Name: Una radiosintesi automatizzata di 68Ga Ga-FAPI-46 per uso clinico di routine (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-05-24T14:20:00.000+00:00
Duration: 10 min 33 s
Description: Scopri la sintesi automatizzata del tracciante PET [68Ga]Ga-FAPI-46 con il sintetizzatore iPHASE MultiSyn per l'imaging oncologico. Questo metodo GMP riduce il rischio radiologico e migliora la produzione clinica.

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Gli autori riconoscono e ringraziano SOFIE Biosciences Inc. per aver fornito il precursore chimico FAPI-46 e lo standard [natGa]Ga-FAPI-46, la Charlies Foundation for Research per il sostegno finanziario, Stan Poniger di iPHASE Pty Ltd e il team di produzione di radiofarmaci (RAPID) presso il Dipartimento di Tecnologia Medica e Fisica del Sir Charles Gairdner Hospital per il loro supporto scientifico e tecnico. Gli autori riconoscono anche l'assistenza del WA National Imaging Facility Node, che è supportato da finanziamenti infrastrutturali dal governo dello Stato dell'Australia occidentale in collaborazione con il governo federale australiano, attraverso la capacità National Collaborative Research Infrastructure Strategy (NCRIS).

Automated Production of [68Ga]Ga-FAPI-46 on the iPHASE MultiSyn Synthesizer

<ol><li>Imlimthan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+frontiers+in+cancer+imaging+and+therapy+based+on+radiolabeled+fibroblast+activation+protein+inhibitors%3A+a+rational+review+and+current+progress%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceuticals%22%5BJournal%5D)">New frontiers in cancer imaging and therapy based on radiolabeled fibroblast activation protein inhibitors: a rational review and current progress.</a> Pharmaceuticals. 14 (10), 1023(2021).</li>
<li>Siveke, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibroblast-activating+protein%3A+targeting+the+roots+of+the+tumor+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nucl+Med%22%5BJournal%5D)">Fibroblast-activating protein: targeting the roots of the tumor microenvironment.</a> J Nucl Med. 59 (9), 1415-1423 (2018).</li>
<li>Koczorowska, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibroblast+activation+protein-%CE%B1%2C+a+stromal+cell+surface+protease%2C+shapes+key+features+of+cancer+associated+fibroblasts+through+proteome+and+degradome+alterations%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Oncol%22%5BJournal%5D)">Fibroblast activation protein-α, a stromal cell surface protease, shapes key features of cancer associated fibroblasts through proteome and degradome alterations.</a> Mol Oncol. 10 (1), 40-58 (2016).</li>
<li>Altmann, A., Haberkorn, U., Siveke, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+latest+developments+in+imaging+of+fibroblast+activation+protein%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nucl+Med%22%5BJournal%5D)">The latest developments in imaging of fibroblast activation protein.</a> J Nucl Med. 62 (2), 160-167 (2021).</li>
<li>Lindner,, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+of+activated+fibroblasts+for+imaging+and+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22EJNMMI+Radiopharm+Chem%22%5BJournal%5D)">Targeting of activated fibroblasts for imaging and therapy.</a> EJNMMI Radiopharm Chem. 4, 16(2019).</li>
<li>Linder, T., Giesel, F. L., Kratochwil, C., Serfling, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radioligands+targeting+fibroblast+activation+protein+%28FAP%29%5BTitle%5D)+AND+%22Cancers%22%5BJournal%5D)">Radioligands targeting fibroblast activation protein (FAP).</a> Cancers. 13 (22), 5744(2021).</li>
<li>Loktev, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+tumor-imaging+method+targeting+cancer-associated+fibroblast%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nucl+Med%22%5BJournal%5D)">A tumor-imaging method targeting cancer-associated fibroblast.</a> J Nucl Med. 59 (9), 1423-1429 (2018).</li>
<li>Lindner, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+quinoline-based+theranostic+ligands+for+the+targeting+of+fibroblast+activation+protein%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nucl+Med%22%5BJournal%5D)">Development of quinoline-based theranostic ligands for the targeting of fibroblast activation protein.</a> J Nucl Med. 59 (9), 1415-1422 (2018).</li>
<li>Giesel, F. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((68Ga-FAPI+PET%2FCT%3A+biodistribution+and+preliminary+dosimetry+estimate+of+2+DOTA-containing+FAP-targeting+agents+in+patients+with+various+cancers%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nucl+Med%22%5BJournal%5D)">68Ga-FAPI PET/CT: biodistribution and preliminary dosimetry estimate of 2 DOTA-containing FAP-targeting agents in patients with various cancers.</a> J Nucl Med. 60 (3), 386-392 (2019).</li>
<li>Loktev, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+fibroblast+activation+protein-targeted+radiotracers+with+improved+tumor+retention%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nucl+Med%22%5BJournal%5D)">Development of fibroblast activation protein-targeted radiotracers with improved tumor retention.</a> J Nucl Med. 60, 1421-1429 (2019).</li>
<li>Giesel, F. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FAPI-74+PET%2FCT+using+either+18F-AlF+or+cold-kit+68Ga+labeling%3A+biodistribution%2C+radiation+dosimetry%2C+and+tumor+delineation+in+lung+cancer+patients%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nucl+Med%22%5BJournal%5D)">FAPI-74 PET/CT using either 18F-AlF or cold-kit 68Ga labeling: biodistribution, radiation dosimetry, and tumor delineation in lung cancer patients.</a> J Nucl Med. 62 (2), 201-207 (2021).</li>
<li>Jansen, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+inhibitors+of+fibroblast+activation+protein+%28FAP%29+with+a+%284-quinolinoyl%29-glycyl-2-cyanopyrrolidine+scaffold%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Med+Chem+Lett%22%5BJournal%5D)">Selective inhibitors of fibroblast activation protein (FAP) with a (4-quinolinoyl)-glycyl-2-cyanopyrrolidine scaffold.</a> ACS Med Chem Lett. 4 (5), 491-496 (2013).</li>
<li>Tsai, T. -Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Substituted+4-carboxymethylpyroglutamic+acid+diamides+as+potent+and+selective+inhibitors+of+fibroblast+activation+protein%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Chem%22%5BJournal%5D)">Substituted 4-carboxymethylpyroglutamic acid diamides as potent and selective inhibitors of fibroblast activation protein.</a> J Med Chem. 53 (18), 6572-6583 (2010).</li>
<li>Zboralski, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preclinical+evaluation+of+FAP-2286+for+fibroblast+activation+protein+targeted+radionuclide+imaging+and+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Nucl+Med+Mol+Imaging%22%5BJournal%5D)">Preclinical evaluation of FAP-2286 for fibroblast activation protein targeted radionuclide imaging and therapy.</a> Eur J Nucl Med Mol Imaging. 49 (11), 3651-3667 (2022).</li>
<li>Greifenstein, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3BP-3940%2C+a+highly+potent+FAP-targeting+peptide+for+theranostics+-+production%2C+validation+and+first+in+human+experience+with+Ga-68+and+Lu-177%5BTitle%5D)+AND+%22iScience%22%5BJournal%5D)">3BP-3940, a highly potent FAP-targeting peptide for theranostics - production, validation and first in human experience with Ga-68 and Lu-177.</a> iScience. 26 (12), 108541(2023).</li>
<li>Kratochwil, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((68Ga-FAPI+PET%2FCT%3A+tracer+uptake+in+28+different+kinds+of+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nucl+Med%22%5BJournal%5D)">68Ga-FAPI PET/CT: tracer uptake in 28 different kinds of cancer.</a> J Nucl Med. 60 (6), 801-805 (2019).</li>
<li>Guglielmo, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Head-to-head+comparison+of+FDG+and+radiolabeled+FAPI+PET+A+systematic+review+of+the+literature%5BTitle%5D)+AND+%22Life%22%5BJournal%5D)">Head-to-head comparison of FDG and radiolabeled FAPI PET A systematic review of the literature.</a> Life. 13 (9), 1821(2023).</li>
<li>Chen, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Usefulness+of+%5B68Ga%5DGa-DOTA-FAPI-04+PET%2FCT+in+patients+presenting+with+inconclusive+%5B18F%5DFDG+PET%2FCT+findings%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Nucl+Med+Mol+Imaging%22%5BJournal%5D)">Usefulness of [68Ga]Ga-DOTA-FAPI-04 PET/CT in patients presenting with inconclusive [18F]FDG PET/CT findings.</a> Eur J Nucl Med Mol Imaging. 48 (1), 73-86 (2021).</li>
<li>Hicks, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FAPI+PET%2FCT%3A+Will+it+end+the+hegemony+of+18F-FDG+in+oncology%5BTitle%5D)+AND+%22JNucl+Med%22%5BJournal%5D)">FAPI PET/CT: Will it end the hegemony of 18F-FDG in oncology.</a> JNucl Med. 62 (3), 296-302 (2021).</li>
<li>Kuwert, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FAPI+PET+opens+a+new+window+to+understanding+immune-mediated+inflammatory+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22JNucl+Med%22%5BJournal%5D)">FAPI PET opens a new window to understanding immune-mediated inflammatory diseases.</a> JNucl Med. 63 (8), 1136-1137 (2022).</li>
<li>Haberkorn, U., et al. FAP inhibitor. (International publication no. WO 2019/154886 A1). WIPO. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://patentscope.wipo.int/search/en/detail.jsf?docId=WO2019154886">https://patentscope.wipo.int/search/en/detail.jsf?docId=WO2019154886</a> (2019).</li>
<li>Bouscaillou, M., Dawn, A. SOFIE and GE HealthCare Enter Licensing Agreement to Develop FAP PET Radiotracers. GE Healthcare. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.gehealthcare.com/about/newsroom/press-releases/sofie-and-ge-healthcare-enter-licensing-agreement-to-develop-fap-pet-radiotracers">https://www.gehealthcare.com/about/newsroom/press-releases/sofie-and-ge-healthcare-enter-licensing-agreement-to-develop-fap-pet-radiotracers</a> (2023).</li>
<li>Meyer, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radiation+dosimetry+and+biodistribution+of+68Ga-FAPI-46+PET+imaging+in+cancer+patients%5BTitle%5D)+AND+%22JNucl+Med%22%5BJournal%5D)">Radiation dosimetry and biodistribution of 68Ga-FAPI-46 PET imaging in cancer patients.</a> JNucl Med. 61 (8), 1171-1177 (2020).</li>
<li>Liu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibroblast+activation+protein+targeted+therapy+using+%5B177Lu%5DFAPI-46+compared+with+%5B225Ac%5DFAPI-46+in+a+pancreatic+cancer+model%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Nucl+Med+Mol+Imaging%22%5BJournal%5D)">Fibroblast activation protein targeted therapy using [177Lu]FAPI-46 compared with [225Ac]FAPI-46 in a pancreatic cancer model.</a> Eur J Nucl Med Mol Imaging. 49 (3), 871-880 (2022).</li>
<li>Meisenheimer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Manual+vs+automated+68Ga-radiolabelling-A+comparison+of+optimized+processes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Labelled+Comp+Radiopharm%22%5BJournal%5D)">Manual vs automated 68Ga-radiolabelling-A comparison of optimized processes.</a> J Labelled Comp Radiopharm. 63, 162-173 (2020).</li>
<li>Spreckelmeyer, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fully+automated+production+of+%5B68Ga%5DGa-FAPI-46+for+clinical+application%5BTitle%5D)+AND+%22EJNMMI+Radiopharm+Chem%22%5BJournal%5D)">Fully automated production of [68Ga]Ga-FAPI-46 for clinical application.</a> EJNMMI Radiopharm Chem. 5 (31), (2020).</li>
<li>Boonkawin, N., Chotipanich, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+first+radiolabeled+68Ga-FAPI-46+for+clinical+PET+applications+using+a+fully+automated+iQS-TS+synthesis+system+in+Thailand%5BTitle%5D)+AND+%22J+Chulabhorn+Royal+Acad%22%5BJournal%5D)">The first radiolabeled 68Ga-FAPI-46 for clinical PET applications using a fully automated iQS-TS synthesis system in Thailand.</a> J Chulabhorn Royal Acad. 3 (3), 180-188 (2021).</li>
<li>Nader, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%5B68Ga%5D%2F%5B90Y%5DFAPI-46%3A+Automated+production+and+analytical+validation+of+a+theranostic+pair%5BTitle%5D)+AND+%22Nucl+Med+Biol%22%5BJournal%5D)">[68Ga]/[90Y]FAPI-46: Automated production and analytical validation of a theranostic pair.</a> Nucl Med Biol. 110-111, 37-44 (2022).</li>
<li>Da Pieve, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+fully+automated+preparation+of+high+apparent+molar+activity+68Ga-FAPI-46+on+a+Trasis+AiO+platform%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">New fully automated preparation of high apparent molar activity 68Ga-FAPI-46 on a Trasis AiO platform.</a> Molecules. 27 (3), 675(2022).</li>
<li>Alfteimi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+synthesis+of+%5B68Ga%5DGa-FAPI-46+without+pre-purification+of+the+generator+eluate+on+three+common+synthesis+modules+and+two+generator+types%5BTitle%5D)+AND+%22EJNMMI+Radiopharm+Chem%22%5BJournal%5D)">Automated synthesis of [68Ga]Ga-FAPI-46 without pre-purification of the generator eluate on three common synthesis modules and two generator types.</a> EJNMMI Radiopharm Chem. 7 (1), 20(2022).</li>
<li>Plhak, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+synthesis+of+%5B68Ga%5DGa-FAPI-46+on+a+Scintomics+GRP+synthesizer%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceuticals%22%5BJournal%5D)">Automated synthesis of [68Ga]Ga-FAPI-46 on a Scintomics GRP synthesizer.</a> Pharmaceuticals. 16 (8), 1138(2023).</li>
<li>Rubira, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((68Ga%5DGa-FAPI-46+synthesis+on+a+GAIA%C2%AE+module+system%3A+Thorough+study+of+the+automated+radiolabeling+reaction+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Radiat+Isot%22%5BJournal%5D)">68Ga]Ga-FAPI-46 synthesis on a GAIA® module system: Thorough study of the automated radiolabeling reaction conditions.</a> Appl Radiat Isot. 206, 111211(2024).</li>
<li>Mallapura,, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microfuidic-based+production+of+%5B68Ga%5DGa-FAPI-46+and+%5B68Ga%5DGa-DOTA-TOC+using+the+cassette-based+iMiDEV+microfluidic+radiosynthesizer%5BTitle%5D)+AND+%22EJNMMI+Radiopharm+Chem%22%5BJournal%5D)">Microfuidic-based production of [68Ga]Ga-FAPI-46 and [68Ga]Ga-DOTA-TOC using the cassette-based iMiDEV microfluidic radiosynthesizer.</a> EJNMMI Radiopharm Chem. 8 (42), (2023).</li>
<li>Rosenberg, A. J., Cheung, Y. -Y., Sollert, C., Peterson, T. E., Kropski, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fully+automated+radiosynthesis+of+%5B68Ga%5D+Ga-FAPI-46+with+cyclotron+produced+gallium%5BTitle%5D)+AND+%22EJNMMI+Radiopharm+Chem%22%5BJournal%5D)">Fully automated radiosynthesis of [68Ga] Ga-FAPI-46 with cyclotron produced gallium.</a> EJNMMI Radiopharm Chem. 8 (29), (2023).</li>
<li>Eryilmaz, K., Kilbas, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fully+automated+synthesis+of+177Lu+labelled+FAPI+derivatives+on+the+module+modular+lab-Eazy%5BTitle%5D)+AND+%22EJNMMI+Radiopharm+Chem%22%5BJournal%5D)">Fully automated synthesis of 177Lu labelled FAPI derivatives on the module modular lab-Eazy.</a> EJNMMI Radiopharm Chem. 6, 16(2021).</li>
<li>Greifenstein, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+automated+synthesis+to+in+vivo+application+in+multiple+types+of+cancer-clinical+results+with+%5B68Ga%5DGa-DATA5m.SA.FAPi%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceuticals%22%5BJournal%5D)">From automated synthesis to in vivo application in multiple types of cancer-clinical results with [68Ga]Ga-DATA5m.SA.FAPi.</a> Pharmaceuticals. 15 (8), 1000(2022).</li>
<li>Haskali, M. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+preparation+of+clinical+grade+%5B68Ga%5DGa-DOTA-CP04%2C+a+cholecystokinin-2+receptor+agonist%2C+using+iPHASE+MultiSyn+synthesis+platform%5BTitle%5D)+AND+%22EJNMMI+Radiopharm+Chem%22%5BJournal%5D)">Automated preparation of clinical grade [68Ga]Ga-DOTA-CP04, a cholecystokinin-2 receptor agonist, using iPHASE MultiSyn synthesis platform.</a> EJNMMI Radiopharm Chem. 4 (1), 23(2019).</li>
<li>Wichmann, C. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+radiosynthesis+of+%5B68Ga%5DGa-PSMA-11+and+%5B177Lu%5DLu-PSMA-617+on+the+iPHASE+MultiSyn+module+for+clinical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22J+Labelled+Comp+Radiopharm%22%5BJournal%5D)">Automated radiosynthesis of [68Ga]Ga-PSMA-11 and [177Lu]Lu-PSMA-617 on the iPHASE MultiSyn module for clinical applications.</a> J Labelled Comp Radiopharm. 64 (3), 140-146 (2021).</li>
<li>Wichmann, C. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+radiosynthesis+of+%5B89Zr%5DZr-DFOSq-Durvalumab+for+imaging+of+PD-L1+expressing+tumours+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Nucl+Med+Biol%22%5BJournal%5D)">Automated radiosynthesis of [89Zr]Zr-DFOSq-Durvalumab for imaging of PD-L1 expressing tumours in vivo.</a> Nucl Med Biol. , 108351 120-121 (2023).</li>
<li>European Pharmacopoeia. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22European+Pharmacopoeia.+11+edn%22">European Pharmacopoeia. 11 edn</a>. , Directorate for the Quality of Medicines and HealthCare of the Council of Europe (2024).</li>
<li>Mu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification%2C+characterization+and+suppression+of+side-products+formed+during+the+synthesis+of+high+dose+68Ga-DOTA-TATE%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Radiat+Isot%22%5BJournal%5D)">Identification, characterization and suppression of side-products formed during the synthesis of high dose 68Ga-DOTA-TATE.</a> Appl Radiat Isot. 76, 63-69 (2013).</li>
</ol>

Gli autori non hanno partnership commerciali o fonti di finanziamento che comportino un conflitto di interessi reale o percepito relativo a questo lavoro da divulgare.

Questo lavoro descrive la produzione affidabile e ad alto rendimento di [68Ga]Ga-FAPI-46 sul sintetizzatore MS per applicazioni cliniche. Il workup preliminare di questo protocollo ha testato, nella stessa serie di esperimenti, diversi tempi di reazione per la sintesi di [68Ga]Ga-FAPI-46 e quattro diverse cartucce SPE per la purificazione del prodotto finale. Al fine di (i) ridurre la dose di radiazioni per l'operatore e (ii) ricreare le condizioni in cui la produzione di routine di [68Ga]Ga-FAPI-46 sarebbe stata sviluppata, questi esperimenti preliminari sono stati condotti anche utilizzando il sintetizzatore MS ove possibile. Una sequenza [68Ga]Ga-FAPI-46 è stata creata utilizzando parametri simili utilizzati per la produzione di [68Ga]Ga-PSMA-11 e [68Ga]Ga-DOTA-TATE. La sequenza si basa su una semplice programmazione graduale in un foglio di calcolo Excel e può essere facilmente modificata. I kit e i reagenti sono stati assemblati solo per la prima parte della sintesi di [68Ga]Ga-FAPI-46 (eluizione e purificazione 68Ga; reazione di marcatura), omettendo le fasi finali (purificazione SPE e filtrazione sterile finale) poiché questi esperimenti preliminari sono stati eseguiti manualmente sul materiale grezzo. Di conseguenza, non è stato necessario installare la cartuccia SPE post-purificazione (Strata X 60 mg), nonché le fiale di etanolo, acqua e soluzione salina sul collettore 4 e la fiala del prodotto finale.
La letteratura pubblicata sulla produzione di [68Ga]Ga-FAPI-46 descrive la purificazione del prodotto finale utilizzando diverse cartucce SPE: OASIS HLB 30 mg sorbente23,29, OASIS HLB Plus 225 mg28, CM26,34, C18 Plus Sep-Pak30,32 e Sep-Pak Light C1831. Questo lavoro mette a confronto tre delle diverse cartucce SPE utilizzate in letteratura (HLB 30 mg; C18 SepPak Plus Short e HLB 225 mg) con lo Strata X 60 mg fornito con le nostre cassette esistenti per la purificazione di [68Ga]Ga-PSMA-11 e [68Ga]Ga-DOTA-TATE. Per quanto ne sappiamo, la cartuccia di SPE Strata X 60 mg non era ancora stata valutata per la purificazione con [68Ga]Ga-FAPI-46. Gli strati X 60 mg hanno mostrato risultati simili (HLB 30 mg; C18 SepPak Plus Short) o prestazioni migliori (HLB 225 mg) rispetto ad altri SPE utilizzati in letteratura per la purificazione di [68Ga]Ga-FAPI-46, per quanto riguarda l'efficienza di intrappolamento ed eluizione (Tabella 3). L'eluizione di HLB 225 mg con un millilitro in più di etanolo non ha portato a un miglioramento significativo (risultati non mostrati). La cartuccia Strata X 60 mg è stata selezionata per la convalida della sintesi completamente automatizzata descritta in questo protocollo.
La sintesi automatizzata di [68Ga]Ga-FAPI-46 delineata nel protocollo di cui sopra può essere descritta in quattro fasi principali. La prima fase è l'eluizione di uno o due generatori da 68Ge/68Ga con 0,1 M di HCl e il successivo intrappolamento di [68Ga]GaCl3 sulla cartuccia a scambio ionico. Segue l'eluizione di [68Ga]Ga3+ dalla cartuccia a scambio ionico nel recipiente di reazione (precaricata con la soluzione precursore contenente 50 μg di precursore FAPI-46, 1,4 mL di acqua contenente tracce di concentrazione di metallo e 7 mg di acido ascorbico) utilizzando una soluzione acidificata di cloruro di sodio 5 M. Il pH della reazione di marcatura è 3,5-4. Il passo successivo è la reazione di radiomarcatura, durante la quale il reattore viene riscaldato a 95 °C per 10 minuti per consentire la complessazione del [68Ga]Ga3+ da parte della porzione DOTA del precursore FAPI-46. Dopo il raffreddamento della miscela di reazione a 40 °C, la quarta e ultima fase consiste nella purificazione di [68Ga]Ga-FAPI-46 che consiste i) nell'intrappolamento e nella purificazione della miscela di reazione sulla cartuccia di Strata X 60 mg SPE post-purificazione, ii) nel risciacquo della cartuccia di Strata X 60 mg SPE con acqua per preparazioni iniettabili, iii) eluizione del prodotto finale con etanolo, iv) diluizione con soluzione fisiologica per preparazioni iniettabili e v) trasferimento nel flacone del prodotto finale attraverso un filtro sterilizzante con sfiato da 0,22 μm. La reazione può essere monitorata in tempo reale mediante ispezione visiva e letture dei sensori (ad esempio, temperatura, pressione, vuoto, lettura delle radiazioni e timer per il conto alla rovescia). Uno screenshot rappresentativo dell'interfaccia utente è mostrato nella Figura 1A, B. Il profilo di radioattività mostrato nella Figura 2 è particolarmente utile per monitorare l'andamento della sintesi visualizzando il trasferimento di radioattività attraverso le fasi critiche sopra descritte.
Sono state eseguite sei esecuzioni di convalida che hanno superato tutte le specifiche del controllo di qualità, utilizzando uno o due generatori da 68Ge/68Ga (2,41 GBq). Tre cicli sono stati completati utilizzando 68Ga da una singola eluizione del generatore, producendo 0,59-0,63 GBq di [68Ga]Ga-FAPI-46. Tre cicli sono stati completati utilizzando 68Ga eluito da due generatori, producendo 1,54-1,71 GBq di [68Ga]Ga-FAPI-46. Ogni corsa è stata completata in ~25 minuti. Il metodo del generatore singolo è stato progettato anticipando la necessità di produrre attività più elevate in futuro. Di conseguenza, 7 mg di stabilizzante dell'acido ascorbico sono stati aggiunti alla miscela di reazione per evitare la radiolisi durante la fase di radiomarcatura, come descritto in precedenza da Mu et al. per la produzione di [68Ga]Ga-DOTA-TATE41. Da Pieve et al.29 e Alfteimi et al.30 hanno anche riportato l'aggiunta di 0,3 mg di stabilizzante di acido ascorbico alla miscela di reazione per la produzione automatizzata di [68Ga]Ga-FAPI-46 (Supplemental Table S1-Supplemental File 1). Infatti, abbiamo osservato una radiolisi significativa per una sintesi ad alta attività (~2.8 GBq nel reattore) quando lo stabilizzante dell'acido ascorbico è stato omesso dalla miscela di reazione (Figura S3-File 1). Inoltre, per evitare la radiolisi del prodotto finale, 5 mg di ascorbato di sodio in 1 ml di soluzione fisiologica iniettabile allo 0,9% sono stati aggiunti manualmente al flaconcino del prodotto finale attraverso il filtro sterilizzante, ottenendo un volume del prodotto finale di 11 ml. Ogni lotto è stato testato fino a 3 ore dopo la produzione e sia la produzione a bassa attività (eluizione a generatore singolo) che quella ad alta attività (eluizione a doppio generatore) hanno dimostrato un'eccellente stabilità radiochimica (>95% mediante HPLC e TLC). È importante sottolineare che l'attuazione di questo protocollo comporta la manipolazione di materiali radioattivi non sigillati e dovrebbe essere intrapresa solo da personale adeguatamente formato. Il protocollo deve essere eseguito dietro una schermatura dalle radiazioni, preferibilmente all'interno di una cella calda ventilata. Lo scopo atteso della sintesi di [68Ga]Ga-FAPI-46 utilizzando questo protocollo è la somministrazione ai pazienti per l'imaging diagnostico. Pertanto, è necessario seguire rigorosamente le tecniche asettiche. I test di controllo della qualità di [68Ga]Ga-FAPI-46 come descritto nel protocollo di cui sopra sono fondamentali per garantire la qualità del prodotto finale.
Si prevede che qualsiasi sito di produzione di [68Ga]Ga-PSMA-11 o [68Ga]Ga-DOTA-TATE sul sintetizzatore MS dovrebbe essere completamente attrezzato per preparare [68Ga]Ga-FAPI-46 utilizzando il protocollo qui descritto, con solo piccole modifiche richieste per l'uso di generatori o reagenti alternativi. A causa della crescente domanda di [68Ga]Ga-FAPI-46 nelle cliniche, il lavoro qui presentato è stato progettato per soddisfare le varie esigenze e capacità del sito, dalla produzione di dosi di 1-2 pazienti di [68Ga]Ga-FAPI-46 per sintesi con il metodo a generatore singolo e fino a 4-5 pazienti per sintesi con il metodo a doppio generatore, a seconda della disponibilità di telecamere PET.

La proteina di attivazione dei fibroblasti (FAP) è diventata un obiettivo importante per l'imaging e la terapia del cancro1,2. La FAP è un marcatore specifico dei fibroblasti associati al cancro (CAF), un tipo di cellula stromale che costituisce gran parte del microambiente dei tumori solidi. I CAF svolgono un ruolo chiave nella crescita, nell'invasione e nella metastasi del tumore3. Si trovano nella maggior parte dei tumori solidi, inclusi i tumori della mammella, della prostata e del pancreas1. Prendendo di mira la FAP con inibitori di piccole molecole marcati con radionuclidi diagnostici o terapeutici, è possibile ottenere l'imaging e la terapia selettiva non invasiva di questi tumori4,5,6. Le molecole inibitrici della FAP (FAPI) come FAPI-02, FAPI-04, FAPI-46 e FAPI-74 marcate con 68Ga e 18F rappresentano una classe di agenti mirati alla FAP a base di chinolina che sono stati sviluppati dai team dell'Ospedale Universitario di Heidelberg e del Centro tedesco per la ricerca sul cancro (DKFZ), Germania7,8,9,10,11, attingendo a lavori precedenti che identificano l'impalcatura altamente promettente di N-(4-chinolinoil)-glicil-(2-cianopirrolidina) per l'inibizione della FAP12,13. Più recentemente, inibitori ciclici dei peptidi FAP come FAP-228614 e 3BP-394015 sono stati sviluppati sia per l'imaging che per la terapia.
[68Ga]Ga-FAPI-04 ha dimostrato l'assorbimento in 28 diversi tipi di cancro, tra cui il cancro al seno, ai polmoni, alla prostata, al pancreas e al colon-retto16. Oltre al vantaggio pratico di non richiedere il digiuno e il riposo9, FAPI-PET ha mostrato un vantaggio diagnostico rispetto (o un ruolo complementare con) FDG-PET, come nel cancro gastrointestinale, mammario, ovarico e epatico, nelle metastasi cerebrali del cancro del polmone17 e nei casi in cui i risultati FDG sono inconcludenti18. 68La FAPI marcata con Ga ha anche mostrato alcune interessanti applicazioni non oncologiche nelle malattie infiammatorie immuno-correlate, come la fibrosi e l'artrite reumatoide19,20. Il [68Ga]Ga-FAPI-46 presentato più di recente, una variante di [68Ga]Ga-FAPI-04, che ha un legame con l'acido tetraacetico dodecano modificato (DOTA), mostra proprietà farmacocinetiche migliorate e una migliore ritenzione del tumore, con conseguenti immagini a contrasto più elevato rispetto a quelle ottenute utilizzando [68Ga]Ga-FAPI-02 o [68Ga]Ga-FAPI-046,10. L'uso di inibitori FAP marcati per la diagnosi e il trattamento è soggetto a brevetto internazionale21 e l'uso di [68Ga]Ga-FAPI-46 è attualmente concesso in licenza22.
Le preparazioni riportate di [68Ga]Ga-FAPI-46 utilizzando 68Ga prodotto da ciclotrone o 68Ga eluito da un generatore 68Ge/68Ga includono l'uso sia di protocolli manuali che di sintetizzatori automatici. È stato descritto un protocollo di etichettatura manuale per [68Ga]Ga-FAPI-46, basato su metodi precedentemente riportati per [68Ga]Ga-FAPI-02 e [68Ga]Ga-FAPI-0423,24. Sebbene l'etichettatura manuale non richieda apparecchiature specializzate, questo approccio può portare a un aumento della dose di radiazioni dell'operatore e a una potenziale variabilità all'interno della produzione25; Da qui, la necessità di automatizzare la produzione per le applicazioni cliniche di routine. Inoltre, l'uso di un sintetizzatore automatizzato è più conforme alle normative internazionali GMP. La preparazione di [68Ga]Ga-FAPI-46 è stata sviluppata su una varietà di sintetizzatori commerciali, utilizzando 68Ga da diversi generatori26,27,28,29,30,31,32,33 o ciclotrone-prodotto 68Ga34. Le specifiche di questi metodi automatizzati sono riassunte nella Tabella Supplementare S1 (File Supplementare 1). Negli ultimi anni sono stati pubblicati anche metodi di sintesi automatizzati per altri inibitori FAP marcati con 68Ga e 177Lu35,36.
Presso il Sir Charles Gairdner Hospital RAPID Centre, abbiamo sviluppato e convalidato la preparazione di [68Ga]Ga-FAPI-46 sul sintetizzatore iPHASE MultiSyn (di seguito denominato sintetizzatore MS). Questo sintetizzatore viene utilizzato abitualmente nel nostro laboratorio, così come in altri impianti di produzione in Australia per la preparazione di radiofarmaci marcati con 68Ga, 177Lu e 89Zr37,38,39. Il sintetizzatore MS viene utilizzato scaricando un elenco di passaggi di sequenza Excel nella sua memoria interna. Questo elenco di passaggi di sequenza è facile da usare e facilmente modificabile. Inoltre, il sintetizzatore consente interventi a metà produzione come la ripetizione dei passaggi, il ritorno ai passaggi precedenti, il salto dei passaggi e la pausa della produzione quando necessario. È dotato di rivelatori di radiazioni collocati in posizioni strategiche, che consentono all'utente di monitorare il processo produttivo in tempo reale. Il sintetizzatore MS è compatibile con tutti i generatori commerciali da 68Ga e consente l'eluizione di un generatore singolo o doppio. La procedura descritta in questo lavoro utilizza 68Ga da uno o due generatori di 68Ge/68Ga e prevede sia la prepurificazione di 68Ga che la postpurificazione del prodotto finale. Nell'ambito di questo studio sono stati valutati anche il tempo di reazione ottimale e il confronto delle prestazioni di tre diversi tipi di cartucce di estrazione in fase solida (SPE) post-purificazione con quella fornita nella cassetta del fornitore.

<table><tbody><tr><td>0,1 M Acido cloridrico (HCl) ultra puro</td><td>ABX composto biochimico avanzato (Radberg, Germania)</td><td>HCl-103-G</td><td>Utilizzato per l'eluizione del generatore Acetato</td></tr><tr><td>di ammonio</td><td>Sigma Aldrich Pty Ltd (NSW, Australia)</td><td>A1542-250G</td><td>Utilizzato per realizzare iTLC in fase mobile</td></tr><tr><td>C18 SepPak Plus corto (360 mg)</td><td>Acque</td><td>WAT020515</td><td>Silice post-purificazione SPE</td></tr><tr><td>Chromolith Performance RP-18 endcapped 100-4.6 monolitico</td><td>Merck Pty Ltd (Victoria (Australia)</td><td>1021290001</td><td>Colonna HPLC RP-18 endcapped , utilizzata per il controllo qualità HPLC</td></tr><tr><td>Calibratore di dose</td><td>Capintec</td><td>CRC-15PET</td><td>Utilizzato per calibrare e misurare l'attività 68Ga</td></tr><tr><td>Doppia scansione-RAM&nbsp;</td><td>LabLogic Limited (VA, USA)</td><td>SR-1A</td><td>Scanner radio-TLC per l'analisi del precursore della carta iTLC</td></tr><tr><td>FAPI-46 (GMP)</td><td>Composto biochimico avanzato ABX (Radberg, Germania)</td><td>3601.0000.050</td><td>Precursore peptidico</td></tr><tr><td>Facilità di riempimento Fiala sottovuoto sterile (10 mL)</td><td>Iosotopi HUAYI</td><td>SVV-10C</td><td>Utilizzato per campioni di sterilità e ritenzione</td></tr><tr><td>Facilità di riempimento Fiala sottovuoto sterile (25 mL)</td><td>Iosotopi</td> <td>HUAYISVV-25A</td><td>Utilizzato per</td></tr><tr><td>la radiomarcatura del peptide Ga68 del prodotto finale con pre-purificazione del generatore</td><td>iPHASE Technologies (Melbourne, Australia)</td><td>MSR-120G-(RK-3296)</td><td>Set di reagenti&nbsp;</td></tr><tr><td>Radiomarcatura Ga68 con prepurificazione del generatore</td><td>iPHASE Technologies (Melbourne, Australia)</td><td>MSH-120</td><td>Set cassetta hardware + accessori&nbsp;</td></tr><tr><td>Sistema di gascromatografia (GC)</td><td>Agilent technologies (Vic, Australia)</td><td>G2630A</td><td>Utilizzato per misurare il solvente residuo</td></tr><tr><td>GS Sorgente standard (Ba133)</td><td>Global Medical Solutions Pty Ltd (Australia)</td><td>D-102-19</td><td>Utilizzato per calibrare lo spettrometro Gamma GS</td></tr><tr><td>Sorgente standard (Co60)</td><td>Global Medical Solutions Pty Ltd (Australia)</td><td>1559-84</td><td>Utilizzato per calibrare lo spettrometro gamma</td></tr><tr><td>Sistema di cromatografia liquida ad alte prestazioni (HPLC)</td><td>Shimadzu Scientific Instruments (NSW, Australia)</td><td>Attrezzatura LC-20</td><td>HPLC</td></tr><tr><td>Ago di sfiato dell'aria idrofobico</td><td>Baldwin Medical (Victoria, australia)</td><td>1088</td><td>Utilizzato con la fiala del prodotto finale</td></tr><tr><td>&nbsp; IGG100&nbsp;</td><td>Eckert & Prodotti isotopici Ziegler&nbsp; (Berlino, Germania)</td><td>IGG100-65M-NT</td><td>68Ge/68Ga</td></tr><tr><td>generatore Siringa da 5 mL (siringa Injekt luer lock solo)</td><td>B Braun (Melsungen, Germania)</td><td>4606710V</td><td>Siringhe in polipropilene (PP)/polietilene (PE), prive di lattice, PVC e silicone siringa senza olio utilizzata per reagenti</td></tr><tr><td>carta iTLC-SG</td><td>Tecnologie Agilent (Vic, Australia)</td><td>SGI0001</td><td>Utilizzato per l'analisi iTLC</td></tr><tr><td>Software LabLogic (LAURA)</td><td>LabLogic Limited (VA, USA)</td><td>Software LAURA versione 6.1</td><td>Utilizzato per l'analisi radio-TLC</td></tr><tr><td>Acido L-ascorbico Selezione tracce</td><td>Fluka Sigma</td><td>05878-100G</td><td>Utilizzato come scavenger di radicali nella miscela di reazione</td></tr><tr><td>Lichrosolv Acetonitrile (ACN)</td><td>Sigma Aldrich Pty Ltd (NSW, Australia)</td><td>1.00030.2500</td><td>Utilizzato per produrre HPLC organico in fase mobile</td></tr><tr><td>Lichrosolv Water</td><td>Sigma Aldrich Pty Ltd (NSW, Australia)</td><td>1.15333.2500</td><td>Utilizzato per produrre HPLC in fase mobile acquosa</td></tr><tr><td>Metanolo (MeOH)</td><td>Sigma Aldrich Pty Ltd (NSW, Australia)</td><td>1060182500</td><td>Utilizzato per produrre rivelatore di < in fase mobile iTLC</td></tr><tr><td>Nasup>+I-</td><td>LabLogic Limited (VA, USA)</td><td>1"NaI / PMT</td><td>Radiorivelatore utilizzato per radio-HPLC</td></tr><tr><td>Oasis HLB (30 mg)</td><td>Acque (Milford, MA, USA)</td><td>WAT094225</td><td>Copolimero post-purificazione SPE</td></tr><tr><td>Oasis HLB Plus corto (225 mg)</td><td>Waters (Milford, MA, USA)</td><td>186000132</td><td>Copolimero post-purificazione SPE</td></tr><tr><td>Strisce pH</td><td>Thermo Fisher Scientific Australia Tty Ltd</td><td>90424</td><td>Utilizzato per misurare il pH del prodotto</td></tr><tr><td>Rivelatore PS&nbsp;</td><td>LabLogic Limited (VA, USA)</td><td>Radiorivelatore PS plastico/PMT</td><td>utilizzato per radio-TLC</td></tr><tr><td>&nbsp; Tubo Safe Lock (1,5 mL)</td><td>Eppendorf</td><td>0030 120.086</td><td>Utilizzato per campioni di controllo qualità</td></tr> <tr><td>(+)-Sodio L-ascorbato</td><td>Merck Pty Ltd (Victoria (Australia)</td><td>11140-250G</td><td>Stabilizzante del prodotto finale</td></tr><tr><td>Soluzione di cloruro di sodio (NaCl) (soluzione salina)</td><td>Pfizer</td><td>PS111</td><td>0,9%, per iniezione, grado USP</td></tr><tr><td>Sterican 100 Aghi</td><td>B Braun (Melsungen, Germania)</td><td>4667093</td><td>Utilizzato per prodotto finale</td></tr><tr><td>Filtro per siringa sterile (0,22 & micro; m)</td><td>Millipore Sigma (Burlington, MA, USA)</td><td>SLGSV255F</td><td>Millex-GV</td></tr><tr><td>Strata SCX (nel kit cassetta hardware)</td><td>Kit hardware interno Phenomenex di iPHASE Technologies (Melbourne, Australia)</td><td>MSH-120</td><td>Prepurificazione silice SPE all'interno Cassetta</td></tr><tr><td>hardware Strata X (nel kit cassetta hardware)</td><td>Kit hardware interno Phenomenex di iPHASE Technologies (Melbourne, Australia)</td><td>MSH-120</td><td>Postpurificazione silice SPE all'interno dell'hardware Cassetta</td></tr><tr><td>Trace Select Acqua per l'analisi delle tracce</td><td>Honeywell Riedel-de-Haen</td><td>95305-2.5L</td><td>Utilizzato per la miscela di reazione e per precondizionare la cartuccia SPE di prepurificazione</td></tr><tr><td>Acido trifluoracetico (TFA)</td><td>Sigma Aldrich Pty Ltd (NSW, Australia)</td><td>302031-10X1mL</td> Utilizzato per realizzare la siringa da insulina <td>HPLC acquosa in fase mobile</td></tr><tr><td>Ultra Fine (0,5 mL)</td><td>BD</td><td>326769</td><td>Utilizzato per l'erogazione di campioni di controllo qualità</td></tr><tr><td>Filtro ventilato Cathivex-GV 0,22 &; m, membrana Durapore PVDF a basso legame proteico</td><td>Merk Millipore (Cork, Irlanda)</td><td>SLGV02505</td><td>Utilizzato per filtrare il prodotto finale</td></tr></tbody></table>

una radiosintesi automatizzata di [68ga]ga-fapi-46 per uso clinico di routine

An Automated Radiosynthesis of [68Ga]Ga-FAPI-46 for Routine Clinical Use

[68Ga]Ga-FAPI-46 è un nuovo promettente tracciante per l'imaging della proteina di attivazione dei fibroblasti (FAP) mediante tomografia a emissione di positroni (PET). Gli inibitori marcati della FAP (FAPI) hanno dimostrato l'assorbimento in vari tipi di cancro, tra cui il cancro al seno, ai polmoni, alla prostata, al pancreas e al colon-retto. La FAPI-PET possiede anche un vantaggio pratico rispetto alla FDG-PET, in quanto non sono necessari il digiuno e il riposo. [68Ga]Ga-FAPI-46 presenta proprietà farmacocinetiche migliorate, una migliore ritenzione tumorale e immagini con un contrasto più elevato rispetto ai [68Ga]Ga-FAPI-02 e [68Ga]Ga-FAPI-04 presentati in precedenza. Sebbene sia stato inizialmente descritto un protocollo di sintesi manuale per [68Ga]Ga-FAPI-46, negli ultimi anni sono stati riportati metodi automatizzati che utilizzano diversi sintetizzatori commerciali.
In questo lavoro, descriviamo lo sviluppo della sintesi automatizzata di [68Ga]Ga-FAPI-46 utilizzando il sintetizzatore iPHASE MultiSyn per applicazioni cliniche. Inizialmente, sono stati studiati l'ottimizzazione del tempo di reazione e il confronto delle prestazioni di quattro diverse cartucce di estrazione in fase solida (SPE) per la purificazione del prodotto finale. Quindi, lo sviluppo e la convalida della produzione di 0,6-1,7 GBq di [68Ga]Ga-FAPI-46 sono stati condotti utilizzando questi parametri ottimizzati. Il prodotto è stato sintetizzato in 89,8 ± resa corretta per il decadimento del 4,8% (n = 6) in 25 minuti. Il prodotto finale ha soddisfatto tutte le specifiche di controllo qualità raccomandate ed è rimasto stabile fino a 3 ore dopo la sintesi.

L'efficienza di marcatura radioattiva valutata tra 5 e 20 min di reazione a 95 °C è riportata nella Tabella 2. Le cartucce per SPE post-purificazione HLB 30 mg, Strata X 60 mg e Sep-Pak C18 Plus Short 360 mg hanno mostrato rese molto simili (94,3 ± 0,5% corrette per decadimento [DC]) (Tabella 3). Nella nostra esperienza, la resa ottenuta con la cartuccia HLB 225 mg è risultata molto più bassa (63,8 ± 3,5% DC).
Tabella 2: Sintesi della conversione radiochimica della reazione grezza misurata mediante TLC dopo 5, 10, 15 e 20 minuti di tempo di reazione (n = 3). Abbreviazioni: TLC = cromatografia su strato sottile; Esp. = esperimento. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66708/66708_Table%202_Summary%20of%20the%20radiochemical...xlsx" target="_blank">Cliccare qui per scaricare questa tabella.</a>
Tabella 3: Sintesi delle analisi del % di recupero e della purezza radiochimica mediante TLC e HPLC di [68Ga]Ga-FAPI-46 al termine della sintesi (EOS), utilizzando quattro diverse cartucce per l'estrazione in fase solida (n = 3). Abbreviazioni: SPE = estrazione in fase solida; FAPI = inibitore della proteina attivatrice dei fibroblasti; EOS = fine della sintesi; RSD = deviazione standard relativa; TLC = cromatografia su strato sottile; HPLC = cromatografia liquida ad alte prestazioni. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66708/66708_Table%203.zip" target="_blank">Cliccare qui per scaricare questa tabella.</a>
Il protocollo automatizzato per la produzione di [68Ga]Ga-FAPI-46 è stato sviluppato utilizzando un tempo di reazione di 10 minuti e una cartuccia per estrazione in fase solida (SPE) Strata X da 60 mg. Sono state effettuate due serie di tre lotti di validazione, utilizzando rispettivamente un'eluzione singola e doppia del generatore, ottenendo attività medie finali del prodotto di 0,60 GBq e 1,6 GBqTabella 4). In entrambe le serie, la concentrazione finale [68Il prodotto Ga]Ga-FAPI-46 ha superato tutti i test di controllo qualità (Tabella 4). La stabilità del [68Il prodotto [⁶⁸Ga]Ga-FAPI-46 è stato valutato mediante la determinazione della purezza radiochimica del prodotto mediante analisi TLC e HPLC (Figura 3 e Figura 4) per tutte e sei le produzioni fino a 3 h post sintesi ed era maggiore del 98,0 ± 1,8% (n = 3) e del 99,1 ± 0,9% (n = 3), rispettivamente. Complessivamente, la sintesi di [68Ga]Ga-FAPI-46 è stato convalidato con una resa corretta per decadimento del 89,8 ± 4,8% (n = 6). La produzione automatizzata è attualmente utilizzata per la produzione di [68Ga]Ga-FAPI-46 per supportare studi clinici.
Tabella 4: Sintesi dei risultati del controllo qualità per le prove di validazione di [68Ga]Ga-FAPI-46 (n = 6): a bassa attività da una singola eluizione del generatore (n = 3) e ad alta attività da una doppia eluizione del generatore (n = 3). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66708/Table%204_Summary%20of%20the%20QC..._Revision%202.xlsx" target="_blank">Cliccare qui per scaricare questa tabella.</a>
<img alt="Grafico dell'attività radioattiva in funzione della distanza per composti di \[^{68}\text{Ga}\]; risultati della separazione cromatografica." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66708/66708fig03.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Figure 3"> 
Figura 3: Cromatogramma TLC di [68Ga]Ga-FAPI-46: (Applicazione di 5 µL) all'EOS utilizzando carta iTLC-SG e una fase mobile di acetato di ammonio 1 M/metanolo (1:1 v/v). L'attività radioattiva è stata misurata mediante uno scanner radio-TLC dotato di un rivelatore PS Plastic per radiazioni, con integrazione ogni 1 mm a una velocità di 1 mm/s. Abbreviazioni: TLC = cromatografia su strato sottile; FAPI = inibitore della proteina attivatrice dei fibroblasti; EOS = fine della sintesi; iTLC-SG = cromatografia TLC istantanea su gel di silice. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66708/66708fig03large.jpg" target="_blank">Cliccare qui per visualizzare una versione ingrandita di questa figura.</a>
<img alt="Grafico della cromatografia; rilevazione UV e radioattiva di Ga-FAPI-46; intensità del picco rispetto al tempo." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66708/66708fig04.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Figure 4"> 
Figura 4: Analisi HPLC del prodotto finale [68Ga]Ga-FAPI-46. Colonna HPLC RP-18 incapsulata, fase mobile A: acido trifluoroacetico 0,1%, fase mobile B: acetonitrile puro. Gradiente: 0-0,5 min 2% B, 0,5-10,0 min 2%-35% B, 10,0-12,0 min 35% B e 12,0-15,0 min 35% B. La lunghezza d'onda UV era di 280 nm e la portata di 2 mL/min. (A) Cromatogramma UV del prodotto [68Ga]Ga-FAPI-46, che include il segnale UV dell'ascorbato di sodio a 1,0 min e i due picchi minori a 4,5 e 4,8 min corrispondenti rispettivamente a [natGa]Ga-FAPI-46 e al precursore FAPI-46. I cromatogrammi UV di un campione standard di [natGa]Ga-FAPI-46 a 10 mg/L e del precursore FAPI-46 a 10 mg/L sono mostrati nella Figura S2 Supplementare (File Supplementare 1). (B) Cromatogramma radioattivo di [68Ga]Ga-FAPI-46 (Rt [68Ga]Ga-FAPI-46 = 4,6 min - Rt di [68Ga]Ga3+ libero = 1,1 min). Abbreviazioni: HPLC = cromatografia liquida ad alte prestazioni; FAPI = inibitore della proteina di attivazione dei fibroblasti; Na+Asc- = ascorbato di sodio. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66708/66708fig04large.jpg" target="_blank">Cliccare qui per visualizzare una versione ingrandita di questa figura.</a>
File Supplementare 1: Questo documento contiene: Tabella Supplementare S1 - Sintesi automatizzate e dettagli di controllo qualità riportati per [68Ga]Ga-FAPI-46, Sezione Supplementare 1 - Esperimenti preliminari: Ottimizzazione del tempo di reazione e selezione della cartuccia SPE post-purificazione per la produzione automatizzata di [68Ga]Ga-FAPI-46 sul sintetizzatore radioattivo MS, Figura Supplementare S1 - Immagini dei reagenti e configurazione finale per la sintesi automatizzata di [68Ga]Ga-FAPI-46 sul sintetizzatore MS, Figura Supplementare S2 - Cromatogrammi UV di [natGa]Ga-FAPI-46 e del precursore FAPI-46, e Figura Supplementare S3 - Cromatogramma radioattivo di [68Ga]Ga-FAPI-46 per la marcatura con elevata attività (2,8 GBq) senza acido ascorbico nel reattore. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66708/66708_Supplemental%20file_Final_14052024.zip" target="_blank">Cliccare qui per scaricare questo file.</a>

Questo lavoro descrive la produzione automatizzata di fino a 1,7 GBq di [68Ga]Ga-FAPI-46 sul sintetizzatore iPHASE MultiSyn per l'imaging PET della proteina di attivazione dei fibroblasti.

Una radiosintesi automatizzata di [68Ga]Ga-FAPI-46 per uso clinico di routine

[68Ga]Ga-FAPI-46 is a promising new tracer for the imaging of fibroblast activation protein (FAP) by positron emission tomography (PET). Labeled FAP ...

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Chimica

Abbiamo dimostrato la sintesi radiochimica semiautomatica di procedure [ 18 F] 3F4AP e di controllo della qualità.

Sintesi radiochimica automatizzata di [<sup&gt; 18</sup&gt; F] 3F4AP: un nuovo tracciante PET per le malattie Demyelinating di imaging

Positrone-emissione di positroni (PET) imaging siti coinvolti in studi di ricerca clinica precoce più bisogno di capacità di produzione del radiotraccitore robusto e versatile. Utilizzando il radiotraccitore [18F] clofarabina come esempio, illustriamo come automatizzare la sintesi di un radiotraccitore utilizzando un radiosynthesizer flessibile, lettore di cassette e convalidare la sintesi per uso clinico.

Automazione di un positrone-emissione di positroni (PET) radiotraccitore sintesi protocollo per la produzione di clinica

Questo articolo descrive la radiosintesi, la formulazione, il controllo di qualità di una nuova sonda radiomarcata (ad esempio, 68nanocorpi marcati con GA NM-02) e il suo utilizzo per l'imaging PET/CT di piccoli animali in un modello di xenotrapianto.

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Questa ricerca descrive il processo automatizzato per la produzione di [68Ga]Ga-3BP-3940 con il sintetizzatore GAIA V2, per l'imaging PET della proteina di attivazione dei fibroblasti. Vengono inoltre presentati i risultati dei test di controllo qualità eseguiti su tre lotti di prova.

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Questo video illustrerà un metodo rapido e efficiente per metacrilato poli (glicole etilenico), consentendo polimerizzazioni a catena e sintesi idrogel. Si dimostrerà come introdurre in modo simile funzionalità metacrilammide in peptidi, dettaglio metodi analitici comuni per valutare l'efficienza funzionalizzazione, fornire suggerimenti per la risoluzione dei problemi e le modifiche avanzate, e dimostrare le tecniche tipiche di caratterizzazione idrogel.

Forno a microonde assistita Funzionalizzazione di poli (etilene glicole) e On-resina Peptidi per l&#39;uso a polimerizzazione a catena ed idrogel Formazione

Grazie alla sua emivita radioattiva di più giorni e alle favorevoli proprietà di decadimento, il radiometallo emettitore dipositroni 89 Zr è estremamente adatto per l'uso in radiofarmaci basati su anticorpi per l'imaging PET. In questo protocollo, verranno descritte la bioconiugazione, la radiosintesi e l'applicazione preclinica di 89anticorpi marcati con Zr.

Il bioconjugation e radiosintesi di<sup&gt; 89</sup&gt; Anticorpi Zr-DFO-etichettati

I protocolli presentati descrivono due tecniche basate su enzimoimmunosaggio (ELISA) per l'indagine rapida delle interazioni ligando-recettore: Il primo dosaggio permette la determinazione della costante di dissociazione tra ligando e recettore. Il secondo dosaggio consente una rapida analisi di screening dei peptidi di bloccaggio per le interazioni ligando-recettore.

Un ELISA Based rilegatura e metodo concorrenza di determinare con rapidità interazioni ligando-recettore

La spettrometria di massa consente un'analisi ad alta sensibilità, rapida e non invasiva dei composti organici volatili. Per dimostrare il suo potenziale, forniamo tre esempi: fermentazione dell'acido lattico dello yogurt (monitoraggio on-line del bioprocesso), diversi genotipi di mela (screening su larga scala) e spazio retronasale dopo aver bevuto caffè (analisi dello spazio nasale).

PTR-ToF-MS accoppiato con un sistema di campionamento automatizzato e analisi dei dati su misura per gli studi alimentari: monitoraggio del bioprocesso, screening e analisi dello spazio del naso

La moderna diffrazione di polvere a raggi X ad alta risoluzione (XRPD) in laboratorio viene utilizzata come strumento efficiente per determinare le strutture cristalline di prodotti di corrosione noti da tempo su oggetti storici.

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Scopri la sintesi automatizzata del tracciante PET [68Ga]Ga-FAPI-46 con il sintetizzatore iPHASE MultiSyn per l'imaging oncologico. Questo metodo GMP riduce il rischio radiologico e migliora la produzione clinica.

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