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Modelli proteici dinamici indotti dalla luce su membrane modello
Modelli proteici dinamici indotti dalla luce su membrane modello
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Bioengineering
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JoVE Journal Bioengineering
Dynamic Light-Induced Protein Patterns at Model Membranes

Modelli proteici dinamici indotti dalla luce su membrane modello

Full Text
1,675 Views
07:10 min
February 23, 2024

DOI: 10.3791/66531-v

Daniele Di Iorio1, Seraphine V. Wegner1

1Institute of Physiological Chemistry and Pathobiochemistry,University of Münster

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Qui viene descritto un protocollo per la generazione di pattern proteici reversibili e regolati dalla luce con un'elevata precisione spaziotemporale sulle membrane lipidiche artificiali. La metodica consiste nella fotoattivazione localizzata della proteina iLID (improved light-inducible dimer) immobilizzata su membrane modello che, sotto luce blu, si lega alla sua proteina partner Nano (SspB wild-type).

Nel nostro lavoro, miriamo a riprodurre i processi cellulari in modelli artificiali simili a cellule che richiedono la localizzazione precisa delle proteine in un dato punto in un determinato momento. Qui, come esempio, dimostriamo la formazione di pattern proteici dinamici su membrane lipidiche modello con alta precisione e alto controllo temporale spaziale utilizzando proteine fotocommutabili e luce visibile. Una delle attuali sfide sperimentali consiste nella riproduzione di pattern proteici dinamici su membrane lipidiche modello.

Qui, abbiamo bisogno di manipolare questi modelli proteici in modo rapido e reversibile con alta precisione in modo biocompatibile e non invasivo. Utilizziamo proteine fotocommutabili per reclutare e modellare proteine di interesse su doppi strati lipidici supportati e vescicole unilamellari giganti. Otteniamo un reclutamento proteico rapido e localizzato e il patterning proteico è completamente reversibile al buio e può essere ripetuto più volte.

Nel nostro protocollo, impieghiamo la luce visibile per formare modelli proteici. La luce è un trigger attraente per controllare le interazioni con un'elevata risoluzione spaziotemporale e sintonizzabilità. La luce, inoltre, non è invasiva e non danneggia le biomolecole.

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Parole chiave: Modelli proteici dinamici Reclutamento proteico indotto dalla luce Doppi strati lipidici supportati Vescicole unilamellari giganti ILID Nano Proteina fotocommutabile Controllo spaziotemporale Cellule sintetiche Legame proteico reversibile

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