Name: Modello di coma ischemico cerebrale indotto da occlusione a quattro vasi modificata (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-07-05T14:40:00.000+00:00
Duration: 3 min 37 s
Description: Impara a indurre un modello di coma ischemico cerebrale nei ratti utilizzando una tecnica modificata di occlusione a quattro vasi. Questo metodo semplice riduce i traumi secondari e facilita lo studio dei meccanismi patologici.

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<meta charset="utf8"></head><body>Chirurgia in un'unica fase per indurre il coma ischemico cerebrale nei ratti

<ol><li>Hou, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rhodiola+crenulata+alleviates+hypobaric+hypoxia-induced+brain+injury+by+maintaining+BBB+integrity+and+balancing+energy+metabolism+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Phytomedicine%22%5BJournal%5D)">Rhodiola crenulata alleviates hypobaric hypoxia-induced brain injury by maintaining BBB integrity and balancing energy metabolism dysfunction.</a> Phytomedicine. 128, 155529(2024).</li>
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<li>Pulsinelli, W. A., Brierley, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+model+of+bilateral+hemispheric+ischemia+in+the+unanesthetized+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">A new model of bilateral hemispheric ischemia in the unanesthetized rat.</a> Stroke. 10 (3), 267-272 (1979).</li>
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<li>Sadelli, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+cerebral+ischemia+in+rats+leads+to+amnesia+due+to+selective+neuronal+death+followed+by+astroglial+scar+formation+in+the+CA1+layer%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Learn+Mem%22%5BJournal%5D)">Global cerebral ischemia in rats leads to amnesia due to selective neuronal death followed by astroglial scar formation in the CA1 layer.</a> Neurobiol Learn Mem. 141, 168-178 (2017).</li>
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<li>Sun, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+modified+four+vessel+occlusion+model+of+global+cerebral+ischemia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">A modified four vessel occlusion model of global cerebral ischemia in rats.</a> J Neurosci Methods. 352, 109090(2021).</li>
<li>Xiaobing, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modifying+the+four+vessel+occlusion+to+establish+ischemic+brain+injury+coma+model+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Sichuan+Med+J%22%5BJournal%5D)">Modifying the four vessel occlusion to establish ischemic brain injury coma model in rats.</a> Sichuan Med J. 29 (4), 384-386 (2008).</li>
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<li>Zhan, L., Lu, X., Xu, W., Sun, W., Xu, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+MLKL-dependent+necroptosis+via+downregulating+interleukin-1R1+contributes+to+neuroprotection+of+hypoxic+preconditioning+in+transient+global+cerebral+ischemic+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neuroinflammation%22%5BJournal%5D)">Inhibition of MLKL-dependent necroptosis via downregulating interleukin-1R1 contributes to neuroprotection of hypoxic preconditioning in transient global cerebral ischemic rats.</a> J Neuroinflammation. 18 (1), 97(2021).</li>
<li>Konaka, K., Miyashita, K., Ishibashi-Ueda, H., Naritomi, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Severe+hyperthermia+caused+by+four-vessel+occlusion+of+main+cerebral+arteries%5BTitle%5D)+AND+%22Internal+Med%22%5BJournal%5D)">Severe hyperthermia caused by four-vessel occlusion of main cerebral arteries.</a> Internal Med. 48 (24), 2137-2140 (2009).</li>
<li>Ferreira, E. D. F., Romanini, C. V., Mori, M. A., de Oliveira, R. M. W., Milani, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Middle-aged%2C+but+not+young%2C+rats+develop+cognitive+impairment+and+cortical+neurodegeneration+following+the+four-vessel+occlusion%2Finternal+carotid+artery+model+of+chronic+cerebral+hypoperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Middle-aged, but not young, rats develop cognitive impairment and cortical neurodegeneration following the four-vessel occlusion/internal carotid artery model of chronic cerebral hypoperfusion.</a> Eur J Neurosci. 34 (7), 1131-1140 (2011).</li>
<li>Ma, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effects+of+extract+of+Coeloglossum+viride+var.+bracteatum+on+ischemia-induced+neuronal+death+and+cognitive+impairment+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Protective effects of extract of Coeloglossum viride var. bracteatum on ischemia-induced neuronal death and cognitive impairment in rats.</a> Behav Pharmacol. 19 (4), 325-333 (2008).</li>
<li>Song, Y. Y., Chen, Y. H., Li, J. F., Sun, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+animal+models+of+vascular+dementia%5BTitle%5D)+AND+%22Chin+J+Comp+Med%22%5BJournal%5D)">A review of animal models of vascular dementia.</a> Chin J Comp Med. 33 (12), 75-85 (2023).</li>
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<li>Li, J., Takeda, Y., Hirakawa, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Threshold+of+ischemic+depolarization+for+neuronal+injury+following+four-vessel+occlusion+in+the+rat+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosurg+Anesthesiol%22%5BJournal%5D)">Threshold of ischemic depolarization for neuronal injury following four-vessel occlusion in the rat cortex.</a> J Neurosurg Anesthesiol. 12 (3), 247-254 (2000).</li>
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<li>Lu, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+modified+method+to+reduce+variable+outcomes+in+a+rat+model+of+four-vessel+arterial+occlusion%5BTitle%5D)+AND+%22Neurol+Res%22%5BJournal%5D)">A modified method to reduce variable outcomes in a rat model of four-vessel arterial occlusion.</a> Neurol Res. 38 (12), 1102-1110 (2016).</li>
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<li>McBean, D. E., Kelly, P. A. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+models+of+global+cerebral+ischemia%3A+A+comparison+of+two-vessel+occlusion+and+four-vessel+occlusion%5BTitle%5D)+AND+%22Gen+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Rodent models of global cerebral ischemia: A comparison of two-vessel occlusion and four-vessel occlusion.</a> Gen Pharmacol. 30 (4), 431-434 (1998).</li>
<li>Todd, N. V., Picozzi, P., Alan Crockard, H., Russell, A. R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reperfusion+after+cerebral+ischemia%3A+Influence+of+duration+of+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Reperfusion after cerebral ischemia: Influence of duration of ischemia.</a> Stroke. 17 (3), 460-466 (1986).</li>
<li>Toda, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Highly+reproducible+rat+model+of+reversible+forebrain+ischemia+-+Modified+four-vessel+occlusion+model+and+its+metabolic+feature%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neurochir+%28Wien%29%22%5BJournal%5D)">Highly reproducible rat model of reversible forebrain ischemia - Modified four-vessel occlusion model and its metabolic feature.</a> Acta Neurochir (Wien). 144 (12), 1297-1304 (2002).</li>
<li>Ma, R., Lu, D., Wang, J., Xie, Q., Guo, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+pharmacological+activity+and+safety+of+different+stereochemical+configurations+of+borneol%3A+L-borneol%2C+D-borneol%2C+and+synthetic+borneol%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">Comparison of pharmacological activity and safety of different stereochemical configurations of borneol: L-borneol, D-borneol, and synthetic borneol.</a> Biomed Pharmacother. 164, 114668(2023).</li>
<li>Ji, X. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potential+targets+for+protecting+against+hippocampal+cell+apoptosis+after+transient+cerebral+ischemia-reperfusion+injury+in+aged+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Regen+Res%22%5BJournal%5D)">Potential targets for protecting against hippocampal cell apoptosis after transient cerebral ischemia-reperfusion injury in aged rats.</a> Neural Regen Res. 9 (11), 1122-1128 (2014).</li>
<li>Martínez-Alonso, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+association+of+4E-BP2-interacting+proteins+is+related+to+selective+delayed+neuronal+death+after+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Differential association of 4E-BP2-interacting proteins is related to selective delayed neuronal death after ischemia.</a> Int J Mol Sci. 22 (19), 10327(2021).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Array di fotoelettrodi in microfibra a 16 canali</td><td>Jiangsu Yige Biotechnology Co., Ltd</td><td>2605</td><td></td></tr><tr><td>4-0 Sutura chirurgica</td><td>Nantong Holycon Medical Devices Co., Ltd.</td><td>B-104</td><td></td></tr><tr><td>6-0 Sutura chirurgica</td><td>Ningbo MEDICAL Needle Co., Ltd.</td><td>JM1216-742417</td><td></td></tr><tr><td>Elettrodo EEG</td><td>Kedou Brain machine Technology Co., LTD</td><td>KD-EEGEMG</td><td></td></tr><tr><td>Penna per elettrocoagulazione</td><td>CONPUVON Company</td><td>465</td><td></td></tr><tr><td>Lunion Stage Sistema di stadiazione del sonno automatico</td><td>Shanghai Lulian Intelligent Technology Co., Ltd.</td><td>1336</td><td></td></tr><tr><td>Trapano per cranio portatile in miniatura</td><td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td><td>87001</td><td></td></tr><tr><td>Penicillina sodica</td><td>Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd.</td><td>17121709-2</td><td></td></tr><tr><td>RATTI SD</td><td>SPF ( Pechino ) Biotechnology Co., Ltd.</td><td>180-220g</td><td></td></tr><tr><td>Chiodo del cranio</td><td>GLOBALEBIO, LTD</td><td>/</td><td></td></tr><tr><td>Strumento stereotassico</td><td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td><td>68801</td><td></td></tr><tr><td>Zoletil 50</td><td>Vic Trading (Shanghai) Co., LTD</td><td>BN 88SHA</td><td></td></tr></tbody></table>

modello di coma ischemico cerebrale indotto da occlusione a quattro vasi modificata

Cerebral Ischemic Coma Model Induced by Modified Four-Vessel Occlusion

A causa dell'infiammazione e di altre stimolazioni causate dall'impianto di elettrodi, l'EEG può essere instabile, quindi i ratti devono riprendersi per 3 giorni. I ratti con EEG ed EMG normali dopo 3 giorni potrebbero essere inclusi per la preparazione del modello di coma. Quando i ratti sono stati anestetizzati, l'attività EEG ed EMG è stata leggermente soppressa, ma è proceduta senza intoppi. Non vi è stato alcun cambiamento significativo nell'attività EEG ed EMG dopo l'elettrocoagulazione che ha bloccato i VA bilaterali. Dopo circa 30 minuti, il farmaco è stato metabolizzato, i ratti hanno gradualmente ripreso conoscenza e l'attività EEG ed EMG è aumentata. Quando i ratti mostravano contrazioni degli arti, mentre i segnali EEG ed EMG erano attivi e non più in linea retta, il CCA è stato rapidamente legato. In questo momento, tutti e quattro i vasi sanguigni responsabili dell'afflusso di sangue al cervello erano bloccati, con conseguente ischemia cerebrale globale. Le attività EEG ed EMG sono state rapidamente inibite, formando quasi una linea retta, e il ratto non ha più lottato e i bulbi oculari sono apparsi grigi e bianchi (Figura 2A). Se i ratti non possono essere indotti in coma, significa che il modello ha fallito.
Dopo 30 minuti, il primo filo di legatura dei CCA è stato rilasciato per la riperfusione, ma il secondo filo di legatura posizionato davanti ai CCA ha mantenuto basso il livello di perfusione, inducendo il coma continuo nei ratti per circa 60 minuti. Con la graduale compensazione e la perfusione sanguigna del corpo, i ratti si sono gradualmente svegliati (Figura 2B). L'EEG e l'EMG dei ratti si sono ripresi quasi completamente dopo il risveglio.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67161/67161fig01.jpg"> Figura 1: Diagramma di posizione dell'arteria vertebrale per elettrocoagulazione. I passaggi 1-3 delineano il protocollo per l'impianto degli elettrodi e il passaggio 4 verifica se gli elettrodi funzionano correttamente. Le fasi 5-6 descrivono in dettaglio la procedura di incisione chirurgica nella parte anteriore del collo e delle arterie vertebrali bilaterali (VA) per l'elettrocoagulazione. Le frecce e gli archi gialli indicano i siti chiave per l'elettrocoagulazione. I fili di seta vengono utilizzati per simulare il passaggio dell'arteria vertebrale attraverso la colonna vertebrale, fornendo un'indicazione più chiara della posizione caratteristica dell'arteria vertebrale elettrocoagulata. Le fasi 7-9 descrivono i protocolli per la legatura delle arterie carotidi comuni bilaterali (CCA) per indurre il coma. Tutte le procedure aderiscono alle linee guida sull'uso degli animali. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67161/67161fig01large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67161/67161fig02.jpg"> Figura 2: L'elettroencefalogramma (EEG) e l'elettromiogramma (EMG) passano dal coma al recupero. (A) Forma d'onda dell'EEG, dell'EMG e dei livelli di attività nei ratti durante il coma ischemico cerebrale. (B) Diagramma dell'EEG, dell'EMG e dei livelli di attività nei ratti in transizione dal coma al risveglio. L'intero processo dura circa 90 minuti. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67161/67161fig02large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>

Modello di coma ischemico cerebrale indotto da occlusione a quattro vasi modificata

Coma caused by cerebral ischemia is the most serious complication of cerebral ischemia. Four-vessel occlusion can establish a cerebral ischemic coma model ...

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Induzione chirurgica del danno ischemico cerebrale nel ratto è un modello ampiamente utilizzato per la ricerca ictus. Qui mostriamo l'induzione di ischemia cerebrale focale da occlusione dell'arteria cerebrale media. Visualizzazione delle infarto risultante dalla colorazione istologica e la risonanza magnetica è anche mostrato.

Modello di ischemia cerebrale focale da occlusione endovascolare Sutura della arteria cerebrale media nel ratto

Dimostriamo nel video un metodo per produrre una occlusione dell'arteria cerebrale media in topi adulti utilizzando un monofilamento intraluminale. Mostriamo anche come valutare il grado di infarto cerebrale da 2,3,5-trifeniltetrazolio cloruro (TTC) colorazione.

Modello murino di Mezzo occlusione dell&#39;arteria cerebrale

Questo video mostra la procedura di esecuzione dell'occlusione permanente dell'arteria cerebrale media distale, o MCAO, con l'arteria carotide comune, o legatura CCA, nei ratti anziani per modellare l'ictus ischemico. Questo blocca il flusso sanguigno al cervello, portando alla morte neuronale e generando un modello per studiare i meccanismi dell'ictus e i potenziali trattamenti.

Indurre l'ischemia attraverso l'occlusione dell'arteria carotide media e comune in un modello di ratto

Occlusione carotidea bilaterale accoppiato con ipotensione sistemica produce ischemia cerebrale globale nel ratto, con conseguenti danni al dell'ippocampo con severità riproducibile. Soggetti animali sono compromesse con modelli prevedibili di danni cerebrali, si riprendono speditamente, ed i tassi di mortalità sono relativamente bassi.

2-occlusione di vasi / Ipotensione: un modello di ratto di Global Ischemia cerebrale

Descriviamo un metodo altamente riproducibile per l'occlusione permanente di un roditore grande vaso sanguigno cerebrale. Questa tecnica può essere realizzato con pochissima danni periferici, minima perdita di sangue, un elevato tasso di sopravvivenza a lungo termine, e volume dell'infarto coerente commisurato alla popolazione clinica umana.

Cerebrale permanente occlusione di vasi<em&gt; Via</em&gt; Doppio Legatura e resezione

Descriviamo un modello murino di ictus indotto dall'occlusione dell'arteria cerebrale media utilizzando una sutura rivestita di silicone. Il protocollo può essere applicato per indurre un'occlusione permanente o un'ischemia temporanea, seguita da riperfusione.

Induzione di ictus ischemico e di ischemia-riperfusione nei topi mediante la tecnica di occlusione dell&#39;arteria Medio e visualizzazione di Infarct Area

Un modello murino di ischemia-riperfusione cerebrale è istituito per studiare la patofisiologia del colpo. Abbiamo distalmente legare l'arteria cerebrale centrale di destra e l'arteria carotica comune di destra e ripristinare il flusso sanguigno dopo 10 o 40 min di ischemia.

Occlusione del vaso due Mouse modello di Ischemia-riperfusione cerebrale

Diversi modelli di occlusione dell'arteria cerebrale media (MCAo) sono utilizzati nella ricerca sperimentale sull'ictus. Qui, viene descritto un modello sperimentale di ictus di MCAo transitorio attraverso l'arteria carotide esterna (ECA), che mira a imitare l'ictus umano, in cui il trombo cerebrovascolare viene rimosso a causa della lisi spontanea del coagulo o della terapia.

Modellazione dell'ictus nei topi: occlusione transitoria dell'arteria cerebrale media attraverso l'arteria carotide esterna

Questo protocollo descrive il modello di ischemia cerebrale focale transitoria nei topi attraverso l'occlusione intraluminale dell'arteria cerebrale media. Inoltre, vengono mostrati esempi di valutazione dei risultati utilizzando la risonanza magnetica per immagini e test comportamentali.

Modello transitorio di occlusione dell'arteria cerebrale media dell'ictus

Il protocollo attuale descrive un modello di ratto di occlusione/riperfusione dell'arteria cerebrale media che preserva la struttura anatomica dei vasi cerebrali senza causare danni.

Un modello di ratto di occlusione/riperfusione dell'arteria cerebrale media senza danneggiare la struttura anatomica dei vasi cerebrali

Questo protocollo descrive il processo di preparazione alla riperfusione dell'occlusione dell'arteria cerebrale media attraverso l'arteria carotide comune.

Una preparazione del modello modificata per la riperfusione dell'occlusione dell'arteria cerebrale media

Impara a indurre un modello di coma ischemico cerebrale nei ratti utilizzando una tecnica modificata di occlusione a quattro vasi. Questo metodo semplice riduce i traumi secondari e facilita lo studio dei meccanismi patologici.

Modello di coma ischemico cerebrale indotto da occlusione a quattro vasi modificata

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