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Trasformazione mitocondriale in Baker
Trasformazione mitocondriale in Baker
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JoVE Journal Genetics
Mitochondrial Transformation in Baker's Yeast to Study Translation and Respiratory Complex Assembly

Trasformazione mitocondriale in Baker

Full Text
1,696 Views
09:53 min
June 7, 2024

DOI: 10.3791/66856-v

Yolanda Camacho-Villasana*1, Ulrik Pedroza-Dávila*1, Xochitl Perez-Martinez1

1Departamento de Genética Molecular, Instituto de Fisiología Celular,Universidad Nacional Autónoma de México

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Questo lavoro spiega come trasformare i mitocondri del lievito utilizzando un metodo biolistico. Mostriamo anche come selezionare e purificare i trasformanti e come introdurre la mutazione desiderata nella posizione target all'interno del genoma mitocondriale.

La nostra ricerca esplora la regolazione della sintesi proteica mitocondriale e la sua connessione con l'assemblaggio della membrana interna, cruciale per la fosforilazione ossidativa. Utilizzando il modello, studiamo il meccanismo molecolare della funzione mitocondriale, sfruttando la sua idoneità per indagini molecolari e genetiche dettagliate. Molte tecnologie vengono utilizzate per la ricerca nel nostro campo, come il sequenziamento profondo dell'RNA, le tecnologie multiomiche, la microscopia crioelettronica, il bombardamento ad alta velocità per trasformare i mitocondri genici, tra gli altri.

Abbiamo dato importanti contributi per comprendere il ruolo e i meccanismi d'azione di molte proteine coinvolte nella regolazione della traduzione mitocondriale e nell'assemblaggio dei complessi respiratori III e IV. Questo è il caso di proteine come Mss51, Pet309, Pet54, mS38, CPP3, CPP6, tra le altre. Questo protocollo è uno strumento indispensabile per capire come i mitoribosomi trovano gli mRNA mitocondriali STARD-CHOL.

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Trasformazione Mitocondriale Saccharomyces cerevisiae Lievito di Panificazione Biologia Mitocondriale Genoma Mitocondriale Trasformazione Biolistica Mutazioni Sito-Specifiche Riarrangiamenti Genici Reporter Mitoribosomi Complessi Respiratori ATP Sintasi Bombardamento Di Microproiettili

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