Name: Sviluppo di terapie combinatorie per le lesioni del midollo spinale utilizzando la somministrazione di cellule staminali (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-06-07T14:50:00.000+00:00
Duration: 5 min 13 s
Description: Scopri lo sviluppo di terapie combinatorie per lesioni del midollo spinale utilizzando idrogeli decellularizzati e cellule staminali derivate dal tessuto adiposo. Questo metodo ottimizza piattaforme 3D per la rigenerazione neuronale.

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<table><tbody><tr><td>3-(Decildimetilammonio)propano solfonato sale interno</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D4266</td><td>Utilizzato durante la decellularizzazione del nervo sciatico, SB-10</td></tr><tr><td>3-(N,N-Dimetilpalmitilammonio)sulfonato di propano</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H6883</td><td>Utilizzato durante la decellularizzazione del nervo sciatico, SB-16</td></tr><tr><td>Reagente AlamarBlue</td><td>Fisher Scientific</td><td>DAL1100</td><td>Utilizzato durante il test di viabilità delle cellule AlamaBlue</td></tr><tr><td>Condroitinasi ABC</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C3667</td><td>Utilizzato durante la decellularizzazione del nervo sciatico</td></tr><tr><td>Criostato</td><td>Leica</td><td>CM1860</td><td></td></tr><tr><td>Desossiribonuclasio</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D4263</td><td>Utilizzato durante la decellularizzazione del nervo sciatico</td></tr><tr><td>Fosfato di idrogeno disodio eptaidrato</td><td>VWR</td><td>BDH9296</td><td>Chimico per 100 mM Na/50 mM phos e 50 mM Na/10 mM phos buffer</td></tr><tr><td>DNeasy Blood & Blood Kit di fazzoletti</td><td>Qiagen</td><td>69506</td><td>Utilizzato durante l'analisi del DNA</td></tr><tr><td>Supporto DPX per istologia, mezzo di montaggio a carrelli</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>6522</td><td>Utilizzato durante H& Colorazione E</td></tr><tr><td>Eosina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>HT110216</td><td>Utilizzato durante H& Colorazione E</td></tr><tr><td>Etanolo</td><td>VWR</td><td>89125-172</td><td></td></tr><tr><td>Formaldeide</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>252549</td><td>Utilizzato durante H& Colorazione E</td></tr><tr><td>Glutaraldeide (GA)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G6257</td><td>Utilizzato durante la funzionalizzazione della superficie PDMS</td></tr><tr><td>Media di crescita hASC</td><td>Lonza</td><td>PT-4505</td><td>Utilizzato per la coltivazione di hSC contenenti siero bovino fetale e penicillina/streptomicina</td></tr><tr><td>Ematossilina</td><td>VWR</td><td>26041-06</td><td>Utilizzato durante H& Colorazione E</td></tr><tr><td>Cellule staminali umane derivate dall'adiposo</td><td>Lonza</td><td>PT-5006</td><td></td></tr><tr><td>Acido cloridrico (HCl)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>320331</td><td>Usata per digerire tessuti decellularizzati e regolare le soluzioni di Pregel</td></tr><tr><td>Media M199</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M0650</td><td>Usata per diluire i pregel alla concentrazione desiderata</td></tr><tr><td>Composto temperato ottimale per il taglio</td><td>Tissue-Tek</td><td>4583</td><td></td></tr><tr><td>Pepsina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P7000</td><td>Usata per digerire tessuti decellularizzati</td></tr><tr><td>Acido peracetico</td><td>Lab Alley</td><td>PAA1001</td><td>Utilizzato durante la decellularizzazione del midollo spinale</td></tr><tr><td>Soluzione salina tamponata con fosfato (PBS)</td><td>VWR</td><td>97062-948</td><td></td></tr><tr><td>Lettore di targhe</td><td>BioTek Instruments</td><td>Synergy Mx</td><td></td></tr><tr><td>Polietilenemina (PEI)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>181978</td><td>Utilizzato durante la funzionalizzazione della superficie PDMS</td></tr><tr><td>Nervo sciatico suino</td><td>Tissue Source LLC</td><td></td><td>Maiali vivi, senza informazioni identificabili e senza dettagli di tracciabilità</td></tr><tr><td>Midollo spinale suino</td><td>Tissue Source LLC</td><td></td><td>Maiali vivi, senza informazioni identificabili e senza dettagli di tracciabilità</td></tr><tr><td>Sistema QuantiFluor dsDNA</td><td>Promega</td><td>E2670</td><td>Utilizzato per analizzare il contenuto del DNA</td></tr><tr><td>Reometro</td><td>TA Instruments</td><td>DHR 2</td><td></td></tr><tr><td>Rotatore robusto</td><td>Glas-co</td><td>099A RD4512</td><td>Utilizzato durante la decellularizzazione del midollo spinale</td></tr><tr><td>Cloruro di sodio (NaCl)</td><td>VWR</td><td>BDH9286</td><td>Chimico per 100 mM Na/50 mM phos e 50 mM Na/10 mM phos buffer</td></tr><tr><td>Desossicolato di sodio</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D6750</td><td></td></tr><tr><td>Monoidrato di fosfato di diidrogeno</td><td>VWR</td><td>BDH9298</td><td>Chimico per 100 mM Na/50 mM phos e 50 mM Na/10 mM phos buffer</td></tr><tr><td>Soluzione di idrossido di sodio (NaOH)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>415443</td><td>Usata per regolare le soluzioni di Pregel</td></tr><tr><td>SU-8</td><td>Materiali avanzati da Kayaku</td><td>SU8-100</td><td>Usata per rivestire il wafer al silicio</td></tr><tr><td>Saccarosio</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S8501</td><td>Utilizzato durante la decellularizzazione del midollo spinale</td></tr><tr><td>Kit elastomero in silicone Sylgard 184</td><td>DOW</td><td>1317318</td><td>Base e agente polimerico polidimetilxilossano (PDMS)</td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>X100</td><td>Utilizzato durante la decellularizzazione del midollo spinale</td></tr><tr><td>Tripsina-EDTA (0,05%), fenolo rosso</td><td>Thermo Fisher</td><td>25300062</td><td>Utilizzato durante il lavoro con hASC e durante la decellularizzazione del midollo spinale</td></tr><tr><td>Rotatore a tubo per revolver</td><td>Thermo Fisher</td><td>88881001</td><td>Utilizzato durante la decellularizzazione del nervo sciatico</td></tr><tr><td>Xilene</td><td>VWR</td><td>MK866816</td><td>Utilizzato durante H& Colorazione E</td></tr></tbody></table>

sviluppo di terapie combinatorie per le lesioni del midollo spinale utilizzando la somministrazione di cellule staminali

Development of Combinatorial Therapeutics for Spinal Cord Injury using Stem Cell Delivery

Sviluppo di terapie combinatorie per le lesioni del midollo spinale utilizzando la somministrazione di cellule staminali

Traumatic spinal cord injury (SCI) induces permanent sensorimotor deficit below the site of injury. It affects approximately a quarter million people in ...

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Bioingegneria

Lesione traumatica al midollo spinale interrompe la comunicazione con il cervello. Per ripristinare la connettività perso utilizziamo un innesto del nervo periferico di fornire un substrato per la rigenerazione delle fibre in combinazione con fattori neurotrofici e matrice di modulazione degli enzimi per rimuovere molecole inibitrici per promuovere la crescita a lunga distanza.

La combinazione di innesto del nervo periferico e Matrix modulazione di riparare il cavo feriti Rat spinale

Trapianto precursore neurale è una strategia promettente per la protezione e / o la sostituzione di perduti / disfunzionale neuroni motori frenico cervicale nelle lesioni del midollo spinale (SCI) e la malattia del motoneurone, sclerosi laterali amiotrofica (SLA). Forniamo un protocollo per la consegna delle cellule cervicali per corno ventrale del midollo spinale in modelli di roditori della SLA e SCI.

Intraspinale trapianto di cellule cervicali targeting per corno ventrale nella Sclerosi Laterale Amiotrofica e le lesioni traumatiche del midollo spinale

Fonte: Zweckberger, K., et al. Uso sinergico di cellule precursori neurali e peptidi autoassemblanti nella lesione sperimentale del midollo spinale cervicale.  J. Vis. Exp. (2015).Questo protocollo dimostra un approccio iniettivo mirato per la riparazione delle lesioni del midollo spinale in un modello di ratto. Prevede la somministrazione di peptidi autoassemblanti (SAP) nel nucleo della lesione per creare un'impalcatura di supporto, seguita da iniezioni di cellule precursori neurali (NPC)...

Iniezione di peptidi autoassemblanti e cellule precursori neurali per la riparazione del midollo spinale in un modello di ratto

Matrici di fibrina che contengono fattori di crescita sono stati usati per mantenere le cellule staminali neurali innestate nei siti di completo recisione del midollo spinale. Cellule trapiantate completamente riempite la cavità della lesione e differenziate in diversi tipi di cellule neurali, tra cui i neuroni che si estendevano assoni nel midollo spinale ospite su lunghe distanze.

Promozione della sopravvivenza e la differenziazione delle cellule staminali neurali con fibrina e fattore di crescita Cocktails dopo gravi lesioni del midollo spinale

Il trattamento della lesione del midollo spinale cervicale sia con peptidi autoassemblanti (SAP) che con cellule precursori neurali (NPC), insieme a fattori di crescita, è un approccio promettente per promuovere la rigenerazione e il recupero. Viene stabilito un modello di ratto con clip per contusione/aneurisma da compressione di lesione spinale cervicale e un trattamento combinato che prevede l'iniezione di SAP e il trapianto di NPC.

Utilizzo sinergico delle cellule neurali e precursori peptidi autoassemblanti in Sperimentale Cervical Spinal Cord Injury

Lesioni del midollo spinale è una condizione traumatica che provoca grave morbilità e mortalità elevata. In questo lavoro descriviamo in dettaglio un modello contusione di lesioni del midollo spinale nei topi seguita da un trapianto di cellule staminali neurali.

Neural Stem Cell Transplantation in Sperimentale Contusivi Model of Spinal Cord Injury

Questo studio descrive una piattaforma sperimentale per caratterizzare rapidamente le cellule staminali ingegnerizzate e i loro comportamenti prima della loro applicazione in studi di trapianto in vivo a lungo termine per il salvataggio e la riparazione del sistema nervoso.

High Throughput Caratterizzazione di cellule staminali adulte Engineered per consegna di fattori terapeutici per le strategie neuroprotettive

Le gravi lesioni del midollo spinale spesso provocano difetti tissutali. Vengono descritte due possibilità per colmare con successo tali lacune per promuovere l'adattamento tissutale, le risposte rigenerative e il miglioramento funzionale nei ratti attraverso l'impianto di un sistema di microconnettori meccanici dopo una lesione acuta e cinque settimane dopo la completa transezione del midollo spinale.

Strategie sperimentali per colmare grandi lacune tessuto nel midollo leso spinale dopo acuta e cronica Lesione

Questo articolo descrive una tecnica per inserire un cavo condotto tra i ceppi del midollo spinale dopo il transection completo e riempimento con cellule di Schwann (SCs) e matrice di iniettabili della membrana basale al fine di colmare e promuovere la rigenerazione degli assoni attraverso il gap.

Trapianto di Schwann Cells PVDF-TrFE condotto a ponte ratto Transected del midollo spinale ceppi per promuovere la rigenerazione degli assoni attraverso il Gap

Questo protocollo descrive la realizzazione di un sistema di coltura cellulare per consentire la semina delle cellule staminali su un'impalcatura polimero conduttivo per elettrostimolazione in vitro e successive in vivo l'impianto della cellula formativa-seminato impalcatura utilizzando un tecnica mininvasiva.

Elettricamente conduttivo impalcatura di modulare e fornire cellule staminali

In questo articolo, forniamo un metodo riproducibile per generare e mantenere a lungo termine fette organotipiche del midollo spinale trapiantate con cellule staminali neurali come modello ex vivo per testare terapie di sostituzione cellulare.

Coltura a lungo termine di fette organotipiche del midollo spinale di topo come piattaforma per la convalida del trapianto di cellule nella lesione del midollo spinale

Scopri lo sviluppo di terapie combinatorie per lesioni del midollo spinale utilizzando idrogeli decellularizzati e cellule staminali derivate dal tessuto adiposo. Questo metodo ottimizza piattaforme 3D per la rigenerazione neuronale.

Sviluppo di terapie combinatorie per le lesioni del midollo spinale utilizzando la somministrazione di cellule staminali

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