Name: Contenzione per indurre stress in topi e ratti (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-12-06T14:00:00.000+00:00
Duration: 3 min 48 s
Description: Scopri il metodo di contenzione fisica per indurre stress in topi e ratti, utile per studiare i disturbi da uso di sostanze e le alterazioni del sistema noradrenergico. Questa tecnica offre un modello validato per ricerche in neuroscienza.

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<meta charset="utf8"></head><body>Impatto dello stress da contenzione sulla fisiologia e la neurobiologia nei modelli di roditori

<table><tbody><tr><td>50 mL Tappo a vite per uso generico Tubo conico</td><td>Globe Scientific</td><td>6288</td><td></td></tr><tr><td>Pipetta monouso Bacinella</td><td>Fisher Scientific</td><td>13-681-500</td><td></td></tr><tr><td>Kit ELISA per saggi Corticosterone</td><td>Arbor</td><td>K014-H</td><td></td></tr><tr><td>Tubo di contenimento Tailveiner</td><td>Braintree Scientific</td><td>RTV</td><td></td></tr></tbody></table>

contenzione per indurre stress in topi e ratti

Restraint to Induce Stress in Mice and Rats

In uno studio precedentemente pubblicato21, le procedure di stress di contenzione descritte in questo manoscritto sono state utilizzate per valutare l'impatto dello stress di contenzione sulla regolazione del cortisolo e della noradrenalina, rientrando nelle ampie possibilità di cambiamenti in neurobiologia indotti dallo stress menzionati nel protocollo 3.3. In questo studio, abbiamo utilizzato il protocollo sopra descritto per la contenzione dei topi. Ulteriori dettagli che esulano dall'ambito della moderazione di questo articolo, ad esempio il razionale della regione cerebrale, i parametri di stimolazione optogenetica o FSCV, possono essere trovati nel manoscritto di riferimento.
Abbiamo utilizzato topi transgenici maschi e femmine (DBH:Cre+/-::Ai32+/-) che esprimono la canalrodopsina selettivamente nei neuroni noradrenergici e abbiamo misurato il rilascio stimolato di noradrenalina nel nucleo del letto della stria terminale (BNST) con FSCV21 ex vivo. I topi sono stati trattenuti come descritto nel protocollo 1 in modo acuto (2 ore) e cronico (2 ore/giorno per 5 giorni) o nel controllo della gabbia domestica. Dopo l'esposizione, il sangue è stato raccolto da alcuni soggetti per l'analisi del corticosterone, come descritto nel protocollo 3.1. Immediatamente dopo lo stress acuto da contenzione, i topi hanno mostrato livelli elevati di corticosterone, ma la risposta è stata attenuata a seguito di stress ripetuti (vedi Figura 1). Altri topi sono stati utilizzati per valutare l'impatto dello stress da contenzione sul rilascio di noradrenalina. 24 ore dopo l'esposizione finale allo stress, il tessuto cerebrale è stato rapidamente raccolto e affettato per registrare il rilascio di noradrenalina nel BNST. È interessante notare che la contenzione acuta non ha avuto un impatto sul rilascio stimolato di noradrenalina, ma l'esposizione ripetuta allo stress ha causato un aumento significativo del rilascio stimolato di noradrenalina attraverso i parametri di stimolazione (vedi Figura 2). Questi risultati convergono con precedenti indagini sull'impatto dello stress di contenzione sul rilascio di noradrenalina nei ratti utilizzando gli approcci descritti nel protocollo 2 17,22.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67387/67387fig1.jpg"> 
Figura 1: Corticosterone nel plasma dei controlli domiciliari in gabbia (naïve) e in seguito a stress di contenzione acuto (singolo) e cronico (ripetuto). Dopo una singola sessione di 2 ore di stress acuto da contenzione, i livelli plasmatici di corticosterone erano elevati rispetto ai soggetti naïve e ripetuti. I risultati sono espressi come media ± SEM. N = 5-6 topi per gruppo. **p &lt; 0,05, ***p &lt; 0,005. Questa cifra è stata modificata con il permesso di Schmidt et al.21. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67387/67387fig1large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67387/67387fig2.jpg"> 
Figura 2: Il rilascio di noradrenalina stimolato optogeneticamente è aumentato in seguito a stress di contenzione cronico (ripetuto). Il giorno successivo all'esposizione finale allo stress, è stata eseguita una voltammetria ciclica a scansione rapida ex vivo per misurare il rilascio di noradrenalina stimolato optogeneticamente nel nucleo del letto della stria terminale dei topi. (A) Variazioni di frequenza (Hz) di 20 impulsi (20 P) le stimolazioni hanno rilasciato più noradrenalina nel gruppo a stress ripetuto. (B, C) Le variazioni nel numero di impulsi (2-20) a una frequenza di stimolazione di 5 Hz (B) o 10 Hz (C) indicavano un maggiore rilascio di noradrenalina nel gruppo a stress ripetuto. Medie ± SEM; n = 5−6 topi/gruppo che forniscono 7−8 fette/gruppo. *p &lt; 0,05, **p &lt; 0,05, ***p &lt; 0,005 e ****p &lt; 0,0001. Questa cifra è stata modificata con il permesso di Schmidt et al.21. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67387/67387fig2large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>

Contenzione per indurre stress in topi e ratti

Across all animal species, exposure to stressful conditions induces stress responses. One method to study the effects of stress using rodent models is the ...

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Indurre un comportamento simile alla depressione in un topo attraverso lo stress da immobilizzazione

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