Name: Identificazione e quantificazione di metaboliti squilibrati in pazienti critici utilizzando la metabolomica basata sulla risonanza magnetica nucleare (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-11-29T14:20:00.000+00:00
Duration: 11 min 2 s
Description: Scopri la metabolomica basata su risonanza magnetica nucleare per identificare metaboliti squilibrati in pazienti critici con ARDS. Questo metodo supporta diagnosi precoce e terapie personalizzate.

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L'approvazione etica (codice IEC: 2022-71-PhD-126) è stata ottenuta dall'IEC del Sanjay Gandhi Postgraduate Institute of Medical Sciences (SGPGIMS), Lucknow. I consensi scritti e informati sono stati ottenuti dai pazienti o dai loro parenti per eseguire lo studio e pubblicare i dati a scopo di ricerca. Inoltre, la ricerca è stata condotta seguendo le linee guida istituzionali.
1. Disegno dello studio e nulla osta etico
<ol>
	<li>Determinare la dimensione del campione per ciascun gruppo. Esaminare attentamente e stabilire i criteri di selezione dei partecipanti. Inoltre, se il disegno dello studio richiede l'inclusione di campioni umani o animali, ottenere l'autorizzazione etica dal comitato etico istituzionale (IEC) appropriato prima di iniziare la raccolta del campione.</li>
	<li>Selezionare i pazienti con ARDS classificati come lievi, moderati e gravi, in base ai criteri diagnostici della definizione di Berlino 2012 basata sulla pressione parziale dell'ossigeno nel sangue arterioso (PaO2) rispetto al rapporto tra frazione di ossigeno inspirato (FiO2) (P/F). I pazienti con ARDS con un intervallo P/F di 300-200 sono considerati lievi, 200-100 moderati e inferiori a 100 gravi38. Qui, ci siamo concentrati su due gruppi: pazienti con ARDS lieve e moderata (vedi Tabella 1). NOTA: Lo studio prevede l'uso di siero ottenuto da campioni di sangue per eseguire la metabolomica basata sulla risonanza magnetica magnetica. In questo studio, i partecipanti inclusi come riferimento avevano un'età media di 42 anni (± 10,9 anni), con una distribuzione di genere di 2 maschi e 6 femmine.</li>
</ol>

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Categoria</td>
			<td>Rapporto P/F</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lieve</td>
			<td>300-200</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Moderato</td>
			<td>200-100</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forte</td>
			<td>100-0</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabella 1: Categorizzazione dei pazienti con ARDS.
2. Selezione, raccolta ed elaborazione dei campioni
<ol>
	<li>Eseguire l'isolamento del siero seguendo i passaggi descritti di seguito.<ol>
		<li>Per la sperimentazione, raccogliere 2 ml di campioni di sangue dalle arterie utilizzando un ago sterile in una fiala semplice (senza additivi) e sterile. Lasciare coagulare il campione per 30 minuti a temperatura ambiente. Per questo studio, sono stati selezionati 4 pazienti con diagnosi di ARDS lieve e 4 pazienti con ARDS moderata.</li>
		<li>Centrifugare il campione a 3100 x g per 15 minuti per separare il siero25. Trasferire il siero in provette sterili per microcentrifuga, facendo aliquote di volume inferiore (ad es. 400-500 μL), etichettarle in modo appropriato (nome del paziente, numero di CR, punto del giorno, ecc.) e conservarle a -80 °C per analisi future. NOTA: A questo punto, l'esperimento può essere messo in pausa e ripreso in un momento opportuno.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Elaborare il campione di siero prima degli esperimenti NMR utilizzando i seguenti passaggi.<ol>
		<li>Scongelare il campione prima di eseguire gli esperimenti NMR. Miscelare 250 μL di aliquota di siero con 250 μL di soluzione tampone fosfato salino (contenente 100% D2O, 0,9% NaCl, 50 mM di tampone fosfato di sodio, pH 7,4) per ridurre al minimo la variazione del pH.</li>
		<li>Agitare la miscela per alcuni secondi (~15 s) per assicurarsi che sia miscelata in modo omogeneo. Infine, trasferire il campione preparato in una provetta NMR pulita con un inserto coassiale contenente trimetilsilil propionato (TSP) a una concentrazione di 0,05 mM, che funge da standard esterno per la calibrazione e la quantificazione41. NOTA: Come riferimento, viene utilizzato un composto inerte e non reattivo che non interagisce con gli analiti. Altri composti di riferimento comunemente usati includono il tetrametilsilano (TMS) e il trimetilsililpropansulfonato di sodio (DSS).</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
3. Sperimentazione NMR
NOTA: L'obiettivo è identificare piccole molecole nei campioni di siero, quindi abbiamo utilizzato la sequenza di impulsi Carr-Purcell-Meiboom-Gill (CPMG), che sopprime i segnali delle macromolecole. Tutti i campioni di siero in questo studio sono stati registrati utilizzando uno spettrometro NMR da 800 MHz dotato di una testa della sonda inversa a banda larga TCI a tripla risonanza raffreddata criogenicamente da 5 mm e gradiente z schermato.
<ol>
	<li>Posizionare il campione nel magnete. Scrivi il comando wrpa (menziona il numero dell'esperimento) e premi invio per impostare un esperimento protonico con il programma cpmg pulse. Menziona il nome del paziente e altri dettagli necessari facendo clic sull'opzione Titolo.</li>
	<li>Bloccare il campo magnetico Scrivendo il comando Blocca, premere invio, e selezionare ulteriormente l'opzione 90% H2O e 10% D2O . Sintonizza e abbina la sonda manualmente tramite ATMM per ottimizzare l'efficienza degli impulsi a radiofrequenza e massimizzare la sensibilità. Esegui lo spessore sfumato 1D facendo clic su topshim.</li>
	<li>Impostare i seguenti parametri di acquisizione, tra cui un ritardo di rilassamento di 5 s, un'ampiezza di scansione spettrale di 12 parti per milione (ppm) e un tempo di eco di 300 μs. Tutti questi parametri possono essere facilmente modificati selezionando l'opzione Parametri di acquisizione nel pannello superiore.</li>
	<li>Applica l'allargamento della linea di 0,3 Hz utilizzando una funzione di finestra esponenziale, raccogliendo dati in 64.000 punti in 128 scansioni. Questi parametri possono essere modificati in modo analogo selezionando l'opzione Parametri di acquisizione nel pannello superiore. Cliccando su Parametri di acquisizione, apparirà un elenco di specifiche e gli attributi menzionati, insieme ad altri parametri, possono essere modificati durante l'ottimizzazione.</li>
	<li>Acquisisci gli spettri NMR utilizzando strumenti di elaborazione e analisi NMR. Una volta ottenuti gli spettri finali, scrivi i comandi apk e absn e premi invio per eseguire rispettivamente la correzione di fase e la correzione della linea di base. Fare clic sull'opzione Calibra asse presente nel pannello superiore, quindi calibrare il picco TSP a 0 ppm automaticamente o manualmente.</li>
	<li>Trasferire i dati acquisiti dal sistema alla postazione di lavoro, dove vengono eseguite ulteriori elaborazioni e analisi. NOTA: La fase sperimentale è ora completa e può essere messa in pausa. La preelaborazione, l'analisi e l'interpretazione dei dati possono essere eseguite comodamente.</li>
</ol>
4. Pretrattamento dei dati
<ol>
	<li>Condurre la pre-elaborazione dei dati utilizzando strumenti di elaborazione e analisi NMR e software di quantificazione dei metaboliti NMR.<ol>
		<li>A volte, la sola correzione automatica non è sufficiente e, in tal caso, è necessaria anche la correzione manuale. Per eseguire manualmente la correzione di fase, fare clic sull'opzione Elabora nella barra dei menu in alto degli strumenti di elaborazione e analisi NMR. Quindi fare clic su Regola fase, trascinare il mouse e osservare fino a quando gli spettri non vengono corretti in fase. Una volta fatto, fai clic sull'opzione Salva e Torna (presente sotto forma di icona) disponibile nella stessa barra dei menu.</li>
		<li>Per eseguire la correzione manuale della linea di base (metodo Whittaker), aprire il file spettrale nel modulo processore del software di quantificazione dei metaboliti NMR. Selezionare l'opzione Correzione linea di base. Quindi seleziona l'opzione Metodo Whittaker. Ora metti i punti alla base dei picchi in tutti gli spettri (da 0,0 a 10 ppm, di solito nel caso del siero o secondo la disponibilità del metabolita negli spettri) per regolare la base. Dopo che tutti i file spettrali sono stati corretti di baseline, salvateli in un'unica cartella. Un'ulteriore elaborazione, utilizzando il processore o il modulo profiler del software di quantificazione dei metaboliti NMR, può essere eseguita utilizzando lo stesso file salvato nel formato specifico.</li>
		<li>Eseguire il binning utilizzando il modulo profiler dello stesso software. Selezionare l'opzione Strumenti, quindi Elaborazione batch e infine Binning spettrale.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Per generare il foglio di binning finale da utilizzare per l'analisi statistica, selezionare la cartella contenente tutti i file spettrali corretti per la baseline dopo aver fatto clic su Binning spettrale.</li>
	<li>Dividi gli spettri in un determinato numero di contenitori di uguali dimensioni con una larghezza spettrale definita, compresa tra 0,01 e 0,04 ppm (può essere ottimizzata secondo lo studio). Questo processo semplifica e organizza i dati spettrali, facilitando un'analisi più coerente. Specificare la dimensione del secchio insieme ai valori ppm iniziale e finale e designare la cartella in cui verranno salvati i fogli di binning di output.</li>
	<li>Escludere le regioni di spostamento chimico corrispondenti all'acqua e al solvente TSP (4,8-5,2 e 0,0-0,7 ppm) per prevenire l'interferenza spettrale 42,43,44.</li>
	<li>Questo foglio di calcolo contiene i nomi degli esempi in una riga e i diversi valori dei contenitori insieme a ppm nelle altre righe. Prima di utilizzare questo foglio per l'analisi statistica, modificarlo organizzando i campioni in gruppi per l'analisi e salvandolo solo in formato delimitato da virgole (CSV). NOTA: Ad esempio, quando si confronta il gruppo lieve con il gruppo moderato di pazienti con ARDS, abbiamo organizzato i dati con etichette lieve e moderata, abbiamo aggiunto un numero di serie e salvato il file in formato CSV.</li>
</ol>
5. Analisi statistica
NOTA: Il foglio di binning ottenuto dal passaggio precedente funge da file di input per l'analisi statistica. In questo studio è stato utilizzato il modulo di analisi statistica (un fattore) del software di analisi statistica metabolomica.
<ol>
	<li>Prima dell'analisi statistica, eseguire la fase di normalizzazione utilizzando somma, log e Pareto, ma può variare tra i diversi studi45.</li>
	<li>Eseguire analisi univariate e multivariate per distinguere i diversi gruppi e determinare l'accuratezza dei metaboliti identificati.<ol>
		<li>Eseguire l'analisi delle componenti principali (PCA), l'analisi discriminante parziale dei minimi quadrati (PLS-DA) e l'analisi discriminante dei minimi quadrati parziali ortogonali (OPLS-DA) per osservare la discriminazione tra i gruppi che producono punteggi VIP (Variable Importance of Projection) per ogni metabolita responsabile della differenza nel profilo metabolico.</li>
		<li>Eseguire metodi univariati, come il t-test di Student e l'ANOVA, per identificare i metaboliti significativi in base ai criteri di avere un valore p inferiore a 0,05. Entrambi i test producono grafici a scatola che mostrano la differenza nella concentrazione relativa dei metaboliti.</li>
		<li>Eseguire l'analisi dei biomarcatori, che produce un'area sotto il grafico della curva caratteristica operativa del ricevitore (AUROC). Il valore AUC (area sotto la curva) &gt; 0,8 è considerato significativo46.</li>
		<li>Selezionare l'elenco finale dei metaboliti significativi utilizzando i criteri Punteggio VIP&gt;1, valore p corretto per Bonferroni&lt;0,0544 e AUC &gt; 0,846.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Identificare i metaboliti come descritto di seguito.<ol>
		<li>Il binning fornisce metaboliti significativi sotto forma di valori ppm piuttosto che di nomi. Identificare i metaboliti corrispondenti a specifici valori di ppm utilizzando database come la Biological Magnetic Resonance Bank (BMRB)47e lo Human Metabolome Database (HMDB).</li>
		<li>Oltre a questi, utilizzare la letteratura precedentemente pubblicata42,44 per l'identificazione e la convalida.</li>
		<li>Utilizzare il modulo profiler del software di quantificazione dei metaboliti NMR per confermare i metaboliti identificati con i loro valori ppm.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
6. Quantificazione dei metaboliti mediante software di quantificazione dei metaboliti NMR
NOTA: Il modulo profiler del software è ampiamente utilizzato per quantificare i metaboliti identificati.
<ol>
	<li>Prima di iniziare la quantificazione, calibrare il composto di riferimento selezionato per lo studio (tsp utilizzato in questo studio) utilizzando il modulo processore. Fare clic sull'opzione Calibra CSI (indicatore di forma chimica). Indicare la concentrazione del composto di riferimento (0,05 mM per questo studio). Quindi, trascinare il picco del software sul picco di riferimento spettrale e regolarne correttamente l'altezza e la larghezza. Una volta che i picchi di riferimento spettrale si adattano al picco del software, fare clic su Accetta.</li>
	<li>Aprire gli spettri desiderati nel modulo del profilatore e selezionare la libreria di composti appropriata per lo studio.</li>
	<li>Nella parte inferiore dello schermo viene visualizzato un elenco di metaboliti. Seleziona il metabolita di interesse da questo elenco. Una volta selezionato, i possibili ppm del metabolita scelto appariranno nell'angolo superiore degli spettri.</li>
	<li>Seleziona il valore Ppm nell'angolo in alto e ingrandisci gli spettri fino alla scala ppm specifica del metabolita.</li>
	<li>A questo punto, sullo schermo compariranno due picchi: uno che rappresenta i dati registrati e l'altro, visualizzato come una linea tratteggiata, che rappresenta il picco del software. Allineare entrambi i picchi. Trascinare il picco del software e regolarne l'altezza e la posizione in modo che corrispondano al picco presente nel campione.</li>
	<li>Una volta correttamente allineato, la concentrazione del metabolita può essere ottenuta dal valore visualizzato sotto la voce concentrazione in mM per quel metabolita (Figura 1).</li>
	<li>Segui la stessa procedura per tutti i metaboliti e i campioni ed esporta i valori quantificati in un foglio di calcolo. Per generare il file di output, fare clic sull'opzione Operazioni batch nel menu Strumenti . Specificare la cartella desiderata per il salvataggio del file di output.</li>
</ol>
7. Analisi dei percorsi
NOTA: I metaboliti significativi identificati dopo l'analisi vengono utilizzati per determinare i principali percorsi che influenzano direttamente l'esito nei gruppi di malattia. Il modulo di analisi dei percorsi del software di analisi statistica metabolomica e il database KEGG sono generalmente utilizzati per questo scopo.
<ol>
	<li>Inserire l'elenco ottenuto di metaboliti significativi nel modulo. Viene generato un elenco contenente i nomi dei percorsi.</li>
	<li>Selezionare i percorsi finali in base a un criterio di fattore di impatto maggiore di 0,1. Valori di impatto significativi indicano percorsi correlati alla malattia30.</li>
	<li>Analizzare a fondo i percorsi risultanti per chiarire la disregolazione associata alla gravità della malattia. Uno dei demeriti di questo metodo è la sua inefficienza nell'identificare le vie disregolate quando i metaboliti significativi sono inferiori a 3.</li>
	<li>Per far fronte a ciò, il metabolita identificato e la sua correlazione con la gravità della malattia possono essere determinati anche utilizzando la letteratura precedentemente pubblicata. Esegui un'indagine approfondita sulla letteratura e osserva se anche il metabolita identificato sta seguendo la stessa tendenza secondo il tuo interesse.</li>
</ol>
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67319/67319fig01.jpg"> 
Figura 1: Passaggi fondamentali della metabolomica basata sulla risonanza magnetica magnetica. La figura presenta le fasi chiave della metabolomica basata sulla risonanza magnetica nucleare: raccolta e preparazione dei campioni, esecuzione della spettroscopia NMR, pre-elaborazione dei dati, conduzione di analisi statistiche, identificazione e quantificazione dei metaboliti e interpretazione del significato biologico. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67319/67319fig01large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>

<meta charset="utf8"></head><body>Metabolomica utilizzando la spettroscopia NMR per identificare i metaboliti disregolati

<table><tbody><tr><td>Centirfuge</td><td>Sigma aldrich</td><td>3-18KS</td><td></td></tr><tr><td>Chenomx NMR suite&nbsp;</td><td>NMR Suite, v9, Chenomx Inc., Edmonton, Canada</td><td></td><td>Software di quantificazione dei metaboliti NMR</td></tr><tr><td>Inserto coassiale</td><td>Sigma aldrich</td><td>Z278513</td><td></td></tr><tr><td>Ossido di deuterim</td><td>Sigma aldrich</td><td>151882</td><td></td></tr><tr><td>Eppendorf provette</td><td>Tarsons</td><td>500020</td><td></td></tr><tr><td>Metaboanalyst</td><td>Wishart Research Group</td><td></td><td>Software di analisi statistica metabolomica</td></tr><tr><td>Tubo NMR</td><td>Wilmad</td><td>Z412007</td><td>Pipetta da 5 mm di diametro</td></tr><tr><td></td><td>Eppendorf research plus</td><td>3123000039</td><td>0-100 &mu; l</td></tr><tr><td>Fiale di raccolta campioni Fiale</td><td>criogeniche Tarsons</td><td>523194</td><td></td></tr><tr><td>Sodio azide</td><td>Sigma aldrich</td><td>S2002</td><td></td></tr><tr><td>Cristallo di cloruro di sodio</td><td>Sigma aldrich</td><td>S9625</td><td></td></tr><tr><td>Sodio fosfato bibasico</td><td>Sigma aldrich</td><td>567550</td><td></td></tr><tr><td>Sodio fosfato monobasico</td><td>Sigma aldrich</td><td>S0751</td><td></td></tr><tr><td>Topspin 3.6.4</td><td>Strumento di elaborazione e analisi RMN</td><td>Bruker</td><td></td></tr><tr><td>Sale Tsp</td><td>Sigma aldrich</td><td>269913</td><td></td></tr></tbody></table>

identificazione e quantificazione di metaboliti squilibrati in pazienti critici utilizzando la metabolomica basata sulla risonanza magnetica nucleare

Identification and Quantification of Deranged Metabolites in Critically Ill Patients Using NMR-Based Metabolomics

Per condurre uno studio di metabolomica, è essenziale determinare la dimensione del campione e i gruppi specifici che verranno analizzati. La selezione di un campione di dimensioni adeguate è essenziale per ottenere risultati significativi che siano accuratamente correlati alla gravità della malattia48. Tuttavia, in questo particolare lavoro, abbiamo utilizzato un campione di piccole dimensioni per dimostrare i passaggi coinvolti nell'identificazione e nella quantificazione dei metaboliti utilizzando la metabolomica basata sulla risonanza magnetica nucleare, che era destinata principalmente come riferimento. In questo studio, abbiamo esaminato le differenze metaboliche tra i pazienti negli stadi lieve e moderato di ARDS il giorno 1 del loro ricovero in terapia intensiva, includendo un totale di 8 soggetti. Seguendo il protocollo, sono stati acquisiti ed elaborati gli spettri NMR di tutti i campioni e, infine, è stato creato un foglio di calcolo con i risultati del binning.
Abbiamo quindi eseguito una rigorosa analisi statistica, in cui i fogli di binning sono stati utilizzati come file di input, normalizzando i dati utilizzando sum, log e Pareto. Abbiamo condotto PCA (Figura 2A) e OPLS-DA (Figura 2B), dove la prima ha mostrato clustering, ma la seconda ha rivelato una chiara discriminazione tra i gruppi e ha evidenziato differenze metaboliche. L'analisi statistica del test di permutazione (20x) ha prodotto valori di R2Y=0,99 e Q2=0,47. Successivamente, abbiamo eseguito un test t (Figura 2C) e un'analisi dei biomarcatori (Figura 2D) per identificare i metaboliti disregolati. Seguendo i criteri delineati nella sezione del protocollo, abbiamo filtrato i risultati in base ai metaboliti significativi (Tabella 2).
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67319/67319fig02.jpg"> 
Figura 2: Analisi multivariata e univariata. (A) Analisi delle componenti principali (PCA) e (B) Analisi discriminante dei minimi quadrati parziali ortogonali (OPLS-DA) di pazienti con ARDS lieve (rappresentata dal colore rosso) e pazienti con ARDS moderata (rappresentata dal colore verde). (C) I grafici box-cum-whisker evidenziano le differenze nella concentrazione relativa di metaboliti tra pazienti con ARDS lieve e moderata rilevate mediante spettroscopia di risonanza magnetica nucleare protonica in campioni di siero. L'asse x rappresenta i gruppi di studio e l'asse y mostra la concentrazione relativa quando i pazienti con ARDS lieve (rappresentata dal colore rosso) e i pazienti con ARDS moderata (rappresentata dal colore verde) sono stati confrontati il giorno 1 del ricovero in terapia intensiva. (D) Il grafico dell'area sotto la curva (AUC) dei metaboliti significativi che predicono la gravità ottenuto dopo aver eseguito l'analisi dei biomarcatori confrontando i pazienti con ARDS lieve e moderata al giorno 1 del ricovero in terapia intensiva. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67319/67319fig02large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>S.No.</td>
			<td>Nome</td>
			<td>Posizione spettrale (ppm)</td>
			<td>Valore p</td>
			<td>VIP</td>
			<td>Valore AUC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1</td>
			<td>Lattato</td>
			<td>1.34</td>
			<td>0.04</td>
			<td>1.99</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2</td>
			<td>Isoleucina</td>
			<td>1.42</td>
			<td>0.03</td>
			<td>2.01</td>
			<td>0.875</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabella 2: Elenco dei metaboliti significativi ottenuti dopo aver confrontato i pazienti con ARDS lieve e moderata al giorno 1 del ricovero in terapia intensiva.
Poiché i risultati sono stati ottenuti in valori di ppm, abbiamo assegnato i metaboliti utilizzando la letteratura precedente e li abbiamo convalidati attraverso il profiler. Dopo l'assegnazione, il lattato e l'isoleucina sono stati ottenuti come metaboliti significativi, che sono stati riportati anche in alcuni precedenti studi sull'ARDS30,40. Abbiamo assicurato la selezione di picchi ben risolti e non sovrapposti. Dopo l'identificazione, abbiamo filtrato l'elenco dei metaboliti significativi utilizzando i criteri menzionati nel protocollo. Abbiamo quindi quantificato i metaboliti di interesse utilizzando il modulo profiler aprendo gli spettri, cercando il metabolita di interesse e adattando il picco del software al picco ottenuto negli spettri. Ciò ha fornito i valori quantificati dei metaboliti in mM. Come riferimento è stato generato un foglio di calcolo contenente i nomi dei campioni, i nomi dei metaboliti e le concentrazioni. Dopo la quantificazione con il software, è possibile eseguire la validazione attraverso altri approcci, come la proteomica.
Inoltre, i metaboliti identificati vengono analizzati a fondo per determinare la loro correlazione con la gravità della malattia e per identificare i percorsi biochimici in cui questi metaboliti sono attivamente coinvolti. Poiché sono stati identificati solo due metaboliti significativi dopo aver utilizzato i criteri menzionati nella sezione relativa ai materiali e ai metodi, non è stato possibile eseguire l'analisi del percorso utilizzando il software. Pertanto, è stata condotta un'indagine approfondita della letteratura per evidenziare i cicli metabolici squilibrati. I due metaboliti identificati in questo studio sono correlati con successo con la gravità dell'ARDS. L'aumento del lattato denotava infiammazione polmonare e respirazione anaerobica, mentre l'aumento dell'isoleucina indicava un catabolismo proteico associato a lesioni polmonari, infezioni e metabolismo energetico40. La comprensione di queste vie metaboliche ha un duplice scopo. In primo luogo, rivela la complessità della malattia, fornendo informazioni sui suoi meccanismi biologici. In secondo luogo, aiuta i progressi terapeutici guidando i medici nella personalizzazione dei trattamenti per i pazienti, migliorando in ultima analisi i risultati clinici.

Identificazione e quantificazione di metaboliti squilibrati in pazienti critici utilizzando la metabolomica basata sulla risonanza magnetica nucleare

Metabolomics is emerging as a significant approach to reflect the individual's response to pathophysiological conditions. Nuclear magnetic resonance (NMR) ...

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