Name: Modellazione del glicocalice endoteliale post-pneumonectomia in un chip fluidico 3D - Un approccio alla fabbricazione di un sistema organo-on-chip basato su vasi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-09-16T13:20:00.000+00:00
Duration: 6 min 12 s
Description: Scopri la modellazione del glicocalice endoteliale post-pneumonectomia in un chip fluidico 3D. Questo metodo organo-on-chip migliora la rappresentazione vascolare rispetto alle tecniche convenzionali.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Sharma, S., Beshara, M., Bora, V. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSharma%2C+S+%22Pneumonectomy%22">Pneumonectomy</a>. , StatPearls Publishing LLC. (2024).</li>
<li>Grapatsas, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pneumonectomy+for+primary+lung+tumors+and+pulmonary+metastases%3A+a+comprehensive+study+of+postoperative+morbidity%2C+early+mortality%2C+and+preoperative+clinical+prognostic+factors%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Oncol%22%5BJournal%5D)">Pneumonectomy for primary lung tumors and pulmonary metastases: a comprehensive study of postoperative morbidity, early mortality, and preoperative clinical prognostic factors.</a> Curr. Oncol. 30 (11), 9458-9474 (2023).</li>
<li>Lucas, G. F. N., James, M. I., David, R. J., Victor, E. L. Chapter 24. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aLucas%2C+GFN+%22Topics+in+thoracic+surgery%22">Topics in thoracic surgery</a>. Guerreiro Cardoso, P. F. , IntechOpen. (2012).</li>
<li>Sentenac, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+hypertension+after+pneumonectomy%3A+a+preclinical+model+in+rats+and+human+pulmonary+endothelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Cardiothorac.+Surg%22%5BJournal%5D)">Pulmonary hypertension after pneumonectomy: a preclinical model in rats and human pulmonary endothelial cells.</a> Eur. J. Cardiothorac. Surg. 59 (1), 147-154 (2020).</li>
<li>Russo, T. A., Banuth, A. M. M., Nader, H. B., Dreyfuss, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Altered+shear+stress+on+endothelial+cells+leads+to+remodeling+of+extracellular+matrix+and+induction+of+angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Altered shear stress on endothelial cells leads to remodeling of extracellular matrix and induction of angiogenesis.</a> PLoS One. 15 (11), e0241040(2020).</li>
<li>Milusev, A., Rieben, R., Sorvillo, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+endothelial+glycocalyx%3A+a+possible+therapeutic+target+in+cardiovascular+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Cardiovasc.+Med%22%5BJournal%5D)">The endothelial glycocalyx: a possible therapeutic target in cardiovascular disorders.</a> Front. Cardiovasc. Med. 9, e897087(2022).</li>
<li>Vittum, Z., Cocchiaro, S., Mensah, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Basal+endothelial+glycocalyx%27s+response+to+shear+stress%3A+a+review+of+structure%2C+function%2C+and+clinical+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Cell+Dev.+Biol%22%5BJournal%5D)">Basal endothelial glycocalyx's response to shear stress: a review of structure, function, and clinical implications.</a> Front. Cell Dev. Biol. 12, e1371769(2024).</li>
<li>Villalba, N., Baby, S., Yuan, S. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+endothelial+glycocalyx+as+a+double-edged+sword+in+microvascular+homeostasis+and+pathogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Cell+Dev.+Biol%22%5BJournal%5D)">The endothelial glycocalyx as a double-edged sword in microvascular homeostasis and pathogenesis.</a> Front. Cell Dev. Biol. 9, e711003(2021).</li>
<li>Harding, I. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+barrier+reinforcement+relies+on+flow-regulated+glycocalyx%2C+a+potential+therapeutic+target%5BTitle%5D)+AND+%22Biorheology%22%5BJournal%5D)">Endothelial barrier reinforcement relies on flow-regulated glycocalyx, a potential therapeutic target.</a> Biorheology. 56 (2-3), 131-149 (2019).</li>
<li>Alphonsus, C. S., Rodseth, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+endothelial+glycocalyx%3A+a+review+of+the+vascular+barrier%5BTitle%5D)+AND+%22Anaesthesia%22%5BJournal%5D)">The endothelial glycocalyx: a review of the vascular barrier.</a> Anaesthesia. 69 (7), 777-784 (2014).</li>
<li>Möckl, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+emerging+role+of+the+mammalian+glycocalyx+in+functional+membrane+organization+and+immune+system+regulation%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Cell+Dev.+Biol%22%5BJournal%5D)">The emerging role of the mammalian glycocalyx in functional membrane organization and immune system regulation.</a> Front. Cell Dev. Biol. 8, e00253(2020).</li>
<li>Nian, K., Harding, I. C., Herman, I. M., Ebong, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood-brain+barrier+damage+in+ischemic+stroke+and+its+regulation+by+endothelial+mechanotransduction%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Blood-brain barrier damage in ischemic stroke and its regulation by endothelial mechanotransduction.</a> Front. Physiol. 11, 605398(2020).</li>
<li>Dietz, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathophysiology+of+postpneumonectomy+pulmonary+edema%5BTitle%5D)+AND+%22Semin.+Cardiothorac.+Vasc.+Anesth%22%5BJournal%5D)">Pathophysiology of postpneumonectomy pulmonary edema.</a> Semin. Cardiothorac. Vasc. Anesth. 4 (1), 31-35 (2000).</li>
<li>Bozlar, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+artery+diameters+measured+by+multidetector-row+computed+tomography+in+healthy+adults%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Radiol%22%5BJournal%5D)">Pulmonary artery diameters measured by multidetector-row computed tomography in healthy adults.</a> Acta Radiol. 48 (10), 1086-1091 (2007).</li>
<li>Schindelin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fiji%3A+an+open-source+platform+for+biological-image+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Fiji: an open-source platform for biological-image analysis.</a> Nat Methods. 9 (7), 676-682 (2012).</li>
<li>Kataoka, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescent+imaging+of+endothelial+glycocalyx+layer+with+wheat+germ+agglutinin+using+intravital+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Microsc.+Res.+Tech%22%5BJournal%5D)">Fluorescent imaging of endothelial glycocalyx layer with wheat germ agglutinin using intravital microscopy.</a> Microsc. Res. Tech. 79, 31-37 (2016).</li>
<li>Wood, K. M., Stone, G. M., Peppas, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wheat+germ+agglutinin+functionalized+complexation+hydrogels+for+oral+insulin+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Biomacromolecules%22%5BJournal%5D)">Wheat germ agglutinin functionalized complexation hydrogels for oral insulin delivery.</a> Biomacromolecules. 9 (4), 1293-1298 (2008).</li>
<li>Tarnowski, B. I., Spinale, F. G., Nicholson, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DAPI+as+a+useful+stain+for+nuclear+quantitation%5BTitle%5D)+AND+%22Biotech.+Histochem%22%5BJournal%5D)">DAPI as a useful stain for nuclear quantitation.</a> Biotech. Histochem. 66 (6), 297-302 (1991).</li>
<li>Emde, B., Heinen, A., Gödecke, A., Bottermann, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wheat+germ+agglutinin+staining+as+a+suitable+method+for+detection+and+quantification+of+fibrosis+in+cardiac+tissue+after+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Histochem%22%5BJournal%5D)">Wheat germ agglutinin staining as a suitable method for detection and quantification of fibrosis in cardiac tissue after myocardial infarction.</a> Eur. J. Histochem. 58 (4), 2448(2014).</li>
<li>Hu, Z., Cano, I., D'Amore, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Update+on+the+role+of+the+endothelial+glycocalyx+in+angiogenesis+and+vascular+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Cell+Dev.+Biol%22%5BJournal%5D)">Update on the role of the endothelial glycocalyx in angiogenesis and vascular inflammation.</a> Front. Cell Dev. Biol. 9, e734276(2021).</li>
<li>Choi, J., Lee, E. J., Jang, W. B., Kwon, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+biocompatible+3D-printed+artificial+blood+vessels+through+multidimensional+approaches%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Funct.+Biomater%22%5BJournal%5D)">Development of biocompatible 3D-printed artificial blood vessels through multidimensional approaches.</a> J. Funct. Biomater. 14 (10), e14100497(2023).</li>
<li>Fallon, M. E., Mathews, R., Hinds, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+flow+chamber+design+for+the+study+of+endothelial+cell+%28patho%29physiology%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biomech.+Eng%22%5BJournal%5D)">In vitro flow chamber design for the study of endothelial cell (patho)physiology.</a> J. Biomech. Eng. 144 (2), e4051765(2021).</li>
<li>Basehore, S., Garcia, J., Clyne, A. M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBasehore%2C+S+%22The+science%2C+etiology+and+mechanobiology+of+diabetes+and+its+complications%22">The science, etiology and mechanobiology of diabetes and its complications</a>. Gefen, A. , Acad. Press. 291-312 (2021).</li>
</ol>

La pneumectomia è un intervento chirurgico invasivo e ad alto rischio eseguito per estrarre il polmone destro o sinistro1. Questa procedura è tipicamente utilizzata come opzione di trattamento per vari disturbi gravi come il cancro ai polmoni, la tubercolosi polmonare e le lesioni polmonari traumatiche2. Sebbene la procedura sia promettente, pone rischi significativi, evidenziati dall'aumento dei tassi di complicanze postoperatorie che vanno dalle aritmie agli edemi polmonari1.
Le pneurectomie hanno un profondo impatto sulla dinamica cardiovascolare dirigendo l'intera gittata cardiaca del cuore nel polmone rimanente3. È noto che questo reindirizzamento del flusso sanguigno aumenta la pressione e le sollecitazioni di taglio all'interno del restante sistema vascolarepolmonare 4. Con queste vaste alterazioni nei modelli di flusso sanguigno, il glicocalice endoteliale (GCX) svolge un ruolo fondamentale nel rilevare questi cambiamenti nei modelli di flusso sanguigno5.
Il GCX è uno strato gelatinoso che regola le attività biochimiche in risposta ai cambiamenti nel suo ambiente 6,7. È stato dimostrato che la sua espressione aumenta con l'esposizione prolungata a un flusso uniforme e diminuisce con l'esposizione a un flusso disturbato rispetto alla coltura statica 8,9. Il GCX presenta uno spessore variabile che va da 0,1 a 1 μm su tutto il sistema vascolare e funziona come uno strato essenziale di meccanotrasduzione che riveste le cellule endoteliali dei vasi sanguigni10. La rete è composta da uno strato denso di zuccheri, lipidi e proteine, come mostrato nella Figura 1. Questi zuccheri si legano per formare glicani, che possono esistere liberamente nel flusso sanguigno o attaccati a proteine o lipidi, con conseguente formazione di proteoglicani, glicoproteine o glicolipidi 7,11. I proteoglicani sono composti da catene di glicosaminoglicani (GAG), che si legano alla membrana cellulare attraverso proteine plasmatiche o recettori. Questi GAG includono l'eparan solfato (HS), l'acido ialuronico (HA), il condroitina solfato (CS), il dermatan solfato e il cheratan-solfato12. L'eparan solfato è il GAG predominante, costituendo oltre il 50% del totale dei GAG trovati nel GCX. Queste catene laterali possono legarsi alle proteine del nucleo incorporate, che includono i glipici (ancorati dal glicosilfosfatidilinositolo) e i sindecani (con un dominio che attraversa la membrana), insieme a CD44 (un recettore di adesione superficiale). I complessi sopra descritti svolgono un ruolo cruciale nella regolazione dei fattori di crescita, nelle reazioni antinfiammatorie, nella facilitazione della dilatazione dei vasi e nel controllo della permeabilità vascolare13.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67246/67246fig1v2.jpg"> 
Figura 1: Diagramma dei componenti GCX. Schema che rappresenta i componenti del glicocalice endoteliale. Questo schema mostra il glicocalice apicale, che si trova sul lume del vaso, mostrando i suoi proteoglicani e glicoproteine legati alla membrana. Creato con BioRender.com <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67246/67246fig1v2large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
Sebbene la connessione precisa tra pneumonectomie e danno da GCX non sia ben studiata, esiste una correlazione plausibile tra i modelli di flusso sanguigno alterati indotti dalle polmonictomie e l'integrità del GCX. È noto che il flusso sanguigno disturbato nel sistema vascolare infligge danni al GCX6. Abbiamo ipotizzato che l'aumento del flusso disturbato e i cambiamenti nello stress di taglio nel sistema vascolare rimanente a seguito di una pneumectomia possano infliggere danni al GCX nel tempo. Questo deterioramento accelerato può catalizzare complicanze e morbilità postoperatorie, aumentando così i rischi intrinseci per la salute generale del paziente13.
Questo protocollo mirava a modellare la vascolarizzazione polmonare dopo la pneutectomia, seguendo la procedura generale delineata nella Figura 2. Le simulazioni dei fluidi sono state condotte su un modello di progettazione assistita da computer che replica la vascolarizzazione polmonare umana con e senza pneumectomia. I modelli di pneumonectomia sono stati creati progettando la vascolarizzazione polmonare 3D in un software di modellazione 3D, sulla base di dimensioni derivate da scansioni TC e dati di letteratura, per poi semplificarli ulteriormente per le simulazioni di flusso in software di fluidodinamica computazionale (CFD). Le simulazioni hanno identificato aree di interesse specifiche, scelte in base alle aree in cui lo stress di taglio era aumentato nei modelli di pneumonectomia rispetto al controllo. Queste aree di interesse sono state scelte per replicare per la costruzione di un modello in vitro . Il modello in vitro ha utilizzato un design a camera fluidica per simulare più sezioni di vascolarizzazione con geometria normale e geometria della pneumonectomia per simulare la differenza nelle condizioni di flusso.
Le cellule endoteliali microvascolari del polmone umano (HLMVEC) sono state coltivate su substrati di polidimetilsilossano (PDMS) rivestiti di fibronectina, modellati per imitare una regione di biforcazione selezionata. I terreni di coltura di cellule endoteliali microvascolari sono stati perfusi attraverso il sistema utilizzando una pompa peristaltica. Infine, le cellule e GCX sono state fissate, immunocolorate con un anticorpo colorante con GCX e visualizzate utilizzando un microscopio a fluorescenza per valutare le loro condizioni dopo l'esposizione al flusso di fluido. Una cronologia generale del protocollo è disponibile nella Tabella 1.
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67246/67246fig2.jpg"> 
Figura 2: Sequenza di sviluppo OOC. Sequenza di sviluppo di un nuovo sistema OOC per studiare gli effetti della pneumonectomia polmonare (1) TAC generata dal sistema vascolare polmonare umano. (2) Geometria della scansione CT utilizzata per identificare le regioni di interesse per il modello CAD 3D. (3) Simulazioni del flusso dei fluidi per determinare le geometrie di interesse per il modello in vitro . (4) Stampo PDMS modellato contenente aree di interesse dai risultati della simulazione (5) Stampo inserito in una custodia acrilica per fissare lo stampo per la perfusione (6) Configurazione completa della camera di flusso (7) Configurazione completa della camera di flusso trasferita all'incubatore (8) Immagini in campo chiaro e fluorescenti scattate dopo l'esposizione a sollecitazioni di taglio. Creato con BioRender.com <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67246/67246fig2large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
Tabella 1: Cronologia generale del protocollo. Sequenza generale di esecuzione dei passaggi all'interno del protocollo con durata media (h) di ogni passaggio. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67246/Table%201.xlsx" target="_blank">Clicca qui per scaricare questa tabella.</a>

<table><tbody><tr><td>#8-32 x 3/4 pollici Vite a macchina zincata a testa tonda Combo (confezione da 8)</td><td>Everbilt</td><td>204274613</td><td>-</td></tr><tr><td>0,25% EDTA-tripsina</td><td>ThermoFisher Scientifico</td><td>25200056&nbsp;</td><td>-</td></tr><tr><td>Provette da centrifuga sterili coniche in polipropilene da 15 ml</td><td>Termo Scientifico</td><td>12-565-269</td><td>-</td></tr><tr><td>Piatto 35x10mm, Nunclon Delta</td><td>Termo Scientifico</td><td>153066</td><td>-</td></tr><tr><td>Provette da centrifuga sterili coniche in polipropilene da 50 ml</td><td>Termo Scientifico</td><td>12-565-271</td><td>-</td></tr><tr><td>Tappi in gomma assortiti</td><td>Fisherbrand</td><td>14-132</td><td></td></tr><tr><td>Fiasche trattate per colture cellulari BioLite (25cm^2)</td><td>Termo Scientifico</td><td>12-556-009</td><td>-</td></tr><tr><td>Fiasche trattate per colture cellulari BioLite (75cm^2)</td><td>Termo Scientifico</td><td>12-556-010</td><td>-</td></tr><tr><td>COMSOL Multiphysics</td><td>IL BAGNO</td><td>N/A</td><td>-</td></tr><tr><td>Biadesivo&nbsp;</td><td>3M</td><td>16758005</td><td>-</td></tr><tr><td>Epredia Richard-Allan Scientific Cover Glass&nbsp;</td><td>Termo Scientifico</td><td>22-050-218</td><td>-</td></tr><tr><td>Siero fetale bovino</td><td>ThermoFisher Scientific&nbsp;</td><td>A5256701&nbsp;</td><td>-</td></tr><tr><td>Fibronectina</td><td>ThermoFisher Scientific&nbsp;</td><td>33016015&nbsp;</td><td>20 &mu; diluizione g/mL</td></tr><tr><td>Bagnomaria a controllo digitale Isotemp Fisherbrand: Modello 210</td><td>Fisherbrand</td><td>15-462-10Q</td><td>-</td></tr><tr><td>Fisherbrand Siringa sterile (60mL)</td><td>Fisherbrand</td><td>14-955-461</td><td>-</td></tr><tr><td>Cellule endoteliali microvascolari polmonari umane</td><td>Sigma Aldrich</td><td>540-05A&nbsp;</td><td>-</td></tr><tr><td>Microscopio a fluorescenza Keyence BZX810</td><td>Keyence</td><td>N/A</td><td>-</td></tr><tr><td>Kit elastometro siliconico Krayden Dow Sylgard 184. Trasparente, (1,1 libbre)</td><td>Dow</td><td>4019862</td><td>-</td></tr><tr><td>Lastra acrilica colata Marga Cipta spessore 1/2', 48x96'</td><td>Marga Cipta</td><td>N/A</td><td>-</td></tr><tr><td>Testa della pompa Masterflex L/S Easy-Load II</td><td>Impianto MasterFlex</td><td>77200-50</td><td></td></tr><tr><td>Tubo per pompa di precisione Masterflex L/S, silicone polimerizzato al platino, L/S 16; 25 piedi</td><td>Impianto MasterFlex</td><td>96410-16</td><td>-</td></tr><tr><td>Pompa peristaltica standard Masterflex L/S</td><td>Azienda Masterflex</td><td>07522-20</td><td></td></tr><tr><td>Micropipetta da 0,2 a 2 &mu; L</td><td>Fisherbrand</td><td>FBE00002</td><td>-</td></tr><tr><td>Micropipetta da 10 a 100 &mu; L</td><td>Fisherbrand</td><td>FBE00100</td><td>-</td></tr><tr><td>Micropipetta da 100 a 1000 &mu; L</td><td>Fisherbrand</td><td>FBE01000</td><td>-</td></tr><tr><td>Micropipetta da 5 a 50 &mu; L</td><td>Fisherbrand</td><td>FBE00050</td><td>-</td></tr><tr><td>Terreno di crescita delle cellule endoteliali microvascolari (500 ml)</td><td>Sigma - Aldrich</td><td>111-500</td><td>-</td></tr><tr><td>Filtri per siringhe sterili Nalgene</td><td>Termo Scientifico</td><td>725-2520</td><td>-</td></tr><tr><td>Nikon Eclipse TS-100 Microscopio a fluorescenza</td><td>Nikon</td><td>NI-TS100</td><td></td></tr><tr><td>Soluzione salina tamponata con fosfato (DPBS, 10X), formula di Dulbecco</td><td>Termo Scientifico</td><td>J61917. K3</td><td>-</td></tr><tr><td>Prusament PLA Prusa Galaxy Nero 1kg</td><td>Prusa</td><td>PRM-PLA-GLX-1000</td><td>-</td></tr><tr><td>Microscopio ibrido Rebel, verticale e invertito, scopri Echo</td><td>ECO</td><td>76376-746</td><td>-</td></tr><tr><td>Sigillante siliconico&nbsp;</td><td>Loctite</td><td>908570</td><td>-</td></tr><tr><td>SolidWorks</td><td>Dassault Systèmes</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Pipette sierologiche monouso sterili in polistirene con striscia di ingrandimento (10 ml)</td><td>Fisherbrand</td><td>13-678-11E</td><td>-</td></tr><tr><td>Pipette sierologiche monouso sterili in polistirene con striscia di ingrandimento (25mL)</td><td>Fisherbrand</td><td>13-678-11</td><td>-</td></tr><tr><td>Pipette sierologiche monouso sterili in polistirene con striscia di ingrandimento (50 ml)</td><td>Fisherbrand</td><td>13-678-11F</td><td>-</td></tr><tr><td>Pipette sierologiche monouso sterili in polistirene con striscia di ingrandimento (5mL)</td><td>Fisherbrand</td><td>13-678-11D</td><td>-</td></tr><tr><td>Streptavidina, Alexa Fluor 488 coniugato</td><td>Invitrogen&nbsp;</td><td>S32354</td><td></td></tr><tr><td>Streptavidina, Alexa Fluor 488 coniugato</td><td>Invitrogen</td><td>S32354</td><td>-</td></tr><tr><td>Siringa di ricerca&nbsp;</td><td>BD</td><td>300865</td><td></td></tr><tr><td>Thermo Scientific Alfa Aesar 1LT Albumina, Bovino, Frazione V, 35% soln., Reagente, Senza Acidi Grassi, con azide come conservante</td><td>Termo Scientifico</td><td>N12H004</td><td>-</td></tr><tr><td>Connettori per tubi</td><td>Fisherbrand</td><td>01-000-161</td><td>-</td></tr><tr><td>Supporto di montaggio antifading VECTASHIELD con DAPI&nbsp;</td><td>Vectashield</td><td>H-1200-10</td><td>-</td></tr><tr><td>Incubatore VWR CO2 con rivestimento ad acqua</td><td>Avantar&nbsp;</td><td>10810-744&nbsp;</td><td>-</td></tr><tr><td>Anticorpo biotinilato WGA</td><td>Vettore</td><td>B-1025</td><td>-</td></tr></tbody></table>

modellazione del glicocalice endoteliale post-pneumonectomia in un chip fluidico 3d - un approccio alla fabbricazione di un sistema organo-on-chip basato su vasi

Modeling the Endothelial Glycocalyx Post-Pneumonectomy in a 3D Fluidic Chip - An Approach to Fabricating a Vascular-based Organ-on-Chip System

I risultati dello studio allo stato stazionario a flusso laminare di simulazione dei fluidi hanno mostrato un aumento dello sforzo di taglio in alcune biforcazioni nei modelli di pneumonectomia rispetto al modello di controllo, mostrato nella Figura 11. Visualizzate nel passaggio 2.8 del protocollo, le aree rosse denotano aree di elevata sollecitazione di taglio, mentre le aree blu mostrano aree di bassa sollecitazione di taglio.
<p class="jove_content biglegend" fo:keep-together.within-...

Modellazione del glicocalice endoteliale post-pneumonectomia in un chip fluidico 3D - Un approccio alla fabbricazione di un sistema organo-on-chip basato su vasi

Endothelial glycocalyx (GCX), a carbohydrate-rich layer coating the luminal surface of endothelial cells, plays a pivotal role in regulating cellular ...

modeling-endothelial-glycocalyx-post-pneumonectomy-3d-fluidic-chip-an

Research

Ricerca

JoVE Journal

Bioengineering

Bioingegneria

Camere di flusso Microfluidic incisi da fotolitografia e fabbricati da PDMS sono applicate per sondare gli esiti funzionali associati alla disfunzione CE e l'infiammazione. In un esperimento rappresentativo, la capacità di sforzo di taglio differenziale di modulare l'adesione cellulare monocitica di citochina attivato CE monostrati è dimostrata.

On-Chip Fenotipizzazione Endothelial infiammatoria

Una piattaforma microcanali-on-a-chip è stato sviluppato dalla combinazione di tecnica fotolitografica reflowable photoresist, litografia soft, e microfluidica. La piattaforma microcanali endothelialized imita il tridimensionale (3D) geometria in vivo microvasi, corre sotto flusso perfusione continua controllato, permette l'imaging di alta qualità e in tempo reale e può essere applicato per la ricerca microvascolare.

Procedura per lo sviluppo di multi-profondità circolare a sezione trasversale Endothelialized microcanali-on-a-chip

Questo protocollo delinea l'implementazione della degradazione dell'idrogel basata su laser guidata da immagini per fabbricare reti microfluidiche biomimetiche di derivazione vascolare incorporate in idrogel di poli(etilenglicole) diacrilato (PEGDA). Questi sistemi microfluidici biomimetici possono essere utili per applicazioni di ingegneria tissutale, generazione di modelli di malattie in vitro e fabbricazione di dispositivi avanzati "on-a-chip".

Immagine-guidate, Fabrication laser a base di reti microfluidici vascolare-derivati

Qui, presentiamo un protocollo che descrive la fabbricazione di estensibile, bicanale, dispositivi organo chip microfluidici cella cultura per ricapitolare la funzionalità a livello dell'organo in vitro.

Fabbricazione scalabile di Stretchable, Dual Channel, organo di Microfluidic chip

L'obiettivo di questo protocollo è quello di biostampare direttamente le cellule epiteliali del seno come sferoidi multicellulari su reti endoteliali pre-formate per creare rapidamente modelli di co-coltura endoteliale del seno 3D che possono essere utilizzati per studi di screening farmacologico.

Biostampa diretta di Sferoidi mammari multicellulari 3D su reti endoteliali

Qui forniamo un chip microfluidico e un sistema microfluidico di circolazione automaticamente controllato e altamente efficiente che ricapitola il microambiente iniziale della neovascolarizzazione, consentendo alle cellule endoteliali (EC) di essere stimolate da elevate sollecitazioni di taglio luminali, livello fisiologico di flusso transendoteliale e distribuzione simultanea di vari fattori di crescita endoteliali vascolari (VEGF).

Modello microfluidico per imitare l&apos;evento iniziale di neovascolarizzazione

Qui, presentiamo un protocollo per generare un modello di pelle tridimensionale semplificato e indifferenziato utilizzando una piattaforma microfluidica microlavorazione. Un approccio a flusso parallelo consente la deposizione in situ di un compartimento dermico per la semina di cellule epiteliali sulla parte superiore, il tutto controllato da pompe a siringa.

Generazione di un modello skin-on-a-chip tridimensionale semplificato in una piattaforma microfluidica microlavorazione

L'obiettivo di questo protocollo è spiegare e dimostrare lo sviluppo di un modello microfluidico tridimensionale (3D) di tessuto cardiaco umano altamente allineato, composto da cardiomiociti derivati da cellule staminali co-coltivati con fibroblasti cardiaci (FF) all'interno di un idrogel biomimetico a base di collagene, per applicazioni nell'ingegneria dei tessuti cardiaci, nello screening dei farmaci e nella modellazione delle malattie.

Sviluppo di tessuto cardiaco umano organizzato in 3D all'interno di una piattaforma microfluidico

Il presente protocollo descrive le capacità e le modalità di coltura essenziali dell'Open-Top Organ-Chip per il successo della creazione e della maturazione di colture organo-on-chip a tutto spessore di tessuti primari (pelle, alveolo, vie aeree e intestino), fornendo l'opportunità di indagare diversi aspetti funzionali dell'interfaccia di nicchia epiteliale/mesenchimale e vascolare umana in vitro.

Ricostituzione della citoarchitettura e della funzione dei tessuti epiteliali umani su un chip d'organo open-top

I modelli Lung-on-chip superano le tradizionali colture 2D imitando l'interfaccia aria-liquido e la perfusione delle cellule endoteliali, simulando il flusso sanguigno e lo scambio di nutrienti cruciali per gli studi di fisiologia polmonare. Ciò migliora la rilevanza della ricerca polmonare, offrendo un ambiente dinamico e fisiologicamente accurato per far progredire la comprensione e il trattamento delle infezioni respiratorie.

Modello immunocompetente di alveoli su chip per lo studio delle risposte immunitarie della mucosa alveolare

Presentiamo un protocollo per la produzione ad alta produttività di canali vascolari con dimensioni flessibili e modelli desiderati su una piastra standard a sei pozzetti utilizzando la tecnologia di bioprinting 3D, denominata vessels-on-a-plate (VOP). Questa piattaforma ha il potenziale per far progredire lo sviluppo di terapie per i disturbi associati all'endotelio compromesso.

Metodo di bioprinting ad alta produttività per la modellazione della permeabilità vascolare in piastre standard a sei pozzetti con flessibilità di dimensioni e modelli

Scopri la modellazione del glicocalice endoteliale post-pneumonectomia in un chip fluidico 3D. Questo metodo organo-on-chip migliora la rappresentazione vascolare rispetto alle tecniche convenzionali.

Modellazione del glicocalice endoteliale post-pneumonectomia in un chip fluidico 3D - Un approccio alla fabbricazione di un sistema organo-on-chip basato su vasi (Video) | JoVE Journal

Modellazione del glicocalice endoteliale post-pneumonectomia in un chip fluidico 3D - Un approccio alla fabbricazione di un sistema organo-on-chip basato su vasi

Esplora altri video