA di MAPK3, MAPK1 e EGFR in sei gruppi. *P &lt; 0,05 rispetto al controllo. **P &lt; 0,01 rispetto al controllo. ▲P &lt; 0,05 rispetto a DN. ▲▲P &lt; 0,01 rispetto a DN. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66179/66179fig03large.jpg" target="_blank">Fare clic qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
Tabella 1: Informazioni su alcuni principi attivi di JWSJS. Fornisce dettagli su ciascun componente e sulle sue caratteristiche o proprietà. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66179/Table%201.zip" target="_blank">Clicca qui per scaricare questa tabella.</a>
Tabella 2: Tabella dei risultati dell'aggancio dei bersagli principali e dei principali principi attivi di JWSJS. La tabella presenta i risultati degli studi di docking dei principali bersagli e dei principali componenti attivi di JWSJS. Questa tabella mostra come questi costituenti interagiscono con i rispettivi bersagli, il che può fornire informazioni sul meccanismo d'azione dei JWSJ. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66179/Table%202.zip" target="_blank">Clicca qui per scaricare questa tabella.</a>
Tabella 3: Effetto del JWSJS sul peso corporeo e sugli indici biochimici nei ratti con nefropatia diabetica (espresso come media ± deviazione standard, n = 10). Rispetto al gruppo normale: * P &lt; 0,05. Rispetto al gruppo di modelli: # P &lt; 0,05. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66179/Table%203.zip" target="_blank">Clicca qui per scaricare questa tabella.</a>

Effetto antagonista di Jiawei Shengjiang San su un modello di nefropatia diabetica di ratto: correlato alla via di segnalazione EGFR/MAPK3/1

We aimed to delve into the mechanisms underpinning Jiawei Shengjiang San's (JWSJS) action in treating diabetic nephropathy and deploying network ...

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