Name: Misurazione del contenuto di carbonio nei macrofagi delle vie aeree esposti a particelle contenenti carbonio (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-07-12T14:15:00.000+00:00
Duration: 5 min 18 s
Description: Scopri un metodo non invasivo per misurare il contenuto di carbonio nei macrofagi delle vie aeree come biomarcatore di esposizione a particelle inquinanti. Questa tecnica consente valutazioni accurate dell'esposizione individuale su larga scala.

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<meta charset="utf8"></head><body>Quantificazione del carbonio nei macrofagi polmonari tramite l'analisi dell'espettorato indotto

<ol><li>Münzel, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Environmental+stressors+and+cardio-metabolic+disease%3A+part+I-epidemiologic+evidence+supporting+a+role+for+noise+and+air+pollution+and+effects+of+mitigation+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Heart+J%22%5BJournal%5D)">Environmental stressors and cardio-metabolic disease: part I-epidemiologic evidence supporting a role for noise and air pollution and effects of mitigation strategies.</a> Eur Heart J. 38 (8), 550-556 (2017).</li>
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<li>Bai, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+DNA+content+in+blood+and+carbon+load+in+airway+macrophages.+A+panel+study+in+elderly+subjects%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Int%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial DNA content in blood and carbon load in airway macrophages. A panel study in elderly subjects.</a> Environ Int. 119, 47-53 (2018).</li>
<li>Jary, H., Rylance, J., Patel, L., Gordon, S. B., Mortimer, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+methods+for+the+analysis+of+airway+macrophage+particulate+load+from+induced+sputum%2C+a+potential+biomarker+of+air+pollution+exposure%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Pulm+Med%22%5BJournal%5D)">Comparison of methods for the analysis of airway macrophage particulate load from induced sputum, a potential biomarker of air pollution exposure.</a> BMC Pulm Med. 15, 1-9 (2015).</li>
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<li>Dai, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+occupational+exposure+to+carbon+black+on+peripheral+white+blood+cell+counts+and+lymphocyte+subsets%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Mol+Mutagen%22%5BJournal%5D)">Effects of occupational exposure to carbon black on peripheral white blood cell counts and lymphocyte subsets.</a> Environ Mol Mutagen. 57 (8), 615-622 (2016).</li>
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</ol>

<table><tbody><tr><td>Paillettes sterili da 3 ml</td><td>Shanghai YEASEN Biotechnology Co., LTD</td><td>84202ES03</td><td></td></tr><tr><td>Provetta da centrifuga da 50 ml</td><td>Thermo Fisher Scientific, USA</td><td>339652</td><td></td></tr><tr><td>Alcol etilico assoluto</td><td>Sinopharm Group Chemical Reagent Co. LTD</td><td>64-17-5</td><td></td></tr><tr><td>Olio di cedro</td><td>Shanghai McLean Biochemical Technology Co., LTD</td><td>C805296</td><td></td></tr><tr><td>Colorazione rapida con diff </td><td>soluzione Shanghai YEASEN Biotechnology Co., LTD</td><td>40748ES76</td><td></td></tr><tr><td>Ditiotreitolo</td><td>Solebo Bio Co., LTD</td><td>D8220</td><td></td></tr><tr><td>Tampone fosfato di Duchenne (DPBS)</td><td>Thermo Fisher Scientific, USA</td><td>14190144 Fotocamera per</td><td></td></tr><tr><td>microscopio</td><td>Olympus Corporation of Japan</td><td>DP72</td><td></td></tr><tr><td>Gomma d'albero neutra</td><td>Solebo Bio Co., LTD</td><td>G8590</td><td></td></tr><tr><td>Membrana filtrante in nylon 70um</td><td>BD Falcon Bioscience, USA</td><td>211755</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio ottico</td><td>Olympus Corporation of Japan</td><td>BX60</td><td></td></tr><tr><td>Polietilenglicole</td><td>Sinopharm Group Chemical Reagent Co. LTD</td><td>25322-68-3</td><td></td></tr><tr><td>Ultracentrifuga</td><td>Thermo Fisher Scientific, USA</td><td>SL40R</td><td></td></tr><tr><td>Vetrino viscoso</td><td>Jiangsu SHitAI EXPERIMENTAL Equipment Co. LTD</td><td></td><td></td>188105</tr></tbody></table>

misurazione del contenuto di carbonio nei macrofagi delle vie aeree esposti a particelle contenenti carbonio

Measuring Carbon Content in Airway Macrophages Exposed to Carbon-Containing Particulate Matters

L'espettorato, conservato e lavorato con la soluzione fissativa, ha mostrato una morfologia macrofagica intatta al microscopio ottico durante l'esame morfologico. I macrofagi mostravano nuclei cellulari chiari, rotondi o a forma di rene, facilmente colorabili. Dopo la colorazione, i nuclei cellulari apparivano bluastri-violacei, mentre il citoplasma era rosa chiaro o azzurro. Il campo microscopico ha mostrato impurità minime, il che ha facilitato una facile identificazione delle cellule. All'interno delle celle, le particelle di black carbon erano distintamente visibili in piccoli aggregati, consentendo l'analisi quantitativa delle particelle di carbonio.
Nella Figura 1 sono presentate immagini rappresentative dei macrofagi dell'espettorato, che raffigurano un numero variabile di particelle di carbonio in celle diverse. Ad esempio, la Figura 1A non mostra particelle di carbonio, mentre la Figura 1D mostra la concentrazione più alta. I valori di CCAM sono stati misurati rispettivamente come 0,00%, 2,24%, 6,64% e 34,61% per i macrofagi (A-D). Durante il processo di determinazione dei parametri CCAM, è stata condotta una valutazione quantitativa del contenuto di carbonio in ciascun macrofago per mitigare le distorsioni derivanti dalle variazioni delle dimensioni dei macrofagi e dalla sovrapposizione delle particelle di carbonio con i nuclei cellulari. Il calcolo e l'analisi della CCAM sono stati eseguiti per 50 macrofagi per soggetto dello studio, come mostrato nella Figura 2.
Lo studio ha selezionato come gruppo esposto i packer di nerofumo (CBP) di una specifica fabbrica di acetilene nerofumo e ha reclutato lavoratori delle pompe dell'acqua dagli impianti idrici locali, che non avevano alcuna esposizione professionale apparente a fattori dannosi, come gruppo di controllo (Non-CBP). I risultati presentati nella Figura 2 indicano un CCAM più elevato negli addetti al packaging del nerofumo rispetto al gruppo di controllo.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66781/66781fig01.jpg"> 
Figura 1: Immagine al microscopio ottico che mostra le particelle di carbonio all'interno dei macrofagi delle vie aeree. Il colore nero nel citoplasma rappresenta le particelle di carbonio. I pannelli (A-D) raffigurano immagini rappresentative dei macrofagi delle vie aeree, ciascuno dei quali mostra vari livelli di CCAM. I valori di CCAM per i macrofagi in (A-D) erano rispettivamente dello 0,00%, 2,24%, 6,64% e 34,61%. Il livello più alto di CCAM è stato osservato in (D). Barre di scala: 10 μm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66781/66781fig01large.jpg" target="_blank">Fare clic qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66781/66781fig02.jpg"> 
Figura 2: Livelli quantitativi di CCAM nella popolazione. Cinquanta macrofagi citoplasmaticamente intatti e ben colorati sono stati selezionati in modo casuale per l'analisi e la quantificazione per ogni soggetto dello studio. I dati sono stati analizzati utilizzando il test t di Student: *P &lt; 0,05. CBP: imballatori di nerofumo; Non CBP: gruppo di controllo. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66781/66781fig02large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>

Misurazione del contenuto di carbonio nei macrofagi delle vie aeree esposti a particelle contenenti carbonio

Pulmonary macrophages exhibit a dose-dependent pattern in phagocytizing particles. Following engulfment, these macrophages are subsequently excreted with ...

measuring-carbon-content-airway-macrophages-exposed-to-carbon

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