Name: Un modello murino di trasformazione emorragica indotta da iperglicemia acuta combinata con ischemia focale transitoria (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-11-15T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 35 s
Description: Scopri il protocollo MCAO/R per studiare la trasformazione emorragica nel modello murino C57BL/6 con iperglicemia acuta. Questo metodo offre alta riproducibilità, stabilità e bassa mortalità per la ricerca preclinica sulle complicanze dell'ictus.

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<meta charset="utf8"></head><body>Trasformazione emorragica potenziata da iperglicemia nell'ictus indotto da tMCAO

<ol><li>Patel, P., Yavagal, D., Khandelwal, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperacute+management+of+ischemic+strokes%3A+JACC+focus+seminar%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Hyperacute management of ischemic strokes: JACC focus seminar.</a> J Am Coll Cardiol. 75 (15), 1844-1856 (2020).</li>
<li>Goncalves, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thrombolytic+tPA-induced+hemorrhagic+transformation+of+ischemic+stroke+is+mediated+by+PKC%CE%B2+phosphorylation+of+occludin%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Thrombolytic tPA-induced hemorrhagic transformation of ischemic stroke is mediated by PKCβ phosphorylation of occludin.</a> Blood. 140 (4), 388-400 (2022).</li>
<li>Adebayo, O. D., Culpan, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnostic+accuracy+of+computed+tomography+perfusion+in+the+prediction+of+hemorrhagic+transformation+and+patient+outcome+in+acute+ischaemic+stroke%3A+A+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Stroke+J%22%5BJournal%5D)">Diagnostic accuracy of computed tomography perfusion in the prediction of hemorrhagic transformation and patient outcome in acute ischaemic stroke: A systematic review and meta-analysis.</a> Eur Stroke J. 5 (1), 4-16 (2020).</li>
<li>Fluri, F., Schuhmann, M. K., Kleinschnitz, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+ischemic+stroke+and+their+application+in+clinical+research%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Des+Devel+Ther%22%5BJournal%5D)">Animal models of ischemic stroke and their application in clinical research.</a> Drug Des Devel Ther. 9, 3445-3454 (2015).</li>
<li>Knight, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prediction+of+impending+hemorrhagic+transformation+in+ischemic+stroke+using+magnetic+resonance+imaging+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Prediction of impending hemorrhagic transformation in ischemic stroke using magnetic resonance imaging in rats.</a> Stroke. 29 (1), 144-151 (1998).</li>
<li>Orset, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combination+treatment+with+U0126+and+rt-PA+prevents+adverse+effects+of+the+delayed+rt-PA+treatment+after+acute+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Combination treatment with U0126 and rt-PA prevents adverse effects of the delayed rt-PA treatment after acute ischemic stroke.</a> Sci Rep. 11 (1), 11993(2021).</li>
<li>Kwon, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemorrhagic+transformation+after+large+cerebral+infarction+in+rats+pretreated+with+dabigatran+or+warfarin%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Hemorrhagic transformation after large cerebral infarction in rats pretreated with dabigatran or warfarin.</a> Stroke. 48 (10), 2865-2871 (2017).</li>
<li>Mi, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Correlation+of+hyperglycemia+with+mortality+after+acute+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Ther+Adv+Neurol+Disord%22%5BJournal%5D)">Correlation of hyperglycemia with mortality after acute ischemic stroke.</a> Ther Adv Neurol Disord. 11, 1756285617731686(2018).</li>
<li>Seners, P., Turc, G., Oppenheim, C., Baron, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incidence%2C+causes+and+predictors+of+neurological+deterioration+occurring+within+24+following+acute+ischaemic+stroke%3A+A+systematic+review+with+pathophysiological+implications%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurol+Neurosurg+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Incidence, causes and predictors of neurological deterioration occurring within 24 following acute ischaemic stroke: A systematic review with pathophysiological implications.</a> J Neurol Neurosurg Psychiatry. 86 (1), 87-94 (2015).</li>
<li>Reshi, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperglycemia+in+acute+ischemic+stroke%3A+Is+it+time+to+re-evaluate+our+understanding%5BTitle%5D)+AND+%22Med+Hypotheses%22%5BJournal%5D)">Hyperglycemia in acute ischemic stroke: Is it time to re-evaluate our understanding.</a> Med Hypotheses. 107, 78-80 (2017).</li>
<li>Graham, M. L., Schuurman, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validity+of+animal+models+of+type+1+diabetes%2C+and+strategies+to+enhance+their+utility+in+translational+research%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Validity of animal models of type 1 diabetes, and strategies to enhance their utility in translational research.</a> Eur J Pharmacol. 759, 221-230 (2015).</li>
<li>Rehni, A. K., Liu, A., Perez-Pinzon, M. A., Dave, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diabetic+aggravation+of+stroke+and+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Diabetic aggravation of stroke and animal models.</a> Exp Neurol. 292, 63-79 (2017).</li>
<li>Chiang, T., Messing, R. O., Chou, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+model+of+middle+cerebral+artery+occlusion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Mouse model of middle cerebral artery occlusion.</a> J Vis Exp. 48, e2761(2011).</li>
<li>Ma, F., Sun, P., Zhang, X., Hamblin, M. H., Yin, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelium-targeted+deletion+of+the+miR-15a%2F16-1+cluster+ameliorates+blood-brain+barrier+dysfunction+in+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Signal%22%5BJournal%5D)">Endothelium-targeted deletion of the miR-15a/16-1 cluster ameliorates blood-brain barrier dysfunction in ischemic stroke.</a> Sci Signal. 13 (621), eaay5686(2020).</li>
<li>Wanson, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+semiautomated+method+for+measuring+brain+infarct+volume%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">A semiautomated method for measuring brain infarct volume.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 10 (2), 290-293 (1990).</li>
<li>Friedländer, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reliability+of+infarct+volumetry%3A+Its+relevance+and+the+improvement+by+a+software-assisted+approach%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Reliability of infarct volumetry: Its relevance and the improvement by a software-assisted approach.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 37 (8), 3015-3026 (2017).</li>
<li>Wang, H. L., Lai, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+Evans+blue+quantitation+in+limited+rat+tissue+samples%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Optimization of Evans blue quantitation in limited rat tissue samples.</a> Sci Rep. 4, 6588(2014).</li>
<li>Wang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+between+red+blood+cell+distribution+width+and+hemorrhagic+transformation+in+acute+ischemic+stroke+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Cerebrovasc+Dis%22%5BJournal%5D)">Association between red blood cell distribution width and hemorrhagic transformation in acute ischemic stroke patients.</a> Cerebrovasc Dis. 48 (3-6), 193-199 (2019).</li>
<li>Zhu, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stress+hyperglycemia+and+outcome+of+non-diabetic+patients+after+acute+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurol%22%5BJournal%5D)">Stress hyperglycemia and outcome of non-diabetic patients after acute ischemic stroke.</a> Front Neurol. 10, 1003(2019).</li>
<li>Won, S. J., Tang, X. N., Suh, S. W., Yenari, M. A., Swanson, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperglycemia+promotes+tissue+plasminogen+activator-induced+hemorrhage+by+increasing+superoxide+production%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Neurol%22%5BJournal%5D)">Hyperglycemia promotes tissue plasminogen activator-induced hemorrhage by increasing superoxide production.</a> Ann Neurol. 70 (4), 583-590 (2011).</li>
<li>Zhang, F. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rosiglitazone+attenuates+hyperglycemia-enhanced+hemorrhagic+transformation+after+transient+focal+ischemia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Rosiglitazone attenuates hyperglycemia-enhanced hemorrhagic transformation after transient focal ischemia in rats.</a> Neuroscience. 250, 651-657 (2013).</li>
<li>Soejima, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperbaric+oxygen+preconditioning+attenuates+hyperglycemia-enhanced+hemorrhagic+transformation+after+transient+MCAO+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Med+Gas+Res%22%5BJournal%5D)">Hyperbaric oxygen preconditioning attenuates hyperglycemia-enhanced hemorrhagic transformation after transient MCAO in rats.</a> Med Gas Res. 2 (1), 9(2012).</li>
<li>Chen, C., Ostrowski, R. P., Zhou, C., Tang, J., Zhang, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Suppression+of+hypoxia-inducible+factor-1alpha+and+its+downstream+genes+reduces+acute+hyperglycemia-enhanced+hemorrhagic+transformation+in+a+rat+model+of+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Res%22%5BJournal%5D)">Suppression of hypoxia-inducible factor-1alpha and its downstream genes reduces acute hyperglycemia-enhanced hemorrhagic transformation in a rat model of cerebral ischemia.</a> J Neurosci Res. 88 (9), 2046-2055 (2010).</li>
<li>Lin, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Docosahexaenoic+acid+attenuates+hyperglycemia-enhanced+hemorrhagic+transformation+after+transient+focal+cerebral+ischemia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Docosahexaenoic acid attenuates hyperglycemia-enhanced hemorrhagic transformation after transient focal cerebral ischemia in rats.</a> Neuroscience. 301, 471-479 (2015).</li>
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<li>Yang, C., Hawkins, K. E., Doré, S., Candelario-Jalil, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroinflammatory+mechanisms+of+blood-brain+barrier+damage+in+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Cell+Physiol%22%5BJournal%5D)">Neuroinflammatory mechanisms of blood-brain barrier damage in ischemic stroke.</a> Am J Physiol Cell Physiol. 316 (2), C135-C153 (2019).</li>
<li>Natarajan, R., Northrop, N., Yamamoto, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescein+isothiocyanate+%28FITC%29-dextran+extravasation+as+a+measure+of+blood-brain+barrier+permeability%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Fluorescein isothiocyanate (FITC)-dextran extravasation as a measure of blood-brain barrier permeability.</a> Curr Protoc Neurosci. 79, 9.58.1-9.58.15 (2017).</li>
<li>Ahishali, B., Kaya, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+blood-brain+barrier+integrity+using+vascular+permeability+markers%3A+Evans+Blue%2C+Sodium+Fluorescein%2C+Albumin-Alexa+Fluor+conjugates%2C+and+Horseradish+Peroxidase%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Evaluation of blood-brain barrier integrity using vascular permeability markers: Evans Blue, Sodium Fluorescein, Albumin-Alexa Fluor conjugates, and Horseradish Peroxidase.</a> Methods Mol Biol. 2367, 87-103 (2021).</li>
<li>Kovács, K. B., Bencs, V., Hudák, L., Oláh, L., Csiba, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemorrhagic+transformation+of+ischemic+strokes%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Hemorrhagic transformation of ischemic strokes.</a> Int J Mol Sci. 24 (18), 14067(2023).</li>
</ol>

<a href="https://app.jove.com/t/6615">This corrects</a> the article <a href="https://dx.doi.org/10.3791/67371">10.3791/67371</a>

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/67371">A Mouse Model of Hemorrhagic Transformation Induced by Acute Hyperglycemia Combined with Transient Focal Ischemia</a>. The Protocol section was updated.

Erratum: A Mouse Model of Hemorrhagic Transformation Induced by Acute Hyperglycemia Combined with Transient Focal Ischemia

<table><tbody><tr><td>2,3,5-Trifeniltetrazolio cloruro (TTC)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>108380</td><td>Il colorante per la colorazione TTC Piastra di</td></tr><tr><td>coltura a 24 pozzetti</td><td>Corning Incorporated</td><td>CLS3527</td><td>Il recipiente per la colorazione TTC</td></tr><tr><td>Iniezione di glucosio al 30%</td><td>Kelun Pharmaceutical</td><td>H42021188</td><td>Induzione di iperglicemia acuta</td></tr><tr><td>4% paraformaldeide</td><td>Wuhan Servicebio Technology Co., Ltd. </td><td>G1101</td><td>Fissazione tissutale</td></tr><tr><td>5.0 Sutura assorbibile con acido poliglicolico</td><td>Jinhuan Medical Co., Ltd</td><td>KCR531</td><td>Attrezzatura per chirurgia</td></tr><tr><td>Piastra di coltura a 96 pozzetti</td><td>Corning Incorporated</td><td>CLS3596</td><td>Macchina per anestesia per misurazione del contenuto EB</td></tr><tr><td></td><td>Midmark Corporation Midmark Corporation</td><td>VMR</td><td>Asta per animale</td></tr><tr><td>Mezzo di montaggio antisbiadimento con DAPI</td><td>Beyotime Biotech</td><td>P0131</td><td>Supporto per sezioni di tessuto</td></tr><tr><td>Automazione-disidratazione dei tessuti&nbsp; Macchina </td><td>Leica Biosystems</td><td>TP1020</td><td>Disidratare i tessuti</td></tr><tr><td>Microscopia confocale</td><td>Leica Biosystems</td><td>STELLARIS 5</td><td>Acquisizione di immagini</td></tr><tr><td>Diclofenac gel di sodio</td><td>MaYinglong Pharmaceutical</td><td>H10950214</td><td>Analgesia per animali</td></tr> Soluzione <tr><td>di colorazione dell'eosina</td><td>Servicebio Technology</td><td>G1001</td><td>Il colorante per H& Colorazione</td></tr><tr><td>E Evans Blue</td><td>Aladdin</td><td>E104208</td><td>Colorazione EB</td></tr><tr><td>Gel per occhi</td><td>Guangzhou H44023098 farmaceutica</td><td></td><td>Materiale per la chirurgia</td></tr><tr><td>Fitc-destrano</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>60842-46-8</td><td>Valutazione della permeabilità BBB</td></tr><tr><td>Microscopio a fluorescenza</td><td>Olympus</td><td>BX51</td><td>Acquisizione di immagini</td></tr><tr><td>Microtomo congelato</td><td>Leica Biosystems</td><td>CM1900</td><td>Utilizzare per sezioni congelate</td></tr><tr><td>Glucometro</td><td>YuWell</td><td>580</td><td>Misurazione della glicemia</td></tr><tr><td>Ematossilina Soluzione di colorazione</td><td>Servicebio</td><td>G1004</td><td>Il colorante per H& Colorazione E</td></tr><tr><td>Iodio</td><td>Lircon</td><td>20020059</td><td>Materiale per chirurgia</td></tr><tr><td>Isoflurano</td><td>Rwd Life Science</td><td>R510-22-10</td><td>Anestesia per animali</td></tr><tr><td>Misuratore di flusso sanguigno Laser doppler</td> Strumenti <td>di Moor</td><td>moorVMS</td><td>Monitoraggio del flusso sanguigno</td></tr><tr><td>MCAO Suture</td><td>Rwd Life Science</td><td>907-00023-01</td><td>Materiale per chirurgia</td></tr><tr><td>Meloxicam</td><td>Boehringer-Ingelheim J20160020</td><td></td><td>Analgesia per animali</td></tr><tr><td>Kit di strumenti microchirurgici</td><td>Rwd Life Science</td><td>SP0003-M</td><td>Attrezzatura per chirurgia</td></tr><tr><td>Microtomo</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>HM325</td><td>Produzione di sezioni di tessuto</td></tr><tr><td>Lama per microtomo</td><td>Leica Biosystems</td><td>819</td><td>Produzione di sezioni di tessuto</td></tr><tr><td>Unguento alla mupirocina</td><td>GlaxoSmithKline</td><td>H10930064</td><td>Anti-infezione per balsamo neutro animale</td></tr><tr><td></td><td>Absin Bioscience</td><td>abs9177</td><td>Sigillo per H & E colorazione Centro di</td></tr><tr><td>inclusione della paraffina</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>EC 350</td><td>Produrre blocchi di paraffina</td></tr><tr><td>Pentobarbital sodico</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P3761</td><td>Eutanasia per soluzione salina tamponata con</td></tr><tr><td>fosfato</td> animale <td>Beyotime Biotech</td><td>C0221A</td><td>Risciacquo per sezione tissutale</td></tr><tr><td>Scanner</td><td>EPSON</td><td>V330</td><td>Rasoio</td></tr> <tr><td></td><td>per scansione tissutaleFornitore verificato - Shenzhen Codos Electrical Appliances Co., Ltd.</td><td>CP-9200</td><td>Apparecchiature per chirurgia</td></tr><tr><td>Spettrofotometro</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>1510-02362</td><td>Misurazione del contenuto di EB</td></tr><tr><td>Soluzione di saccarosio</td><td>Shanghai Macklin Biochemical</td><td>57-50-1</td><td>Disidratazione per tessuti</td></tr><tr><td>Tissue-Tek O.C.T. Compound</td><td>Sakura</td><td>4583</td><td>Mezzo di inclusione tissutale</td></tr><tr><td>Acido tricloroacetico</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T6399</td><td>EB Misurazione del contenuto</td></tr></tbody></table>

un modello murino di trasformazione emorragica indotta da iperglicemia acuta combinata con ischemia focale transitoria

A Mouse Model of Hemorrhagic Transformation Induced by Acute Hyperglycemia Combined with Transient Focal Ischemia

La procedura sperimentale di questo studio è illustrata nella Figura 1. In breve, i topi sono stati sottoposti a MCAO indotta dall'occlusione del filo per 60 minuti, seguita da riperfusione. Il glucosio (30% in soluzione fisiologica normale, 7,2 ml/kg di peso corporeo) è stato somministrato per via intraperitoneale 15 minuti prima dell'MCAO. I livelli di glucosio nel sangue sono stati misurati al basale (prima dell'iniezione di glucosio), immediatamente dopo l'MCAO e al momento della riperfusione. Dopo 24 ore di riperfusione, i topi sono stati soppressi e i tessuti cerebrali sono stati raccolti per l'analisi del volume dell'infarto, della perdita della barriera emato-encefalica e dell'istopatologia. Come illustrato nella Figura 2, tutti e quattro i gruppi hanno mostrato livelli di glucosio nel sangue al basale simili. Tuttavia, i topi che hanno ricevuto iniezioni di glucosio hanno mostrato livelli di glucosio nel sangue significativamente elevati rispetto a quelli dei gruppi salini. 
Come illustrato nella Figura 3A, non è stato osservato alcun infarto visibile su fette di cervello nel gruppo Sham + soluzione salina o Sham + glucosio, mentre un marcato infarto cerebrale è stato chiaramente rivelato dalla colorazione TTC su fette di cervello di entrambi i gruppi MCAO. Inoltre, i topi iniettati con glucosio hanno mostrato un volume di infarto maggiore rispetto a quelli iniettati con soluzione fisiologica normale nei diversi gruppi MCAO. Secondo l'analisi statistica, il volume dell'infarto era del 20,8% ± 0,8% e del 45,1% ± 1,6% rispettivamente nel gruppo MCAO + soluzione salina e nel gruppo MCAO + glucosio (Figura 3B).
Le osservazioni macroscopiche non hanno rivelato emorragie nell'emisfero cerebrale sinistro né del gruppo MCAO + soluzione salina né del gruppo Sham + soluzione fisiologica/glucosio. Al contrario, sono state osservate emorragie multiple puntate nell'emisfero cerebrale ischemico del gruppo MCAO + glucosio (Figura 4A). Le immagini di scansione di sezioni cerebrali coronali consecutive hanno mostrato che le emorragie nel gruppo MCAO + glucosio erano distribuite all'interno delle regioni di infarto della corteccia e dello striato (Figura 4A). Inoltre, l'analisi istologica con colorazione H&amp;E ha dimostrato una significativa infiltrazione di cellule del sangue nelle regioni dell'infarto della corteccia e dello striato nel gruppo MCAO+glucosio (Figura 4B). Al contrario, non è stata osservata alcuna infiltrazione di cellule del sangue né nel gruppo MCAO+soluzione salina né nel gruppo Sham + soluzione fisiologica/glucosio.
Come illustrato nella Figura 5A, non è stata osservata alcuna perdita di EB nelle fette cerebrali del gruppo Sham + glucosio. Tuttavia, entrambi i gruppi MCAO hanno mostrato una distinta colorazione blu a causa della perdita di EB. Inoltre, rispetto ai topi iniettati con soluzione fisiologica, quelli iniettati con glucosio hanno mostrato una maggiore permeabilità all'EB a 24 ore dopo MCAO. Rispetto al gruppo Sham + soluzione fisiologica, il gruppo MCAO + soluzione salina ha dimostrato un aumento significativo del contenuto di EB (4,2 μg/g ± 1,8 μg/g rispetto a 28 μg/g ± 0,7 μg/g, p &lt; 0,01), che è stato ulteriormente elevato nel gruppo MCAO + glucosio (28 μg/g ± 0,7 μg/g rispetto a 65,5 μg/g ± 6,0 μg/g, p &lt; 0,01) (Figura 5B). Come illustrato nella Figura 5C, la perdita di FITC-destrano era più intensa nella corteccia cerebrale ischemica e nello striato del gruppo MCAO + glucosio rispetto al gruppo MCAO + soluzione salina.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67371/67371fig01.jpg"> 
Figura 1: Schema della procedura sperimentale. Ai topi è stato iniettato intraperitonealmente glucosio al 30% o soluzione salina prima dell'intervento chirurgico MCAO, con monitoraggio della glicemia durante la procedura. 24 ore dopo la riperfusione, i topi sono stati soppressi per analisi patologiche e istologiche. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67371/67371fig01large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67371/67371fig02.jpg"> 
Figura 2: Variazioni dei livelli di glucosio nel sangue in vari momenti dopo l'iniezione di glucosio al 30%. I dati sono presentati come media ± SD. N = 10-20. p &lt; 0,001 rispetto al gruppo Sham + soluzione salina. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67371/67371fig02large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67371/67371fig03.jpg"> 
Figura 3: L'iperglicemia ha peggiorato il danno cerebrale ischemico 24 ore dopo la riperfusione. (A) Immagini rappresentative di fette coronali colorate con TTC, con tessuto cerebrale normale che appare rosso-rosato e aree di infarto ischemico che appaiono bianco-grigiastre. Barra della scala = 5 mm. (B) Analisi statistica del volume dell'infarto. I dati sono presentati come media ± SD. N = 3. p &lt; 0,001 rispetto al gruppo Sham + soluzione salina, ##p &lt; 0,01 rispetto al gruppo MCAO + soluzione salina. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67371/67371fig03large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67371/67371fig04.jpg"> 
Figura 4: L'iperglicemia aumenta il rischio di HT a 24 ore dopo la riperfusione. (A) Immagini rappresentative dell'osservazione macroscopica e delle fette coronali. L'asterisco indicava i focolai emorragici visibili. Barra della scala = 5 mm. (B) Immagini rappresentative del semicervello colorato con H&amp;E (in alto) e immagini ingrandite (in basso). Barra della scala = 200 μm per le immagini del semicervello; Barra di scala = 20 μm per immagini ingrandite. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67371/67371fig04large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67371/67371fig05.jpg"> 
Figura 5: Iperglicemia aggravata dall'interruzione della BBB a 24 ore dopo la riperfusione. (A) Immagini rappresentative della perdita di blu di Evans. Barra graduata = 5 mm. (B) Analisi statistica della perdita di blu di Evans negli emisferi ischemici. I dati sono presentati come media ± SD, N = 3, **p &lt; 0,01, ***p &lt; 0,001 rispetto al gruppo Sham + soluzione salina, ##p &lt; 0,01 rispetto al gruppo MCAO + soluzione salina. (C) Immagini rappresentative della corteccia cerebrale ischemica e dello striato colorati con FITC-destrano. Barra della scala = 10 μm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67371/67371fig05large.jpg" target="_blank">Fare clic qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>

Un modello murino di trasformazione emorragica indotta da iperglicemia acuta combinata con ischemia focale transitoria

Hemorrhagic transformation (HT) is a serious complication that can occur as a result of thrombolytic therapy following ischemic stroke (IS), and it poses ...

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Questo video mostra la procedura di replicazione di un ictus trombotico in un modello murino bloccando l'arteria carotide comune destra ed esponendo il topo a un ambiente a basso contenuto di ossigeno. Questo processo riduce il flusso di sangue e ossigeno al cervello, causando la formazione di coaguli di sangue e danni cerebrali.

Induzione di ictus trombotico attraverso ipossia e ischemia in un modello murino

Un modello di topo standardizzato di emorragia subaracnoidea da Circolo endoluminale di Willis perforazione viene descritto. Nave di perforazione e emorragia subaracnoidea sono monitorati da un monitoraggio della pressione intracranica. Inoltre diversi parametri vitali vengono registrati e controllati per mantenere condizioni fisiologiche.

Un modello murino di emorragia subaracnoidea

Vari modelli murini di occlusione dell'arteria cerebrale media (MCAO) sono ampiamente utilizzati nella ricerca sul cervello sperimentale. Qui, dimostriamo il modello di transcranica permanente distale MCAO che produce coerente infarto corticale di misura corrispondente al danno imposto dalla maggioranza degli ictus ischemici umani.

Corsa di modellazione in Mouse: Coagulazione permanente dell&#39;arteria cerebrale media distale

I modelli di ictus tromboembolico sono strumenti vitali per ottimizzare la terapia di ricanalizzazione. Qui riportiamo un modello murino di ictus trombotico basato sull'insulto ipossico-ischemico cerebrale transitorio (tHI), che innesca trombosi e infarto e risponde favorevolmente alla fibrinolisi mediata dall'attivatore del plasminogeno tissutale (tPA) in una finestra terapeutica simile a quelle dei pazienti con ictus.

Un trombotica Stroke modello basato sulla transitoria cerebrale ipossia-ischemia

Descriviamo un modello murino di ictus indotto dall'occlusione dell'arteria cerebrale media utilizzando una sutura rivestita di silicone. Il protocollo può essere applicato per indurre un'occlusione permanente o un'ischemia temporanea, seguita da riperfusione.

Induzione di ictus ischemico e di ischemia-riperfusione nei topi mediante la tecnica di occlusione dell&#39;arteria Medio e visualizzazione di Infarct Area

Tra trapianto di organo solido addominale, gli innesti del pancreas sono inclini a sviluppare danno lesione-collegata dell'innesto di grave ischemia riperfusione, che conduce alla fine precoce perdita dell'innesto. Questo protocollo descrive un modello di trapianto di pancreas murino usando una tecnica di sutura non polsino, ideale per analizzare questi danni presto, deleteri.

Modello di topo per il trapianto di Pancreas usando una tecnica modificata polsino

L'emorragia non controllata, una causa importante della mortalità tra i pazienti traumatici, può essere modellata utilizzando una lacerazione epatica standard in un modello murino. Questo modello provoca una consistente perdita di sangue, la sopravvivenza e consente di testare agenti emostatici. Questo articolo fornisce il processo passo per passo per eseguire questo prezioso modello.

Scossa emorragica non controllata modellata mediante Lacerazione del fegato nei topi con monitoraggio emodinamico in tempo reale

Un modello murino di ischemia-riperfusione cerebrale è istituito per studiare la patofisiologia del colpo. Abbiamo distalmente legare l'arteria cerebrale centrale di destra e l'arteria carotica comune di destra e ripristinare il flusso sanguigno dopo 10 o 40 min di ischemia.

Occlusione del vaso due Mouse modello di Ischemia-riperfusione cerebrale

Qui, descriviamo un modello di topo di ischemia retinica mediante occlusione bilaterale transitoria comune dell'arteria carotide usando suture semplici e un morsetto. Questo modello può essere utile per comprendere i meccanismi patologici dell'ischemia retinica causati da anomalie cardiovascolari.

Un modello murino di lesione retinica ischemica indotta dall'occlusione dell'arteria carotide comune transiente

Qui, presentiamo un protocollo per stabilire un modello di occlusione dell'arteria cerebrale media distale (dMCAO) attraverso l'elettrocoagulazione transcranica in topi C57BL/6J e valutare il successivo comportamento neurologico e le caratteristiche istopatologiche.

Induzione di ictus ischemico acuto nei topi utilizzando la tecnica di occlusione dell'arteria media distale

Scopri il protocollo MCAO/R per studiare la trasformazione emorragica nel modello murino C57BL/6 con iperglicemia acuta. Questo metodo offre alta riproducibilità, stabilità e bassa mortalità per la ricerca preclinica sulle complicanze dell'ictus.

Un modello murino di trasformazione emorragica indotta da iperglicemia acuta combinata con ischemia focale transitoria

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