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DOI: 10.3791/66697-v
Ying Xue*1, Yunyu Mao*2, Qibin Liao3, Chen Zhao4, Xiaoyan Zhang1,2,4, Jianqing Xu1,2,4
1Institutes of Biomedical Sciences,Fudan University, 2Clinical Center of Biotherapy at Zhongshan Hospital,Fudan University, 3Department of Oncology and Bio-therapeutic Center, Shenzhen Third People's Hospital,Southern University of Science and Technology, 4Shanghai Public Health Clinical Center,Fudan University
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This article presents a protocol for generating hypoxia-sensitive chimeric antigen receptor (CAR)-T cells and verifying their functionality. The focus is on the lentivirus-based generation of these CAR-T cells, emphasizing their hypoxia-dependent expression and selective cytotoxicity against tumors.
Qui presentiamo un protocollo per la generazione e la verifica funzionale di cellule T sensibili al recettore chimerico dell'antigene (CAR)-T sensibili all'ipossia. Questo protocollo presenta la generazione di cellule CAR-T sensibili all'ipossia basate su lentivirus e la loro caratterizzazione, inclusa la convalida dell'espressione CAR ipossia-dipendente e della citotossicità selettiva.
La nostra ricerca si concentra principalmente sull'immunoterapia del cancro, in particolare sull'immunoterapia basata su cellule T CAR. Negli ultimi 10 anni abbiamo esplorato nuove strategie per consentire alle cellule T CAR di colpire specificamente un tumore riducendo al minimo l'effetto collaterale o addirittura nessun effetto collaterale. Nuove strategie sono state costantemente esplorate per migliorare la sicurezza e l'efficacia dell'immunoterapia basata su cellule T CAR, in particolare mirando al microambiente tumorale, come il CAR condizionato da ipossia, come esemplificato in questo protocollo.
È interessante notare che studi recenti hanno dimostrato che la condizione di ipossia CAR T non solo ha notevolmente migliorato il profilo di sicurezza, ma ha anche ridotto l'esaurimento delle CAR T e ha migliorato l'efficacia nei tumori solidi. L'ipossia è una caratteristica del microambiente tumorale. La nostra ricerca mira ad aiutare i ricercatori nel campo dell'immunoterapia del cancro a comprendere il concetto di cellule T CAR sensibili all'ipossia, la loro costruzione e come stabilire modelli di ipossia per la valutazione.
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