Name: Monitoraggio della glicemia nella prole di topo dopo liniezione intracitoplasmatica di spermatozoi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-05-17T13:40:00.000+00:00
Duration: 6 min 11 s
Description: Scopri il monitoraggio della glicemia nella prole di topo dopo l'iniezione intracitoplasmatica di spermatozoi. Questo metodo ICSI-ET rivela alterazioni metaboliche legate all'età e fornisce informazioni preziose sulla salute riproduttiva.

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<meta charset="utf8"></head><body>Modello murino ICSI-ET per studiare gli impatti a lungo termine sul metabolismo del glucosio

<ol><li>Palermo, G., Joris, H., Devroey, P., Van Steirteghem, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pregnancies+after+intracytoplasmic+injection+of+single+spermatozoon+into+an+oocyte%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Pregnancies after intracytoplasmic injection of single spermatozoon into an oocyte.</a> Lancet. 340 (8810), 17-18 (1992).</li>
<li>Flurkey, K. M., Currer, J., Harrison, D. E. Vol. III Mouse models in aging research. Ch. 20. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aFlurkey%2C+KM+%22The+mouse+in+biomedical+research+%28second+edition%29%22">The mouse in biomedical research (second edition)</a>. Fox, J. G., et al. , Academic Press. Burlington. 637-672 (2007).</li>
<li>Chen, M., Heilbronn, L. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+health+outcomes+of+human+offspring+conceived+by+assisted+reproductive+technologies+%28art%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Dev+Orig+Health+Dis%22%5BJournal%5D)">The health outcomes of human offspring conceived by assisted reproductive technologies (art).</a> J Dev Orig Health Dis. 8 (4), 388-402 (2017).</li>
<li>Heber, M. F., Ptak, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+assisted+reproduction+technologies+on+metabolic+health+and+diseasedagger%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Reprod%22%5BJournal%5D)">The effects of assisted reproduction technologies on metabolic health and diseasedagger.</a> Biol Reprod. 104 (4), 734-744 (2021).</li>
<li>Ma, R. C. W., Ng, N. Y. H., Cheung, L. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assisted+reproduction+technology+and+long-term+cardiometabolic+health+in+the+offspring%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Med%22%5BJournal%5D)">Assisted reproduction technology and long-term cardiometabolic health in the offspring.</a> PLoS Med. 18 (9), e1003724(2021).</li>
<li>De Waal, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+cumulative+effect+of+assisted+reproduction+procedures+on+placental+development+and+epigenetic+perturbations+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Mol+Genet%22%5BJournal%5D)">The cumulative effect of assisted reproduction procedures on placental development and epigenetic perturbations in a mouse model.</a> Hum Mol Genet. 24 (24), 6975-6985 (2015).</li>
<li>Carlin, J., George, R., Reyes, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methyl+donor+supplementation+blocks+the+adverse+effects+of+maternal+high+fat+diet+on+offspring+physiology%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Methyl donor supplementation blocks the adverse effects of maternal high fat diet on offspring physiology.</a> PLoS One. 8 (5), e63549(2013).</li>
<li>Hiraoka, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Piezo-icsi+for+human+oocytes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Piezo-icsi for human oocytes.</a> J Vis Exp. (170), e60224(2021).</li>
<li>Sullivan-Pyke, C. S., Senapati, S., Mainigi, M. A., Barnhart, K. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+fertilization+and+adverse+obstetric+and+perinatal+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Perinatol%22%5BJournal%5D)">In vitro fertilization and adverse obstetric and perinatal outcomes.</a> Semin Perinatol. 41 (6), 345-353 (2017).</li>
<li>Luke, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+risk+of+birth+defects+with+conception+by+art%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Reprod%22%5BJournal%5D)">The risk of birth defects with conception by art.</a> Hum Reprod. 36 (1), 116-129 (2021).</li>
<li>Norrman, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiovascular+disease%2C+obesity%2C+and+type+2+diabetes+in+children+born+after+assisted+reproductive+technology%3A+A+population-based+cohort+study%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Med%22%5BJournal%5D)">Cardiovascular disease, obesity, and type 2 diabetes in children born after assisted reproductive technology: A population-based cohort study.</a> PLoS Med. 18 (9), e1003723(2021).</li>
<li>Goldsmith, S., Mcintyre, S., Badawi, N., Hansen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebral+palsy+after+assisted+reproductive+technology%3A+A+cohort+study%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Med+Child+Neurol%22%5BJournal%5D)">Cerebral palsy after assisted reproductive technology: A cohort study.</a> Dev Med Child Neurol. 60 (1), 73-80 (2018).</li>
<li>Hansen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intellectual+disability+in+children+conceived+using+assisted+reproductive+technology%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatrics%22%5BJournal%5D)">Intellectual disability in children conceived using assisted reproductive technology.</a> Pediatrics. 142 (6), e20181269(2018).</li>
<li>Chang, R. C., Wang, H., Bedi, Y., Golding, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preconception+paternal+alcohol+exposure+exerts+sex-specific+effects+on+offspring+growth+and+long-term+metabolic+programming%5BTitle%5D)+AND+%22Epigenetics+Chromatin%22%5BJournal%5D)">Preconception paternal alcohol exposure exerts sex-specific effects on offspring growth and long-term metabolic programming.</a> Epigenetics Chromatin. 12 (1), 9(2019).</li>
<li>Grasemann, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parental+diabetes%3A+The+akita+mouse+as+a+model+of+the+effects+of+maternal+and+paternal+hyperglycemia+in+wildtype+offspring%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Parental diabetes: The akita mouse as a model of the effects of maternal and paternal hyperglycemia in wildtype offspring.</a> PLoS One. 7 (11), e50210(2012).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1,25% di avertina (2,2,2-tribromoetanolo)</td><td>Nanjing Aibei</td><td>M2960</td><td>per anestesia</td></tr><tr><td>Piastre di Petri batteriologiche 35 x 10 mm con coperchio ermetico, polistirene vergine di grado cristallo, sterili</td><td>BD</td><td>353001</td><td></td></tr><tr><td>Piastre di Petri batteriologiche 50 x 9 mm con coperchio ermetico, polistirene vergine di grado cristallino, sterile</td><td>BD</td><td>351006</td><td></td></tr><tr><td>Armadio di biosicurezza</td><td>ESCO</td><td>class <img alt="Equazione 1" src="/files/ftp_upload/66212/66212eq01.jpg" style="margine: auto; "> BSC</td><td>Operazioni asettiche, preparazione di piastre di coltura, aliquotazione di reagenti, ecc.</td></tr><tr><td>Incubatore a CO2</td><td>Thermo</td><td>8000DH</td><td>Microscopio per dissezione per colture embrionali</td></tr><tr><td></td><td>Olympus</td><td>SZX16</td><td>Utilizzo nel trasferimento di embrioni nel topo</td></tr><tr><td>Fluorinert Fc-770</td><td>SIGMA</td><td>F3556</td><td>Fluorinert FC-770 è un liquido completamente fluorurato termicamente stabile con elevata rigidità dielettrica e resistività, utilizzato come</td></tr><tr><td>glucometro portatile</td> a fluido operativo <td>Roche</td><td>AccuChek</td><td>performa Blood Misurazione del glucosio</td></tr><tr><td>HTF</td><td>Merck</td><td>MR-070-D</td><td>Il liquido tubarico umano (HTF) (1x) EmbryoMax (1x), liquido progettato per l'uso con la fecondazione in vitro su topo, è disponibile in un formato da 50 ml ed è stato ottimizzato e convalidato per la coltura embrionale.</td></tr><tr><td>Microiniettore idraulico</td><td>Eppendorf</td><td>CellTram 4r Olio, 5196000030</td><td>Per iniezione di spermatozoi</td></tr><tr><td>Microscopio invertito</td><td>Nikon</td><td>TI2-U</td><td>Host di osservazione per micromanipolazione</td></tr><tr><td>KSOM</td><td>Merck</td><td>MR-020P-D</td><td>(1x), Polvere, senza rosso fenolo, 5 x 10 mL</td></tr><tr><td>M2</td><td>Merck</td><td>MR-015-D</td><td>EmbryoMax M2 Medium (1x), Liquido, con</td></tr><tr><td>micromanipolatore</td> rosso fenolo<td>NARISHIGE</td><td>NTX-N4</td> Olio minerale <td>per braccio di micromanipolazione</td></tr><tr><td> </td><td>L'olio minerale SIGMA</td><td>M8410</td><td>è adatto per l'uso come strato di copertura per controllare l'evaporazione e la contaminazione incrociata in varie applicazioni di biologia molecolare.</td></tr><tr><td>Tagliaaghi</td><td>Nanjing Aibei</td><td>Sutter MF-800</td><td>Utilizzare per la fabbricazione di aghi per micromanipolazione</td></tr><tr><td>Needle Puller</td><td>Nanjing Aibei</td><td>Sutter modello p-100</td><td>Utilizzare per realizzare aghi per micromanipolazione</td></tr><tr><td>Piezo Drill Trip Mouce ICSI</td><td>Eppendorf</td><td>5195000.087</td><td>Applicazione dell'ago per iniezione ICSI.</td></tr><tr><td>Micromanipolatore piezoelettrico (rompimembrana)</td><td>Eppendorf</td><td>Eppendorf PiezoXpert</td><td>Uso di micro-impulsi per rompere la zona pellucida e l'oolemma dell'ovocita</td></tr><tr><td>Microiniettore pneumatico</td><td>Eppendorf</td><td>CellTram 4r Aria, 5196000013</td><td>Per il fissaggio dell'ovocita</td></tr><tr><td>Gonadotropina corionica umana pronta all'uso (Hcg)</td><td>Nanjing Aibei</td><td>M2520</td><td>Reagente di sterilizzazione, iniezione intraperitoneale. 50 UI/mL</td></tr><tr><td>Pronto all'uso Gonadotropina sierica di cavalla gravida (PMSG)</td><td>Nanjing Aibei</td><td>M2620</td><td>Reagente di sterilizzazione, iniezione intraperitoneale. 50 UI/mL</td></tr><tr><td>Stereomicroscopio</td><td>Olympus</td><td>SZX7</td><td>Prelievo di ovociti e osservazione dello sviluppo embrionale</td></tr></tbody></table>

monitoraggio della glicemia nella prole di topo dopo l'iniezione intracitoplasmatica di spermatozoi

Monitoring Blood Glucose in Mouse Offspring After Intracytoplasmic Sperm Injection

Nel nostro laboratorio, abbiamo raggiunto un tasso di fecondazione dell'89,57% e un tasso di 2 cellule dell'87,38% utilizzando l'ICSI con spermatozoi caudali dell'epididimo nei topi. Il tasso di natalità della prole dopo ET è di circa il 42,50%. Sorprendentemente, tutti i tassi di fecondazione, i tassi di 2 cellule e i tassi di natalità della prole sono paragonabili ai livelli raggiunti nella ART umana, consentendo una simulazione completa delle diverse fasi delle tecniche di ART umane nei topi. Ulteriori dettagli sono forniti nella Tabella 1 e nella Tabella 2. Non c'è stata alcuna fluttuazione significativa nei livelli casuali di glucosio nel sangue tra i topi nati naturalmente e i topi ICSI durante il processo di crescita e sviluppo (Figura 2). Tuttavia, i topi maschi ICSI hanno mostrato livelli costantemente elevati di glucosio nel sangue a digiuno durante l'esperimento (Figura 3), indicando una compromissione dell'omeostasi della glicemia a digiuno. È interessante notare che le femmine di topi ICSI non hanno mostrato cambiamenti rispetto al gruppo di controllo. Nella GTT, il livello di glucosio nel sangue ha mostrato un cambiamento significativo tra i topi maschi ICSI e il gruppo di controllo (Figura 4) e non c'era tale differenza nei topi femmine. Questi risultati hanno suggerito che la prole ottenuta utilizzando la tecnologia ICSI potrebbe soffrire di diabete e l'esito era correlato al sesso. Sebbene i topi femmina non mostrassero il fenotipo del diabete, il fenotipo in sovrappeso dei topi ICSI maschi e femmine era coerente (Figura 5).
Utilizzando il protocollo di iniezione intracitoplasmatica di spermatozoi (ICSI) qui descritto, abbiamo ottenuto alti tassi di fecondazione e sviluppo embrionale nei topi. In un esperimento rappresentativo, l'89,57% degli ovociti è stato fecondato dopo ICSI, come evidenziato dalla formazione di due pronuclei. A 24 ore dall'ICSI, l'87,38% degli zigoti si è sviluppato fino allo stadio embrionale a 2 cellule. Dopo il trasferimento dell'embrione alle femmine riceventi, il tasso di natalità dei cuccioli vivi è stato del 42,50% (risultati positivi). Utilizzando il protocollo di iniezione intracitoplasmatica di spermatozoi (ICSI) ottimizzato qui descritto, abbiamo generato in modo efficiente prole da ovociti e spermatozoi di topo. È importante sottolineare che un'accurata caratterizzazione degli animali derivati dall'ICSI ha rivelato perturbazioni metaboliche in assenza di difetti di sviluppo macroscopici.
Rispetto ai controlli allevati naturalmente, i topi ICSI maschi ma non femmine hanno mostrato un'omeostasi glicemica compromessa, evidenziata da un'elevata glicemia a digiuno (Figura 3) e da una ridotta tolleranza al glucosio nei test di tolleranza al glucosio intraperitoneale (Figura 4). Queste alterazioni possono derivare da carenze di riprogrammazione durante la fecondazione mediata da ICSI o da sottili anomalie genetiche/epigenetiche subite durante la manipolazione degli spermatozoi.
Inoltre, sia i topi maschi che le femmine ICSI hanno mostrato un aumento del peso corporeo rispetto ai controlli (Figura 5), suggerendo una propensione all'obesità. Mentre la tecnica ICSI del topo modella in modo affidabile gli esiti dell'ICSI umana, i fenotipi metabolici osservati sottolineano la necessità di interpretare con cautela i risultati dei modelli animali ICSI. Una valutazione completa della crescita, della salute e del comportamento è fondamentale per determinare l'idoneità dei topi ICSI per le applicazioni a valle.
Nel loro insieme, questi dati illustrano l'utilità del protocollo ICSI del topo per generare in modo efficiente la prole per gli studi, evidenziando anche l'importanza di valutare accuratamente i risultati fenotipici negli animali derivati dall'ICSI. Le anomalie metaboliche sesso-specifiche osservate in questo esempio sottolineano la necessità di un'attenta interpretazione dei risultati dei modelli murini ICSI.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66212/66212fig01.jpg"> Figura 1: Diagramma della preparazione del piatto per l'iniezione intracitoplasmatica di spermatozoi nei topi. Il coperchio della piastra per colture cellulari è stato diviso in metà superiore e inferiore. La metà superiore conteneva goccioline di soluzione di polivinilpirrolidone al 10% per il posizionamento degli spermatozoi. La metà inferiore conteneva goccioline di terreno M2 per l'esecuzione della procedura ICSI. Tutte le goccioline sono state ricoperte di olio minerale per evitare l'evaporazione. Questa configurazione della piastra ha consentito il trasferimento sequenziale di spermatozoi e ovociti tra goccioline PVP e M2 per consentire il processo ICSI. Le aree separate impedivano la miscelazione dei terreni durante la procedura. Abbreviazioni: ICSI = iniezione intracitoplasmatica di spermatozoi; PVP = polivinilpirrolidone. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66212/66212fig01large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66212/66212fig02.jpg"> Figura 2: Livelli casuali settimanali di glucosio nel sangue in topi di controllo allevati naturalmente (n = 5) e ICSI (n = 5) durante lo sviluppo postnatale. I livelli di glucosio nel sangue sono stati misurati settimanalmente dopo il digiuno notturno dalla vena caudale dei topi di controllo e ICSI utilizzando un glucometro. I dati sono presentati come media ± SEM. La significatività statistica è stata valutata utilizzando un ANOVA a due vie, ns, P &gt; 0,05. Abbreviazioni: SEM = Errore standard della media; ICSI = iniezione intracitoplasmatica di spermatozoi; ns = non significativo; NM = accoppiamento naturale. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66212/66212fig02large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66212/66212fig03.jpg"> Figura 3: Livelli settimanali di glucosio nel sangue a digiuno nei topi di controllo allevati naturalmente (n = 7 per i maschi, n = 7 per le femmine) e nei topi trattati con ICSI (n = 7 per i maschi, n = 7 per le femmine) durante lo sviluppo postnatale. Dopo il digiuno notturno, i livelli di glucosio nel sangue sono stati misurati settimanalmente dalla vena caudale di topi di controllo a digiuno e trattati con ICSI utilizzando un glucometro. È stato osservato che i topi maschi trattati con ICSI, ma non le femmine, mostravano livelli di glucosio nel sangue a digiuno significativamente elevati rispetto ai loro controlli di pari sesso a partire dalle 8 settimane di età. ±La significatività statistica è stata valutata utilizzando un ANOVA a due vie, ns, P &gt; 0,05, ***P &lt; 0,001,****P &lt; 0,0001). Abbreviazioni: SEM = Errore standard della media; ICSI = iniezione intracitoplasmatica di spermatozoi; ns = non significativo; NM = accoppiamento naturale. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66212/66212fig03large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66212/66212fig04.jpg"> Figura 4: Test di tolleranza al glucosio intraperitoneale in topi maschi di controllo allevati naturalmente (n = 5) e trattati con ICSI (n = 5) a 16 settimane di età. Dopo un digiuno notturno, i topi hanno ricevuto un'iniezione intraperitoneale di glucosio (2 g/kg di peso corporeo). I livelli di glucosio nel sangue sono stati quindi misurati a 0, 30, 60 e 120 minuti dopo l'iniezione. I topi maschi trattati con ICSI hanno mostrato livelli di glucosio nel sangue significativamente più elevati a 30, 60 e 120 minuti durante l'IPGTT rispetto al controllo allevato naturalmente. I dati sono presentati come media ± SEM. Le analisi sono state eseguite utilizzando ANOVA a due vie. ns, P &gt; 0,05. *P &lt; 0,05. Abbreviazioni: IPGTT = Test intraperitoneale di tolleranza al glucosio; SEM = Errore standard della media; ICSI = iniezione intracitoplasmatica di spermatozoi; ns = non significativo; NM = accoppiamento naturale. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66212/66212fig04large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66212/66212fig05.jpg"> Figura 5: Monitoraggio del peso corporeo di topi di controllo allevati naturalmente (n = 5 maschi, n = 5 femmine) e di topi trattati con ICSI (n = 5 maschi, n = 5 femmine) da 4 a 20 settimane di età. Le misurazioni settimanali hanno rivelato che sia i topi maschi che le femmine trattati con ICSI hanno mostrato un peso corporeo significativamente maggiore rispetto ai loro controlli di pari genere, a partire dalle 8 settimane di età. I dati sono presentati come media ± SEM. Le analisi sono state eseguite utilizzando ANOVA a due vie. P &lt; 0,001. P &lt; 0,0001. Abbreviazioni: SEM = Errore standard della media; ICSI = iniezione intracitoplasmatica di spermatozoi; ns = non significativo; NM = accoppiamento naturale. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66212/66212fig05large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<table border="1" fo:font-size="8px" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td style="min-width: 60px;"></td>
			<td style="min-width: 60px;">Ovociti</td>
			<td style="min-width: 60px;">Zigoti</td>
			<td style="min-width: 60px;">Tasso di fertilizzazione (%)</td>
			<td style="min-width: 60px;">a 2 celle</td>
			<td style="min-width: 60px;">Velocità a 2 celle (%)</td>
			<td style="min-width: 60px;">4-8 celle</td>
			<td style="min-width: 60px;">Velocità di cella 4-8 (%)</td>
			<td style="min-width: 60px;">Morula</td>
			<td style="min-width: 60px;">Tasso di Morula</td>
			<td style="min-width: 60px;">Blastocisti</td>
			<td style="min-width: 60px;">Tasso di blastocisti</td>
		</tr><tr><td style="min-width: 60px;">Spermatozoo della cauda ICSI1</td>
			<td style="min-width: 60px;">90</td>
			<td style="min-width: 60px;">84</td>
			<td style="min-width: 60px;">93.33</td>
			<td style="min-width: 60px;">76</td>
			<td style="min-width: 60px;">90.48</td>
			<td style="min-width: 60px;">72</td>
			<td style="min-width: 60px;">85.71</td>
			<td style="min-width: 60px;">69</td>
			<td style="min-width: 60px;">82.14</td>
			<td style="min-width: 60px;">64</td>
			<td style="min-width: 60px;">76.19</td>
		</tr><tr><td style="min-width: 60px;">Spermatozoo della cauda ICSI2</td>
			<td style="min-width: 60px;">80</td>
			<td style="min-width: 60px;">72</td>
			<td style="min-width: 60px;">90</td>
			<td style="min-width: 60px;">62</td>
			<td style="min-width: 60px;">86.11</td>
			<td style="min-width: 60px;">59</td>
			<td style="min-width: 60px;">81.94</td>
			<td style="min-width: 60px;">53</td>
			<td style="min-width: 60px;">73.61</td>
			<td style="min-width: 60px;">46</td>
			<td style="min-width: 60px;">63.89</td>
		</tr><tr><td style="min-width: 60px;">Spermatozoo di cauda ICSI3</td>
			<td style="min-width: 60px;">60</td>
			<td style="min-width: 60px;">50</td>
			<td style="min-width: 60px;">83.33</td>
			<td style="min-width: 60px;">42</td>
			<td style="min-width: 60px;">84</td>
			<td style="min-width: 60px;">37</td>
			<td style="min-width: 60px;">74</td>
			<td style="min-width: 60px;">32</td>
			<td style="min-width: 60px;">64</td>
			<td style="min-width: 60px;">28</td>
			<td style="min-width: 60px;">56</td>
		</tr><tr><td style="min-width: 60px;">Totale</td>
			<td style="min-width: 60px;">230</td>
			<td style="min-width: 60px;">206</td>
			<td style="min-width: 60px;">89.57</td>
			<td style="min-width: 60px;">180</td>
			<td style="min-width: 60px;">87.38</td>
			<td style="min-width: 60px;">168</td>
			<td style="min-width: 60px;">81.55</td>
			<td style="min-width: 60px;">154</td>
			<td style="min-width: 60px;">74.76</td>
			<td style="min-width: 60px;">138</td>
			<td style="min-width: 60px;">66.99</td>
		</tr></tbody></table>Tabella 1: Risultati dello sviluppo dopo ICSI del topo. Abbreviazione: ICSI = iniezione intracitoplasmatica di spermatozoi.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>No.</td>
			<td>No. di embrioni trasferiti</td>
			<td>No. di nascita (%)</td>
			<td>Maschio</td>
			<td>Femmina</td>
			<td>Tasso di natalità (%)</td>
		</tr><tr><td>1</td>
			<td>6</td>
			<td>3</td>
			<td>3</td>
			<td>0</td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>2</td>
			<td>6</td>
			<td>1</td>
			<td>1</td>
			<td>0</td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>3</td>
			<td>5</td>
			<td>2</td>
			<td>0</td>
			<td>2</td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>4</td>
			<td>8</td>
			<td>4</td>
			<td>2</td>
			<td>2</td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>5</td>
			<td>8</td>
			<td>2</td>
			<td>1</td>
			<td>1</td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>6</td>
			<td>7</td>
			<td>5</td>
			<td>3</td>
			<td>2</td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Totale</td>
			<td>40</td>
			<td>17</td>
			<td>10</td>
			<td>7</td>
			<td>42.5</td>
		</tr></tbody></table>Tabella 2: Esiti alla nascita dopo trapianto uterino di embrioni di topo ICSI. Abbreviazione: ICSI = iniezione intracitoplasmatica di spermatozoi.

Monitoraggio della glicemia nella prole di topo dopo l'iniezione intracitoplasmatica di spermatozoi

Human lifespan is considerably long, while mouse models can simulate the entire human lifespan in a relatively short period, with one year of mouse life ...

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Biologia dello sviluppo

Questo video mostra l'effetto dell'infusione continua di farmaci nel cervello del topo sui livelli di glucosio nel sangue. Il metabolismo del glucosio viene valutato prelevando il sangue dalla coda di un topo a digiuno e misurando i livelli di glucosio prima e dopo la somministrazione orale di glucosio. La tolleranza all'insulina viene valutata iniettando insulina nel topo, con livelli di glucosio registrati a intervalli specifici.

Valutazione dell'effetto dell'infusione continua di farmaci nel cervello del topo sui livelli periferici di glucosio

Questo protocollo studia il ruolo del ligando di chemochina (motivo C-C) 5 (CCL5) nell'ipotalamo fornendo un antagonista, MetCCL5, nel cervello del mouse utilizzando un sistema di infusione cervello pompa micro-osmotica. Questa inibizione transitoria di CCL5 attività interrotta ipotalamico insulina segnalazione, che conduce ad intolleranza al glucosio e la sensibilità periferica dell'insulina sistemica.

Studiando il segnale ipotalamico insulina ad intolleranza al glucosio periferico con un sistema di infusione del farmaco continuo nel cervello del Mouse

In questo studio, descriviamo un sistema in-ovo come un promettente strumento per testare composti insulino-mimetici in un organismo vivente. I principali vantaggi includono un'adeguata velocità di trasferimento e costi accettabili, che consentano l'identificazione di sostanze fitochimiche con proprietà insulino-mimetici.

Un modello In Ovo per testare composti insulino-mimetici

Qui descriviamo un nuovo metodo per rilevare la creazione di successo della circolazione condivisa del sangue di due parabionts attraverso un'iniezione di vena caudale di glucosio, che provoca danni minimi e non è fatale per i parabionts.

Rilevare l'istituzione dell'afflusso di sangue condiviso nei topi parabiotici da Caudal Vein Glucose Injection

Questo studio descrive la misurazione diretta della produzione epatica di glucosio in un modello murino di sindrome dell'ovaio policistico utilizzando un tracciante di glucosio isotopico stabile attraverso la vena della coda sia a digiuno che in stati ricchi di glucosio in tandem.

Valutazione della produzione epatica di glucosio in un modello murino di sindrome dell'ovaio policistico

L'infezione materna è un fattore di rischio per i disturbi dello sviluppo neurologico. I modelli murini di attivazione immunitaria materna (MIA) possono chiarire l'impatto dell'infezione sullo sviluppo e sulla funzione del cervello. Qui vengono fornite linee guida generali e una procedura per produrre una prole resiliente e suscettibile esposta a MIA.

Generazione di un modello riproducibile di attivazione immunitaria materna a metà gestazionale utilizzando poli (I: C) per studiare la suscettibilità e la resilienza nella prole

Questo articolo descrive un protocollo dettagliato per aumentare la concentrazione di glucosio nel liquido cerebrospinale (CSF) dei topi. Questo approccio può essere utile per studiare gli effetti del glucosio CSF alto sulla neurodegenerazione, sulla cognizione e sul metabolismo periferico del glucosio nei topi.

Impianto di minipompa osmotica per aumentare la concentrazione di glucosio nel liquido cerebrospinale di topo

Qui, introduciamo un metodo per eseguire l'iniezione di spermatide rotondo (ROSI) nei topi, una tecnica con promettenti applicazioni cliniche e utilità per studiare i meccanismi alla base dello sviluppo embrionale.

Iniezione di spermatide rotondo di topo

Questo protocollo descrive il metodo per ridurre l'assunzione alimentare di acido folico o colina nei topi femmina prima della gravidanza con l'obiettivo di studiare l'impatto della dieta materna sui risultati di salute della prole.

Modifica dei livelli di acido folico o colina nella dieta materna per studiare l'impatto delle carenze sugli esiti di salute della prole

L'articolo fornisce un protocollo completo per generare un modello murino di attivazione immunitaria materna (MIA) per studiare gli effetti dell'infiammazione gestazionale precoce sul neurosviluppo, inclusi metriche chiave per garantire affidabilità e riproducibilità.

Generazione del modello murino con attivazione immunitaria materna gestazionale precoce per valutare l'infiammazione prenatale nello sviluppo neurologico

Scopri il monitoraggio della glicemia nella prole di topo dopo l'iniezione intracitoplasmatica di spermatozoi. Questo metodo ICSI-ET rivela alterazioni metaboliche legate all'età e fornisce informazioni preziose sulla salute riproduttiva.

Monitoraggio della glicemia nella prole di topo dopo l'iniezione intracitoplasmatica di spermatozoi

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