Name: Posizionamento periorbitale di una sonda laser Doppler per il monitoraggio del flusso sanguigno cerebrale prima dellocclusione dellarteria cerebrale media in modelli di roditori (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-11-22T13:10:00.000+00:00
Duration: 3 min 26 s
Description: Scopri il posizionamento periorbitale della sonda laser Doppler per monitorare il flusso cerebrale durante l'occlusione dell'arteria cerebrale media in roditori. Questo metodo minimamente invasivo consente valutazioni rapide e riproducibili.

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<meta charset="utf8"></head><body>Flussimetria laser Doppler periorbitale per ictus ischemico indotto da MCAO nei roditori

<ol><li>Koizumi, J., Yoshida, Y., Nakazawa, T., Ooneda, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+studies+of+ischemic+brain+edema.+I.+A+new+experimental+model+of+cerebral+embolism+in+rats+in+which+recirculation+can+be+introduced+in+the+ischemic+area%5BTitle%5D)+AND+%22Japanese+J+Stroke%22%5BJournal%5D)">Experimental studies of ischemic brain edema. I. A new experimental model of cerebral embolism in rats in which recirculation can be introduced in the ischemic area.</a> Japanese J Stroke. 20 (1), 84-91 (1986).</li>
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<li>Dirnagl, U., Kaplan, B., Jacewicz, M., Pulsinelli, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Continuous+measurement+of+cerebral+cortical+blood+flow+by+laser-Doppler+flowmetry+in+a+rat+stroke+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Continuous measurement of cerebral cortical blood flow by laser-Doppler flowmetry in a rat stroke model.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 9 (5), 589-596 (1989).</li>
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<li>Ingberg, E., Dock, H., Theodorsson, E., Theodorsson, A., Ström, J. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+laser+Doppler+flowmetry+and+occlusion+time+on+outcome+variability+and+mortality+in+rat+middle+cerebral+artery+occlusion%3A+inconclusive+results%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Effect of laser Doppler flowmetry and occlusion time on outcome variability and mortality in rat middle cerebral artery occlusion: inconclusive results.</a> BMC Neurosci. 19 (1), 24(2018).</li>
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<li>Watcharotayangul, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Post-ischemic+vascular+adhesion+protein-1+inhibition+provides+neuroprotection+in+a+rat+temporary+middle+cerebral+artery+occlusion+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurochem%22%5BJournal%5D)">Post-ischemic vascular adhesion protein-1 inhibition provides neuroprotection in a rat temporary middle cerebral artery occlusion model.</a> J Neurochem. 123 Suppl 2 (Suppl 2), 116-124 (2012).</li>
<li>Beretta, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimized+system+for+cerebral+perfusion+monitoring+in+the+rat+stroke+model+of+intraluminal+middle+cerebral+artery+occlusion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Optimized system for cerebral perfusion monitoring in the rat stroke model of intraluminal middle cerebral artery occlusion.</a> J Vis Exp. (72), e50214(2013).</li>
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<li>Ingberg, E., Dock, H., Theodorsson, E., Theodorsson, A., Ström, J. O. Method parameters' impact on mortality and variability in mouse stroke experiments: a meta-analysis. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aIngberg%2C+E+%22Sci+Rep%22">Sci Rep</a>. 6, (2016).</li>
<li>Morais, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Embracing+heterogeneity+in+the+multicenter+stroke+preclinical+assessment+network+%28SPAN%29+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Embracing heterogeneity in the multicenter stroke preclinical assessment network (SPAN) trial.</a> Stroke. 54 (2), 620-631 (2023).</li>
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</ol>

<a href="https://app.jove.com/t/6629">This corrects</a> the article <a href="https://dx.doi.org/10.3791/66839">10.3791/66839</a>

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/66839">Periorbital Placement of a Laser Doppler Probe for Cerebral Blood Flow Monitoring Prior to Middle Cerebral Artery Occlusion in Rodent Models</a>. The Authors&#160;section was&#160;updated.

Erratum: Periorbital Placement of a Laser Doppler Probe for Cerebral Blood Flow Monitoring Prior to Middle Cerebral Artery Occlusion in Rodent Models

<table><tbody><tr><td>forbici a molla curve</td><td>Castroviejo</td><td>1501710</td><td></td></tr><tr><td>pinze #5</td><td>Strumenti per le scienze fini</td><td>11250-20</td><td></td></tr><tr><td>Pinze #5/45</td><td>Strumenti per le scienze fini</td><td>1151-35</td><td></td></tr><tr><td>Forcepts Strumento per cauterizzazione</td><td>Conmed</td><td>M18019-01</td><td></td></tr><tr><td>Nastro da laboratorio</td><td>Fisherbrand Nastro per etichettatura</td><td>15-950</td><td></td></tr><tr><td>Monitor Doppler laser</td><td>Strumenti Moore&nbsp;</td><td>Software MOORVMS-LDF LDF</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Perisoft per Windows o moorSOFT</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Tosatrici</td><td>per mouse Philips Norelco</td><td>MG7910</td><td></td></tr><tr><td>Periflux System 4000, sonda 407</td><td>Perimed</td><td>attrezzatura non più disponibile</td><td></td></tr><tr><td>involucro di plastica</td><td>Glad</td><td>press n seal</td><td></td></tr><tr><td>Tosatrici per topi</td><td>oster</td><td>A5 o simili</td><td></td></tr><tr><td>Piccola anestesia per roditori</td><td>JD Medical</td><td>ordine</td><td></td>personalizzato</tr><tr><td>piccole forbici</td><td>excelta</td><td>362 Sissors o simile</td><td></td></tr><tr><td>Sistema di monitoraggio della temperatura con sonda</td><td>Physitemp</td><td>TCAT-2AC Controller</td><td></td></tr></tbody></table>

posizionamento periorbitale di una sonda laser doppler per il monitoraggio del flusso sanguigno cerebrale prima dell'occlusione dell'arteria cerebrale media in modelli di roditori

Periorbital Placement of a Laser Doppler Probe for Cerebral Blood Flow Monitoring Prior to Middle Cerebral Artery Occlusion in Rodent Models

Il posizionamento della sonda laser Doppler nella regione MCA è illustrato visivamente nella Figura 1, offrendo un pittogramma della vascolarizzazione e fungendo da guida visiva dalle prospettive sagittale e dorsale. La Figura 2 riassume i passaggi critici per il posizionamento della sonda laser Doppler e i risultati nel topo. La Figura 2A presenta l'immagine di un topo anestetizzato e preparato con una marcatura tratteggiata nel sito dell'incisione verticale necessaria per il successivo posizionamento della sonda laser Doppler. La finestra periorbitale del cranio è illustrata nella Figura 2B.
La Figura 3 riassume il posizionamento della sonda laser Doppler nel ratto. Un'immagine di un ratto anestetizzato e preparato con una marcatura tratteggiata nel sito dell'incisione verticale necessaria per il successivo posizionamento della sonda laser Doppler è mostrata nella Figura 3A. La finestra periorbitale non può essere visualizzata perché è più profonda del mouse. In questo caso, il teschio può essere sentito, come accennato nel passaggio 2.3. La sonda laser Doppler posizionata nella regione periorbitale nel ratto supino è mostrata nella Figura 3B.
Un tipico tracciamento LDF durante la procedura MCAO del topo è mostrato nella Figura 4A. Illustra una riuscita induzione dell'ischemia, come evidenziato da un calo distinto e immediato del flusso sanguigno cerebrale relativo (CBF) quando l'arteria carotide è legata e di nuovo quando il filamento viene avanzato fino all'ostio dell'MCA. L'inizio della riperfusione è mostrato alla fine del tracciato, evidenziato da un netto e immediato aumento del CBF relativo quando l'arteria carotide viene slegata e di nuovo quando il filamento viene ritirato dall'MCA. Una tipica lettura LDF dell'ischemia durante l'intervento chirurgico MCAO nel ratto è mostrata nella Figura 4B, che mostra un'induzione riuscita dell'ischemia seguita dalla rimozione della sonda e dal riposizionamento per la misurazione dell'LDF durante la riperfusione. Nella chirurgia dei ratti, i tempi di ischemia possono essere superiori a 60 minuti e gli animali possono riprendersi durante il periodo di ischemia e devono essere nuovamente anestetizzati per la riperfusione. In questo caso, la sonda viene riposizionata nella finestra periorbitale e i tracciati LDF continuano. L'ischemia è evidenziata nel tracciato da un netto e immediato calo del CBF relativo quando l'arteria carotide è legata e il filamento avanza verso l'ostio MCA. La riperfusione è evidenziata nel secondo tracciato LDF da un aumento distinto e immediato del CBF relativo, dopo di che l'arteria carotide viene slegata e, di nuovo, quando il filamento viene ritirato dall'ostio dell'MCA. Il Doppler periorbitale è posizionato sopra il ramo distale dell'MCA e, quindi, nell'ambito della distribuzione sanguigna dell'MCA con una diminuzione osservata del CBF come evidenziato dalla riduzione del flusso sanguigno durante la procedura MCAO, illustrata nella Figura 4.
Nella Figura 5 mostriamo i tracciati LDF che esemplificano gli interventi chirurgici MCAO falliti. La Figura 5A riassume un tracciato LDF da un intervento chirurgico nel ratto con un'occlusione carotidea riuscita che in seguito si è allentata e un posizionamento del filamento non riuscito, contrassegnato da un lento calo del CBF relativo. Questo pattern LDF è tipicamente associato a un MCA perforato che può essere confermato con l'autopsia. Un altro tracciato da un intervento chirurgico MCAO nel topo (Figura 5B) illumina l'occlusione inconcludente dell'arteria carotide che probabilmente ha contribuito all'incapacità di rilevare il posizionamento del filamento negli osti MCA. Si sospettava una perforazione dell'MCA perché quando il filamento veniva leggermente ritirato, il CBF relativo mostrava un recupero lento. Questi esempi evidenziano il ruolo critico dei tracciati LDF nell'identificare gli interventi chirurgici MCAO riusciti rispetto a quelli non riusciti e sottolineano l'importanza di procedure chirurgiche meticolose e misure per risultati sperimentali affidabili.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66839/66839fig01.jpg"> Figura 1: Pittogramma del posizionamento approssimativo della sonda laser Doppler in relazione all'MCA. Schema del posizionamento della sonda laser Doppler da una vista (A) sagittale e (B) dorsale. Creato con Biorender.com; KT26JWLYF6. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66839/66839fig01large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66839/66839fig02.jpg"> Figura 2: Illustrazione delle fasi dell'intervento chirurgico per il posizionamento della sonda laser Doppler nel mouse. (A) Immagine della posizione dell'incisione verticale necessaria per il posizionamento della sonda laser Doppler con il mouse in posizione supina. (B) Immagine della finestra periorbitale e del cranio preparata con pinze e/o forbici nel topo. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66839/66839fig02large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66839/66839fig03.jpg"> Figura 3: Illustrazione delle fasi dell'intervento chirurgico per il posizionamento della sonda laser Doppler nel ratto. (A) Immagine della posizione dell'incisione verticale necessaria per il posizionamento della sonda laser Doppler con il ratto in posizione supina. (B) Posizionamento della sonda Laser Doppler nella regione periorbitale nel ratto supino. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66839/66839fig03large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66839/66839fig04.jpg"> Figura 4: Esempi di tracciati LDF che confermano il successo della procedura MCAO nel topo e nel ratto. (A) Lettura LDF della regione MCA durante la procedura MCAO del topo. Questa traccia illustra la conferma di 1. occlusione dell'arteria carotide con legatura; 2. posizionamento del filamento all'MCA; 3. rimozione del filamento dopo 60 minuti di ischemia continua; e 4. riperfusione quando l'arteria carotide è slegata. Gli elementi a. e b. illustrano l'aspetto del tracciato Doppler quando la carotide viene slegata e rilegata durante la lettura. Questa tecnica può essere utilizzata per confermare il posizionamento della sonda. (B) Letture LDF della regione MCA durante la procedura MCAO del ratto. Come il topo, questa traccia illustra la conferma di 1. occlusione dell'arteria carotide con cravatta e 2. posizionamento del filamento presso l'MCA. Nella procedura MCAO del ratto, la sonda Doppler viene spesso rimossa e l'animale trascorre l'intero tempo dell'ischemia sveglio e in movimento. Per la riperfusione, l'LDF viene ristabilito prima della riperfusione: 3. conferma la rimozione del filamento e 4. conferma che la carotide è slegata per la completa riperfusione. Sia nelle procedure MCAO di topo che in quelle di ratto, il posizionamento riuscito della sonda viene utilizzato per visualizzare il corretto posizionamento del filamento ed è indicato quando il tracciato mostra due diminuzioni distinte e improvvise di LDF (per ischemia) seguite da due aumenti distinti e improvvisi di LDF (riperfusione). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66839/66839fig04large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66839/66839fig05.jpg"> Figura 5: Esempi di tracciati di flussimetria laser Doppler che indicano procedure MCAO non riuscite nel topo e nel ratto. (A) Un esempio di tracciamento LDF che indica un posizionamento inconcludente del filamento nel ratto. Mentre la carotide è stata legata (1.), si è allentata (2.) e poi è stata legata di nuovo (3.), c'è una caduta indistinta e lenta, piuttosto che un calo improvviso di LDF quando il filamento era all'MCA di Ostia. Questo tracciato può indicare un MCA perforato e l'animale potrebbe non sopravvivere alle prime 24 ore di riperfusione; La perforazione del filamento può essere confermata con l'autopsia. (B) Un esempio di tracciamento LDF che indica un posizionamento inconcludente del filamento nel topo. In questo tracciato, l'evidenza di legame carotideo è inconcludente (1.), seguita da un calo indistinto di LDF con posizionamento del filamento all'ostia MCA (2.). Inoltre, quando il filamento è stato leggermente ritirato, il flusso sanguigno cerebrale relativo è aumentato lentamente (3.). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66839/66839fig05large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>

Posizionamento periorbitale di una sonda laser Doppler per il monitoraggio del flusso sanguigno cerebrale prima dell'occlusione dell'arteria cerebrale media in modelli di roditori

Middle cerebral artery occlusion (MCAO) is the gold-standard method for preclinical modeling of ischemic stroke in rodents. However, successful occlusion ...

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Il intraluminale occlusione dell'arteria cerebrale media (MCAO) modello è il modello più frequente tra i modelli sperimentali utilizzati ictus ischemico. Qui dimostrerà tutto il modello in dettaglio con la guida di flussimetria laser Doppler, ed i suoi risultati rappresentativi.

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Sonda laser Doppler di posizionamento: una tecnica per impiantare una sonda sull'arteria cerebrale media per la misurazione del flusso sanguigno in un modello murino

Questo video descrive la procedura per sviluppare l'ictus transitorio in un modello murino utilizzando l'occlusione basata su filamenti rivestiti di silicone dell'arteria cerebrale media. Il modello sviluppato imita l'ictus umano, aiutando così a studiare nuove strategie terapeutiche per il trattamento dell'ictus.

Modello di ictus transitorio basato sull'inserimento di filamenti: una procedura chirurgica per eseguire l'occlusione dell'arteria cerebrale media nel cervello murino

Modelli animali di ischemia cerebrale sono stati sviluppati per simulare la condizione umana di ictus. Questo protocollo descrive l'endotelina-1 (ET-1) indotta da occlusione dell'arteria cerebrale media (MCAO) modello per l'ictus ischemico nei ratti. Inoltre, importanti considerazioni, i vantaggi ei limiti di tale modello sono discussi.

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Questo articolo descrive un metodo per la visualizzazione delle arterie cerebrali di ratto attraverso una finestra craniale utilizzando craniotomia temporale per visualizzare porzioni prossimale dell'arteria cerebrale media...

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Monitoraggio perfusione cerebrale è stata dimostrata per migliorare l'accuratezza in modelli ictus ischemico. Le difficoltà tecniche spesso limitano l'uso di questo strumento essenziale per la ricerca cerebrovascolare. In questo video, un sistema ottimizzato viene mostrato per ottenere un monitoraggio singolo o multi-sito emodinamico durante intraluminale occlusione dell'arteria cerebrale media nel ratto.

Sistema ottimizzato per il monitoraggio perfusione cerebrale nel modello Rat Stroke of intraluminale occlusione dell&#39;arteria cerebrale media

Questo protocollo descrive il precondizionamento ipossico ripetitivo, o brevi esposizioni all'ipossia sistemica che riducono i volumi di infarto e l'interruzione della barriera emato-encefalica a seguito di occlusione transitoria dell'arteria cerebrale media nei topi. Descrive inoltre la doppia quantificazione del volume dell'infarto e dell'interruzione della barriera emato-encefalica dopo l'ictus per valutare l'efficacia della protezione neurovascolare.

Quantificazione della Protezione Neurovascular seguito ripetitivo ipossico precondizionamento e transitoria occlusione dell&#39;arteria cerebrale media nei topi

L'obiettivo generale di questa procedura è quello di fornire una tecnica altamente riproducibile per la valutazione in vivo della perturbazione barriera emato - encefalica nei modelli del ratto del colpo ischemico.

Una valutazione In Vivo di rottura della barriera emato - encefalica in un modello del ratto del colpo ischemico

L'occlusione di filamento intraluminal dell'arteria cerebrale centrale è il modello più utilizzato in vivo di colpo sperimentale nei roditori. Approccio chirurgico alternativo per consentire la riparazione dell'arteria carotica comune avviene qui, che permette la riperfusione dell'arteria carotica comune e un completo riperfusione nel territorio dell'arteria cerebrale media.

Occlusione dell'arteria cerebrale centrale consentendo di riperfusione tramite riparazione dell'arteria carotica comune nei topi

Diversi modelli di occlusione dell'arteria cerebrale media (MCAo) sono utilizzati nella ricerca sperimentale sull'ictus. Qui, viene descritto un modello sperimentale di ictus di MCAo transitorio attraverso l'arteria carotide esterna (ECA), che mira a imitare l'ictus umano, in cui il trombo cerebrovascolare viene rimosso a causa della lisi spontanea del coagulo o della terapia.

Modellazione dell'ictus nei topi: occlusione transitoria dell'arteria cerebrale media attraverso l'arteria carotide esterna

Descriviamo un protocollo per la valutazione delle curve dose-risposta per la stimolazione extracranica in termini di misurazioni del campo elettrico cerebrale e di un rilevante biomarcatore-flusso sanguigno cerebrale. Poiché questo protocollo prevede il posizionamento invasivo di elettrodi nel cervello, è necessaria l'anestesia generale, con la respirazione spontanea preferita alla respirazione controllata.

Posizionamento di elettrodi stimolanti extracranici e misurazione del flusso sanguigno cerebrale e dei campi elettrici intracranici in topi anestetizzati

Scopri il posizionamento periorbitale della sonda laser Doppler per monitorare il flusso cerebrale durante l'occlusione dell'arteria cerebrale media in roditori. Questo metodo minimamente invasivo consente valutazioni rapide e riproducibili.

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