Generazione, manutenzione e identificazione di modelli di zebrafish privi di germi dalle larve agli stadi giovanili

Questo protocollo delinea i passaggi principali per ottenere embrioni di pesce privi di germi (GF) e mantenerli dalle larve fino allo stadio giovanile, compreso il campionamento e il rilevamento del loro stato di sterilità. L'uso di modelli GF con infezione è importante per comprendere il ruolo dei microbi nella salute dell'ospite.

Lo scopo di questa ricerca è la generazione di nuovi modelli animali privi di germi, che saranno strumenti utili e potenti nello studio di varie funzioni del microbioma. In questo campo, i primi modelli di pesci privi di germi sono stati utilizzati di recente, ma i modelli a lungo termine sono ancora limitati a causa delle varie condizioni di coltura e della difesa dello sviluppo del personale. Gli attuali modelli di pesci GF sono normalmente quelli dei primi anni di vita.

Pertanto, le tecnologie tra cui la bilancia sterile, i metodi di rilevamento dei campioni e la fornitura di cibo sterile sono sfide molto importanti da superare. Il modello di pesce zebra privo di germi è fondamentale per studiare l'interazione ospite-microbiota e il loro impatto sullo sviluppo, sull'immunità e sulla malattia. Questo modello consente ai ricercatori di manipolare con precisione i singoli batteri intestinali e osservarne l'effetto sugli embrioni trasparenti di pesce zebra.

Fornisce preziose informazioni sui ruoli dei microbi intestinali che ereditano la malattia. In futuro, la nostra ricerca si concentrerà principalmente sulla creazione di un modello di zebrafish privo di germi per l'intero ciclo di vita per comprendere meglio la funzione del microbioma intestinale.