Studio dell'esposizione cronica dei topi alle radiazioni ultraviolette B

Il protocollo descrive uno studio degli effetti sistemici e locali sulla pelle dell'esposizione all'ultravioletto B nei topi.

Stiamo studiando gli effetti sistemici dell'esposizione della pelle a basse dosi di radiazioni UVB, in particolare a livelli inferiori a quelli che causano eritema. Il nostro protocollo consentirà di comprendere gli effetti sistemici dell'esposizione a basse dosi di UVB al di là degli effetti diretti o locali sulla pelle. Il nostro metodo imita fedelmente l'esposizione cronica di basso grado ai raggi UVB al di sotto dei livelli di eritema. In questo modo siamo in grado di studiare gli effetti endogeni degli UVB.

[Narratore] Per iniziare, posizionare il topo anestetizzato su una piattaforma di lavoro e radere dal 50 al 60% della sua regione dorsale. Dopo aver rimosso il pelo con la crema depilatoria, metti il topo in una gabbia di recupero pulita e asciutta con lettiera. Lascia riposare il topo nella gabbia di casa con cibo e acqua ad libitum. Per iniziare, indossa una maglietta a maniche lunghe, pantaloni, un camice da laboratorio, scarpe chiuse, doppi guanti e una visiera per garantire la sicurezza personale. Eseguire l'irradiazione Ultravioletta B all'interno di una cappa biologica con la copertura in plexiglass da 10 millimetri abbassata e uno schermo protettivo in posizione. Posizionare la lampada Ultraviolet B sulla camera in plexiglass trasparente. Accendere la lampada a raggi ultravioletti B e lasciarla funzionare fino a quando l'intensità non si stabilizza. Quindi accendere il radiometro Ultraviolet X, dotato di una testa di misurazione Ultraviolet B per monitorare l'intensità. Posizionare la camera di esposizione pulita all'interno della camera in plexiglass trasparente con due camere mentre la lampada ultravioletta è accesa o spenta per le rispettive esposizioni ultraviolette o finte. Utilizzare una calcolatrice per determinare il tempo necessario per esporre il mouse all'intensità ultravioletta B desiderata. Trasferire il mouse dalla gabbia di casa alla camera di esposizione per il tempo di esposizione desiderato. Esporre il topo a una dose di ultravioletti B di 50 millijoule per centimetro quadrato, che è una dose sub-eritematica. Per convalidare l'efficienza delle radiazioni, misurare la pigmentazione dell'orecchio e della coda utilizzando uno spettrofotometro dermico. Calibrare lo spettrofotometro impostando la linea di base con carta bianca comune pulita. Una volta completata la calibrazione, posizionare il sensore di misurazione sull'orecchio o sulla coda del mouse e registrare le letture dell'intensità della melanina. Aumenti graduali e significativi dei livelli di melanina sono stati osservati sia nei topi maschi che nelle femmine esposti alle radiazioni ultraviolette B per quattro settimane rispetto ai controlli, confermando il successo dell'induzione della pigmentazione cutanea.