Name: Quantificazione della modulazione dellattività dellenzima elastasi attraverso lanalisi colorimetrica (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-01-17T13:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 30 s
Description: Impara a quantificare l'attività dell'enzima elastasi tramite analisi colorimetrica per studi di biochimica. Questo metodo semplice e sensibile supera le sfide della colorazione degli estratti vegetali naturali.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>Misurazione della modulazione dell'elastasi: un test colorimetrico per approfondimenti terapeutici

<ol><li>Imokawa, G., Ishida, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biological+mechanisms+underlying+the+ultraviolet+radiation-induced+formation+of+skin+wrinkling+and+sagging+I%3A+Reduced+skin+elasticity%2C+highly+associated+with+enhanced+dermal+elastase+activity%2C+triggers+wrinkling+and+sagging%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Biological mechanisms underlying the ultraviolet radiation-induced formation of skin wrinkling and sagging I: Reduced skin elasticity, highly associated with enhanced dermal elastase activity, triggers wrinkling and sagging.</a> Int J Mol Sci. 16 (4), 7753-7775 (2015).</li>
<li>Voynow, J. A., Shinbashi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil+elastase+and+chronic+lung+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Biomolecules%22%5BJournal%5D)">Neutrophil elastase and chronic lung disease.</a> Biomolecules. 11 (8), 11081065(2021).</li>
<li>Whitcomb, D. C., Lowe, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+pancreatic+digestive+enzymes%5BTitle%5D)+AND+%22Dig+Dis+Sci%22%5BJournal%5D)">Human pancreatic digestive enzymes.</a> Dig Dis Sci. 52 (1), 1-17 (2007).</li>
<li>Heinz, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elastic+fibers+during+aging+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Ageing+Res+Rev%22%5BJournal%5D)">Elastic fibers during aging and disease.</a> Ageing Res Rev. 66, 101255(2021).</li>
<li>Antonicelli, F., Bellon, G., Debelle, L., Hornebeck, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elastin-elastases+and+inflamm-aging%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Top+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Elastin-elastases and inflamm-aging.</a> Curr Top Dev Biol. 79, 99-155 (2007).</li>
<li>Desmiaty, Y., Faizatun, F., Noviani, Y., Ratih, H., Ambarwati, N. S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potential+of+natural+products+in+inhibiting+premature+skin+aging%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Appl+Pharm%22%5BJournal%5D)">Potential of natural products in inhibiting premature skin aging.</a> Int J Appl Pharm. 14 (Special Issue 3), 1-5 (2022).</li>
<li>Bhatiya, M., Pathak, S., Jothimani, G., Duttaroy, A. K., Banerjee, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comprehensive+study+on+the+anti-cancer+effects+of+quercetin+and+its+epigenetic+modifications+in+arresting+progression+of+colon+cancer+cell+proliferation%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Immunol+Ther+Exp+%28Warsz%29%22%5BJournal%5D)">A comprehensive study on the anti-cancer effects of quercetin and its epigenetic modifications in arresting progression of colon cancer cell proliferation.</a> Arch Immunol Ther Exp (Warsz). 71 (1), 6(2023).</li>
<li>Shen, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Computational+analysis+of+curcumin-mediated+alleviation+of+inflammation+in+periodontitis+patients+with+experimental+validation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Periodontol%22%5BJournal%5D)">Computational analysis of curcumin-mediated alleviation of inflammation in periodontitis patients with experimental validation in mice.</a> J Clin Periodontol. 51 (6), 787-799 (2024).</li>
<li>Yücel, Ç, Karatoprak, G. Ş, Yalçıntaş, S., Böncü, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ethosomal+%28%E2%88%92%29-epigallocatechin-3-gallate+as+a+novel+approach+to+enhance+antioxidant%2C+anti-collagenase+and+anti-elastase+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Beilstein+J+Nanotechnol%22%5BJournal%5D)">Ethosomal (−)-epigallocatechin-3-gallate as a novel approach to enhance antioxidant, anti-collagenase and anti-elastase effects.</a> Beilstein J Nanotechnol. 13, 491-502 (2022).</li>
<li>Wojtkiewicz, A. M., Oleksy, G., Malinowska, M. A., Janeczko, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enzymatic+synthesis+of+a+skin+active+ingredient+-+glochidone+by+3-ketosteroid+dehydrogenase+from+Sterolibacterium+denitrificans%5BTitle%5D)+AND+%22J+Steroid+Biochem+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Enzymatic synthesis of a skin active ingredient - glochidone by 3-ketosteroid dehydrogenase from Sterolibacterium denitrificans.</a> J Steroid Biochem Mol Biol. 241, 106513(2024).</li>
<li>Amnuaykan, P., Juntrapirom, S., Kanjanakawinkul, W., Chaiyana, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+antioxidant%2C+anti-aging%2C+anti-tyrosinase%2C+and+anti-inflammatory+properties+of+Vanda+coerulea+griff.+ex+lindl.+protocorm+through+elicitations+with+chitosan%5BTitle%5D)+AND+%22Plants%22%5BJournal%5D)">Enhanced antioxidant, anti-aging, anti-tyrosinase, and anti-inflammatory properties of Vanda coerulea griff. ex lindl. protocorm through elicitations with chitosan.</a> Plants. 13 (13), 13131770(2024).</li>
<li>Petcharaporn, K., Thongkao, K., Thongmuang, P., Sudjaroen, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nutritional+composition%2C+capsaicin+content+and+enzyme+inhibitory+activities+from+%26%2334%3BBang+Chang%26%2334%3B+thai+cultivar+chili+pepper+%28capsicum+annuum+var.+acuminatum%29+after+drying+process%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Pharm+Qual+Assur%22%5BJournal%5D)">Nutritional composition, capsaicin content and enzyme inhibitory activities from &#34;Bang Chang&#34; thai cultivar chili pepper (capsicum annuum var. acuminatum) after drying process.</a> Int J Pharm Qual Assur. 14 (3), 707-711 (2023).</li>
<li>Jeon, D. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antioxidant+activity+and+inhibitory+effects+of+whitening+and+wrinkle-related+enzymes+of+Polyozellus+multiplex+extracts%5BTitle%5D)+AND+%22J+Food+Meas+Charact%22%5BJournal%5D)">Antioxidant activity and inhibitory effects of whitening and wrinkle-related enzymes of Polyozellus multiplex extracts.</a> J Food Meas Charact. 17 (2), 1279-1288 (2023).</li>
<li>Putri, I. R., Handayani, R., Elya, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-elastase+activity+of+rumput+teki+%28Cyperus+rotundus+L.%29+rhizome+extract%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacogn+J%22%5BJournal%5D)">Anti-elastase activity of rumput teki (Cyperus rotundus L.) rhizome extract.</a> Pharmacogn J. 11 (4), 754-758 (2019).</li>
<li>Liyanaarachchi, G. D., Samarasekera, J. K. R. R., Mahanama, K. R. R., Hemalal, K. D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tyrosinase%2C+elastase%2C+hyaluronidase%2C+inhibitory+and+antioxidant+activity+of+Sri+Lankan+medicinal+plants+for+novel+cosmeceuticals%5BTitle%5D)+AND+%22Ind+Crops+Prod%22%5BJournal%5D)">Tyrosinase, elastase, hyaluronidase, inhibitory and antioxidant activity of Sri Lankan medicinal plants for novel cosmeceuticals.</a> Ind Crops Prod. 111, 597-605 (2018).</li>
<li>Apraj, V. D., Pandita, N. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+skin+anti-aging+potential+of+Citrus+reticulata+blanco+peel%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacogn+Res%22%5BJournal%5D)">Evaluation of skin anti-aging potential of Citrus reticulata blanco peel.</a> Pharmacogn Res. 8 (3), 160-168 (2016).</li>
<li>Pandey, B. P., Pradhan, S. P., Adhikari, K., Nepal, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bergenia+pacumbis+from+Nepal%2C+an+astonishing+enzymes+inhibitor%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Complement+Med+Ther%22%5BJournal%5D)">Bergenia pacumbis from Nepal, an astonishing enzymes inhibitor.</a> BMC Complement Med Ther. 20 (1), 198(2020).</li>
<li>Dharwal, V., Sandhir, R., Naura, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PARP-1+inhibition+provides+protection+against+elastase-induced+emphysema+by+mitigating+the+expression+of+matrix+metalloproteinases%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell+Biochem%22%5BJournal%5D)">PARP-1 inhibition provides protection against elastase-induced emphysema by mitigating the expression of matrix metalloproteinases.</a> Mol Cell Biochem. 457 (1-2), 41-49 (2019).</li>
<li>Jugniot, N., Voisin, P., Bentaher, A., Mellet, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil+elastase+activity+imaging%3A+Recent+approaches+in+the+design+and+applications+of+activity-based+probes+and+substrate-based+probes%5BTitle%5D)+AND+%22Contrast+Media+Mol+Imaging%22%5BJournal%5D)">Neutrophil elastase activity imaging: Recent approaches in the design and applications of activity-based probes and substrate-based probes.</a> Contrast Media Mol Imaging. 2019, (2019).</li>
<li>Stone, P. J., Morris, S. M., Thomas, K. M., Schuhwerk, K., Mitchelson, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Repair+of+elastase-digested+elastic+fibers+in+acellular+matrices+by+replating+with+neonatal+rat-lung+lipid+interstitial+fibroblasts+or+other+elastogenic+cell+types%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Cell+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Repair of elastase-digested elastic fibers in acellular matrices by replating with neonatal rat-lung lipid interstitial fibroblasts or other elastogenic cell types.</a> Am J Respir Cell Mol Biol. 17 (3), 289-301 (1997).</li>
<li>Weiss, F. U., Budde, C., Lerch, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Specificity+of+a+polyclonal+fecal+elastase+ELISA+for+CELA3%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Specificity of a polyclonal fecal elastase ELISA for CELA3.</a> PLoS ONE. 11 (7), 0159363(2016).</li>
<li>Thring, T. S. A., Hili, P., Naughton, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-collagenase%2C+anti-elastase+and+anti-oxidant+activities+of+extracts+from+21+plants%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Complement+Altern+Med%22%5BJournal%5D)">Anti-collagenase, anti-elastase and anti-oxidant activities of extracts from 21 plants.</a> BMC Complement Altern Med. 9 (1), 27(2009).</li>
<li>Donà, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil+restraint+by+green+tea%3A+Inhibition+of+inflammation%2C+associated+angiogenesis%2C+and+pulmonary+fibrosis+1%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Neutrophil restraint by green tea: Inhibition of inflammation, associated angiogenesis, and pulmonary fibrosis 1.</a> J Immunol. 170, 4335-4341 (2003).</li>
<li>Michailidis, D., Angelis, A., Nikolaou, P. E., Mitakou, S., Skaltsounis, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exploitation+of+vitis+vinifera%2C+foeniculum+vulgare%2C+cannabis+sativa+and+punica+granatum+by-product+seeds+as+dermo-cosmetic+agents%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">Exploitation of vitis vinifera, foeniculum vulgare, cannabis sativa and punica granatum by-product seeds as dermo-cosmetic agents.</a> Molecules. 26 (3), 26030731(2021).</li>
<li>Suzuki, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Curcumin+attenuates+elastase-+and+cigarette+smoke-induced+pulmonary+emphysema+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Curcumin attenuates elastase- and cigarette smoke-induced pulmonary emphysema in mice.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 296 (4), L614-L623 (2009).</li>
<li>Brás, N. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+pancreatic+elastase+by+polyphenolic+compounds%5BTitle%5D)+AND+%22J+Agric+Food+Chem%22%5BJournal%5D)">Inhibition of pancreatic elastase by polyphenolic compounds.</a> J Agric Food Chem. 58 (19), 10668-10676 (2010).</li>
<li>Álvarez-Martínez, F. J., Díaz-Puertas, R., Barrajón-Catalán, E., Micol, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plant-derived+natural+products+for+the+treatment+of+bacterial+infections%5BTitle%5D)+AND+%22Handbook+of+Experimental+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Plant-derived natural products for the treatment of bacterial infections.</a> Handbook of Experimental Pharmacology. , (2024).</li>
<li>Álvarez-Martínez, F. J., Barrajón-Catalán, E., Herranz-López, M., Micol, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antibacterial+plant+compounds%2C+extracts+and+essential+oils%3A+An+updated+review+on+their+effects+and+putative+mechanisms+of+action%5BTitle%5D)+AND+%22Phytomedicine%22%5BJournal%5D)">Antibacterial plant compounds, extracts and essential oils: An updated review on their effects and putative mechanisms of action.</a> Phytomedicine. 90, 153626(2021).</li>
<li>Saganuwan, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+modified+Michaelis-Menten+equations+for+determination+of+enzyme+inducing+and+inhibiting+drugs%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Pharmacol+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Application of modified Michaelis-Menten equations for determination of enzyme inducing and inhibiting drugs.</a> BMC Pharmacol Toxicol. 22 (1), 57(2021).</li>
<li>AlShaikh-Mubarak, G. A., Kotb, E., Alabdalall, A. H., Aldayel, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+survey+of+elastase-producing+bacteria+and+characteristics+of+the+most+potent+producer%2C+Priestia+megaterium+gasm32%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">A survey of elastase-producing bacteria and characteristics of the most potent producer, Priestia megaterium gasm32.</a> PLoS ONE. 18, 0282963(2023).</li>
<li>Sánchez-Moreiras, A. M., Reigosa, M. J. Advances in plant ecophysiology techniques. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aS%C3%A1nchez-Moreiras%2C+AM+%22Adv+Plant+Ecophysiol+Tech%22">Adv Plant Ecophysiol Tech</a>. , Springer International Publishing. (2018).</li>
<li>Dharwal, V., Sandhir, R., Naura, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PARP-1+inhibition+provides+protection+against+elastase-induced+emphysema+by+mitigating+the+expression+of+matrix+metalloproteinases%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell+Biochem%22%5BJournal%5D)">PARP-1 inhibition provides protection against elastase-induced emphysema by mitigating the expression of matrix metalloproteinases.</a> Mol Cell Biochem. 457 (1-2), 41-49 (2019).</li>
<li>Zhang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineering+molecular+probes+for+in+vivo+near-infrared+fluorescence%2Fphotoacoustic+duplex+imaging+of+human+neutrophil+elastase%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Engineering molecular probes for in vivo near-infrared fluorescence/photoacoustic duplex imaging of human neutrophil elastase.</a> Anal Chem. 94 (7), 3227-3234 (2022).</li>
<li>Ahn, C. M., Sandler, H., Saldeen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decreased+lung+hyaluronan+in+a+model+of+ARDS+in+the+rat%3A+Effect+of+an+inhibitor+of+leukocyte+elastase%5BTitle%5D)+AND+%22Ups+J+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">Decreased lung hyaluronan in a model of ARDS in the rat: Effect of an inhibitor of leukocyte elastase.</a> Ups J Med Sci. 117 (1), 1-9 (2012).</li>
<li>Vanga, R. R., Tansel, A., Sidiq, S., El-Serag, H. B., Othman, M. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnostic+performance+of+measurement+of+fecal+elastase-1+in+detection+of+exocrine+pancreatic+insufficiency%3A+Systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Gastroenterol+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Diagnostic performance of measurement of fecal elastase-1 in detection of exocrine pancreatic insufficiency: Systematic review and meta-analysis.</a> Clin Gastroenterol Hepatol. 16 (8), 1220-1228 (2018).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Piastra per colture cellulari a 96 pozzetti</td><td>Corning Incorporated</td><td>3599</td><td>Fondo piatto con coperchio, polistirene</td></tr><tr><td>Lettore multimodale per imaging cellulare</td><td>Agilent</td><td>BioTek Cytation 1</td><td>Utilizzato con il software Gen5</td></tr><tr><td>Eslastasi dal pancreas suino</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E7885</td><td>CAS 39445-21-1; 25,9 kDa</td></tr><tr><td>Isopropanolo 99,5%</td><td>Fisher Scientific</td><td>AC184130010</td><td>CAS 67-63-0; C3H8O; 60,10 g/mol</td></tr><tr><td>di N-succinil-(Ala)3-nitroanilide</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S4760</td><td>CAS 52299-14-6; C19H25N5O8 ; 451,43 g/mol</td></tr><tr><td>Misuratore di pH</td><td>Hach Lange</td><td>sensION+ PH31</td><td>Con agitatore magnetico e supporto per sensore</td></tr><tr><td>Fenilmetanosulfonilfluoruro</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P7626</td><td>CAS 329-98-6; C7H7FO2S; 174,19 g/mol</td></tr><tr><td>Tris per Biologia Molecolare</td><td>PanReac AppliChem</td><td>A2264</td><td>CAS 77-86-1; C4H11NO3; 121,14 g/mol</td></tr></tbody></table>

quantificazione della modulazione dell'attività dell'enzima elastasi attraverso l'analisi colorimetrica

Quantifying the Modulation of Elastase Enzyme Activity Through Colorimetric Analysis

Una volta completato il protocollo, è possibile ottenere i dati di assorbanza necessari per eseguire i calcoli pertinenti e quantificare la capacità dei campioni di modulare l'attività dell'elastasi. La Figura 3 evidenzia la posizione dei pozzetti con i diversi controlli e campioni. Nel caso di campioni colorati, come quello utilizzato in questo esempio, è necessario aggiungere controlli colore per minimizzare l'interferenza spettrofotometrica, in quanto il colore può interferire con la misu...

Quantificazione della modulazione dell'attività dell'enzima elastasi attraverso l'analisi colorimetrica

Elastase, a serine protease, plays an essential role in elastin degradation. Elastin is an extracellular protein that helps maintain tissue elasticity in ...

quantifying-modulation-elastase-enzyme-activity-through-colorimetric

Research

Ricerca

JoVE Journal

Biochemistry

Biochimica

Il fluorescente Detection Kit proteasi è progettato per la misurazione dell'attività della proteasi con fluorometria. E 'anche adatto per il rilevamento di tracce di contaminazione della proteasi. Il metodo si basa sulla hydroysis proteolitica di una formulazione proprietaria di un marcato con FITC substrato di caseina.

L&#39;uso del kit di rilevamento a fluorescenza della proteasi per determinare l&#39;attività della proteasi

Un protocollo per rilevare tricoteceni (micotossine di preoccupazione per la salute umana), utilizzando un metodo di screening di nuova concezione basata su un metodo competitivo immunochimici e una rilevazione finale elettrochimica è dimostrata.

ELIME (Enzyme Linked Immuno magnetica elettrochimici) metodo di rilevazione micotossine

In questo video, eseguiamo la zimografia, una tecnica elettroforetica, per analizzare l'attività proteolitica all'interno di campioni biologici.

Zimografia peptidica fluorescente: una tecnica modificata per rilevare l'attività della proteasi utilizzando substrati fluorogenici in gel per zimogrammi

Questo video mostra un test in vitro per quantificare l'attività della proteasi della serina neutrofila in campioni di espettorato. Il campione contenente proteasi secreta viene incubato con un reporter fluorescente recante un motivo di riconoscimento. La scissione del motivo da parte della proteasi consente l'emissione di fluorescenza individuale da parte del fluoroforo donatore e accettore del reporter, indicando l'attività della proteasi nel campione.

Un test in vitro per misurare l'attività della proteasi della serina neutrofila utilizzando un reporter fluorescente

Questo video mostra il test di rilascio del colorante per quantificare l'attività enzimatica delle proteine antimicrobiche. La proteina antimicrobica degrada la parete cellulare marcata con il colorante dei batteri e rilascia le molecole di colorante trasformando la soluzione in blu. L'assorbanza della soluzione è correlata all'attività enzimatica della proteina antimicrobica.

Un saggio di rilascio di colorante per quantificare l'attività enzimatica delle proteine antimicrobiche

Descriviamo un semplice test colorimetrico quantitativo che misura specificamente l'attività proteolitica del Granzima B (GzmB) umano, di topo o di ratto. Questo protocollo può essere facilmente adattato per determinare l'attività proteasica di altre serina proteasi in granuli mediante l'idrolisi di altri substrati peptidici sintetici con un'appropriata sequenza di riconoscimento.

Un colorimetrico metodo che misura particolare Granzyme B proteolitici attività: idrolisi di Boc-Ala-Ala-Asp-S-Bzl

Qui, presentiamo protocolli per selezionare e caratterizzare rapidamente gli enzimi per l'attività antimicrobica. Il saggio di diffusione su microvetrini e il saggio di rilascio del colorante utilizzano substrati batterici target per la valutazione qualitativa e quantitativa dell'attività enzimatica.

Saggi qualitativi e quantitativi per il rilevamento e la caratterizzazione di proteine ​​antimicrobici

Qui, presentiamo un protocollo dettagliato per una tecnica di zymographic modificate in cui peptidi fluorescenti vengono utilizzati come substrato degradabile al posto di proteine native. L'elettroforesi dei campioni biologici in zymograms peptide fluorescente consente il rilevamento di una vasta gamma delle proteasi che tecniche zymographic precedenti.

Rilevazione di attività di proteasi dallo Zymography Peptide fluorescente

I protocolli qui descritti forniscono una guida per visualizzare e quantificare l'attività delle proteasi neutrofile nell'espettorato umano. Le applicazioni di tale analisi spaziano dalla valutazione dei trattamenti antinfiammatori, alla convalida del biomarcatore, allo screening farmacologico e agli studi clinici di coorte di grandi dimensioni.

Monitoraggio dell'attività neutrofila elastasi e cathepsin G nei campioni di espettorato umano

In questo articolo, vengono presentati metodi ecotossicologici standardizzati per la valutazione di biomarcatori in specie di anuri neotropicali. In particolare, questo articolo descrive in dettaglio diverse metodologie a diverse scale di valutazione ecotossicologica, come i livelli genetico, istologico-cellulare, biochimico, morfologico e individuale.

Metodologie ecotossicologiche per valutare biomarcatori a diverse scale negli anuri neotropicali

Questo studio presenta un saggio FRET raziometrico semplice e di facile utilizzo per il rilevamento e la valutazione quantitativa dell'attività della DNasi e dimostra la sua applicazione nell'analisi di una nucleasi debole.

Valutazione dell'attività della DNasi mediante trasferimento di energia di risonanza a fluorescenza raziometrica

Impara a quantificare l'attività dell'enzima elastasi tramite analisi colorimetrica per studi di biochimica. Questo metodo semplice e sensibile supera le sfide della colorazione degli estratti vegetali naturali.

Quantificazione della modulazione dell'attività dell'enzima elastasi attraverso l'analisi colorimetrica

Esplora altri video