Un modello murino per il deterioramento cognitivo vascolare e la demenza basato sulla stenosi dell'arteria carotide comune bilaterale asimmetrica guidata da ago

Il nostro laboratorio ha identificato i nuovi trattamenti per l'ictus ischemico e il deterioramento cognitivo vascolare e la demenza. In questo studio, abbiamo creato un nuovo modello di topi per studiare il deterioramento cognitivo vascolare e la demenza.

La sfida principale è che il deterioramento cognitivo vascolare e la demenza sono un termine complesso che unisce molte rappresentazioni cliniche e cause. E quindi i ricercatori dovrebbero sempre tenerlo a mente quando selezionano un modello animale per i loro esperimenti.

Abbiamo stabilito un nuovo modello VCID che consente il monitoraggio dinamico delle onde cerebrali con la risonanza magnetica all'infiammazione più lontana e il meccanismo svolge un ruolo critico nella VCID.

Il nostro modello è altamente affidabile, consente di mettere a punto i suoi parametri in base alle esigenze del ricercatore, ha un costo ultra basso e consente anche la scansione MRI in animali vivi. L'infiammazione gioca un ruolo fondamentale nella VCID e analizzeremo ulteriormente il meccanismo di come l'infiammazione porta alla demenza e come migliorare la malattia modulando l'infiammazione.

[Narratore] Per iniziare, metti i frammenti di ago lunghi quattro millimetri in una capsula di Petri sterile. Picchiettare delicatamente l'estremità affilata degli aghi contro una superficie dura per smussarli. Usando un portaaghi, separa accuratamente gli aghi dai loro pezzi di plastica e pretaglia le suture di seta 7-0 in pezzi lunghi da uno a due centimetri. Dopo aver anestetizzato il mouse, posizionarlo su un termoforo con il lato ventrale rivolto verso l'alto. Sterilizzare il sito chirurgico con la soluzione di Betadine contenente il 10% di iodio e deiodare la pelle con etanolo al 70%. Assicurarsi che il livello di anestesia sia adeguato con un test di pizzicamento delle dita dei piedi. Ora, fai un'incisione verticale sulla linea mediana lungo la trachea. Usando una micro pinza, separa delicatamente le ghiandole tiroidee bilaterali, quindi tira indietro la pelle e il tessuto sottostante utilizzando piccoli divaricatori cutanei sterili. Al microscopio, utilizzare una pinzetta angolata per esporre con cura e sezionare senza mezzi termini uno dei CCA dal nervo vago e dalla guaina circostante. Se il CCA tende ad aderire alla pinza, inumidire il sito di incisione con acqua sterile o PBS. Se necessario, posizionare una piccola siringa di plastica sotto il collo per supportare la postura. Quindi, usando una pinzetta angolata, infila tre frammenti di sutura di seta 7-0 pretagliati sotto il CCA, distanziandoli di circa un millimetro l'uno dall'altro. Crea un doppio nodo molto sciolto attorno al CCA su uno dei frammenti di sutura. Posizionare il frammento di ago preparato parallelamente al CCA, posizionandolo all'interno del nodo sciolto. Stringere con cura il nodo primario attorno all'ago e al CCA fino a quando il flusso sanguigno non viene interrotto. Quindi fissarlo con un nodo secondario. Estrarre delicatamente l'ago per consentire la ripresa del flusso sanguigno parziale e tagliare le estremità della sutura. Verificare che tutte e tre le bande di sutura sul CCA siano legate saldamente senza essere così strette da ostruire completamente il flusso sanguigno. Assicurarsi che il CCA non sia pallido a valle dei nodi e che le suture siano uniformemente distanziate. Ripetere l'isolamento e la legatura del CCA sull'altro lato e confermare la corretta distanza e il ripristino del flusso sanguigno. L'imaging bidimensionale con macchie laser ha rivelato che l'ipoperfusione cerebrale era più pronunciata nell'emisfero sinistro e persisteva per almeno 24 settimane dopo l'intervento chirurgico. Il tasso di sopravvivenza dei topi maschi post-operatorio nell'arco di sei settimane è stato registrato all'81,6% con una mortalità più elevata durante la prima settimana. Le immagini MRI pesate in T2 hanno rilevato regioni ipo o iper-intense in più regioni cerebrali in topi operati con ABCS, indicando una lesione cerebrale. Le mappe dei colori codificate direzionalmente dall'imaging del tensore di diffusione hanno mostrato danni strutturali nei topi ABCS, rispetto al gruppo Sham. Il test del labirinto d'acqua di Morris ha mostrato una latenza prolungata per la fuga nei topi operati con ABCS, indicando significative difficoltà di apprendimento. La riduzione del tempo trascorso nel quadrante target durante la prova della sonda ha ulteriormente confermato la compromissione della memoria. Questi deficit persistevano per almeno 24 settimane dopo l'intervento chirurgico.