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Stima della sensibilità strutturale di regioni intrinsecamente disordinate in risposta allo stres...
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JoVE Journal Biochemistry
Estimation of Structural Sensitivity of Intrinsically Disordered Regions in Response to Hyperosmotic Stress in Living Cells Using FRET

Stima della sensibilità strutturale di regioni intrinsecamente disordinate in risposta allo stress iperosmotico in cellule viventi utilizzando FRET

Full Text
1,472 Views
05:13 min
January 12, 2024

DOI: 10.3791/66275-v

Constanza Enriquez-Toledo*1, Cesar A. Ponce-Diego*1, Cesar L. Cuevas-Velazquez1

1Departamento de Bioquímica, Facultad de Química,Universidad Nacional Autónoma de México

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Le regioni intrinsecamente disordinate (IDR) sono domini proteici flessibili che modificano la loro conformazione in risposta ai cambiamenti ambientali. Il trasferimento di energia di risonanza di fluorescenza d'insieme (FRET) può stimare le dimensioni delle proteine in diverse condizioni. Presentiamo un approccio FRET per valutare la sensibilità strutturale dell'IDR in cellule viventi di Saccharomyces cerevisiae in condizioni di stress iperosmotico.

Il nostro obiettivo è capire come le regioni intrinsecamente disordinate percepiscono e rispondono ai cambiamenti nelle proprietà fisico-chimiche dell'ambiente. Combiniamo tecniche biofisiche, biochimiche, genetiche e di biologia cellulare per monitorare come cambia l'insieme strutturale delle regioni disordinate nelle cellule viventi. Le tecniche di biofisica delle proteine sono attualmente utilizzate per studiare la conferma degli IVR.

Questi includono la risonanza magnetica nucleare, il dicroismo circolare, la diffusione di raggi X a piccolo angolo e FRET. La maggior parte di queste tecniche può essere utilizzata solo in vitro. Studiare la conferma degli IVR in un contesto cellulare è impegnativo con tecniche costose e dispendiose in termini di tempo.

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