Quantificazione della spina dendritica utilizzando un software di ricostruzione automatica dei neuroni tridimensionali

Le spine dendritiche sono compartimenti post-sinaptici della maggior parte delle sinapsi eccitatorie. Le alterazioni della morfologia della colonna vertebrale dendritica si verificano durante lo sviluppo neurologico, l'invecchiamento, l'apprendimento e molti disturbi neurologici e psichiatrici, sottolineando l'importanza di un'analisi affidabile della colonna vertebrale dendritica. Questo protocollo descrive la quantificazione della morfologia della spina dendritica in modo accurato e riproducibile utilizzando un software di ricostruzione automatica dei neuroni tridimensionali.

Lo scopo della nostra ricerca è quello di esaminare il profilo strutturale delle spine dendritiche nell'ippocampo, in particolare il dendrite apicale CA-one. In questo modo, stiamo cercando di rispondere a domande incentrate su come diversi input a diverse parti dello stesso dendrite possano essere codificati a livello cellulare. Una sfida consiste nell'ottenere immagini ad alta risoluzione delle spine dendritiche per l'analisi delle spine.

Una volta ottenute queste immagini, il metodo per analizzare in modo più accurato e affidabile le spine dorsali in un modo che non sia eccessivamente oneroso per il ricercatore presenta un'ulteriore sfida. Occorre trovare un equilibrio tra le due componenti. Questo protocollo offre una via di mezzo tra l'analisi completamente manuale e completamente automatizzata della colonna vertebrale dendritica.

Il nostro protocollo riduce l'onere del conteggio manuale delle singole spine. Inoltre, la ricostruzione 3D consente di ottenere il volume della colonna vertebrale. Classificare automaticamente le spine in corrispondenza dei sottotipi.