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DOI: 10.3791/66735-v
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Viene descritta una strategia di preparazione del campione per l'imaging di embrioni precoci di zebrafish all'interno di un corion intatto utilizzando un microscopio a foglio luminoso. Analizza i diversi orientamenti che gli embrioni acquisiscono all'interno del corion al 70% degli stadi di epibolia e gemma e descrive in dettaglio le strategie di imaging per ottenere una risoluzione su scala cellulare in tutto l'embrione utilizzando il sistema light-sheet.
Nonostante le asimmetrie interne lungo l'asse sinistra-destra, nella maggior parte degli organismi superiori, le strutture esterne come lo scheletro e il muscolo si sviluppano in modo simmetrico. Utilizzando embrioni di zebrafish, combiniamo immagini dal vivo ad alta risoluzione, analisi quantitativa e modellazione teorica per studiare i principi di creazione della simmetria. Il campo dipende fortemente da varie tecniche di microscopia per l'imaging di embrioni in via di sviluppo con un'elevata risoluzione spazio-temporale, seguita dall'analisi quantitativa delle immagini acquisite.
Diverse forme di microscopia offrono vantaggi unici. Tuttavia, negli ultimi tempi, la microscopia a foglio luminoso e la microscopia a super risoluzione dal vivo hanno fatto progredire significativamente la nostra visione dei processi dinamici nello sviluppo embrionale. La microscopia confocale e multifotonica tradizionale spesso porta al fotosbiancamento e alla fototossicità, oltre a un campo visivo limitato durante l'imaging di embrioni vivi.
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