18 aprile 2025
Qui, presentiamo un protocollo per stabilire un modello murino di cardiomiopatia diabetica e un dispositivo di fissazione dell'elettroagopuntura murina per l'uso dell'elettroagopuntura nei topi, che può fissare i topi più delicatamente durante il trattamento.
Lo scopo della nostra ricerca è l'elettroagopuntura per il trattamento della cardiomiopatia diabetica. Presentiamo un dispositivo di fissazione per elettroagopuntura di livello per topi. Il nostro dispositivo di fissazione per elettroagopuntura del mouse è più facile da fissare nei topi, più sicuro e non passa segretamente ai topi durante il trattamento di elettroagopuntura rispetto ad altre tecnologie. Il nostro laboratorio continuerà a concentrarsi sull'elettroagopuntura per il trattamento di malattie metaboliche come obesità, diabete, cardiomiopatia diabetica, eccetera.
[Narratore] Per iniziare, verificare l'integrità del tubo di plastica cavo in un dispositivo di fissaggio per elettropuntura assemblato. Installare le linguette di chiusura. Spostare le linguette di chiusura lungo il corpo del tubo mentre le viti scorrono nelle scanalature, assicurandosi che la lunghezza di fissaggio possa essere regolata in base alle dimensioni del mouse. Ora accendi lo strumento per la terapia di elettroagopuntura e assicurati che sia operativo. Premere una volta ciascun pulsante per verificarne la funzionalità. Posizionare lo strumento per l'elettroagopuntura accanto ai tubi di plastica cavi per l'esecuzione di trattamenti di elettroagopuntura sui topi. Quindi afferra un topo per la coda con la mano destra e rimuovilo dalla gabbia. Posiziona il mouse sulla superficie della gabbia e tira delicatamente la coda verso l'esterno. Immobilizza il mouse con la mano sinistra e capovolgilo per esporre l'addome. Iniettare il topo per via intraperitoneale usando la mano destra con una siringa da un millilitro precaricata con la quantità appropriata di soluzione di streptozotocina all'1%. Per eseguire l'agopuntura, selezionare prima i punti di agopuntura secondo la teoria dei punti di Biao Ben, inclusi PC6 e ST36 bilaterali. Ora afferra il topo, pizzica la sua coda e posizionalo sulla superficie della gabbia. Posizionare la bocca del tubo di plastica cavo in acrilico con un angolo di 30 gradi rispetto al piano orizzontale, assicurandosi che il piccolo foro al centro sia rivolto verso il suolo e che la bocca del tubo sia allineata con la testa del topo. Ruota lentamente la testa del mouse nel tubo con un movimento volontario e una leggera spinta. Picchiettare delicatamente le natiche del topo per incoraggiarlo a entrare completamente nel tubo. Regolare le linguette di chiusura, quindi sollevare la coda del mouse dalla scanalatura. Serrare il dado e utilizzare le linguette di chiusura alle estremità superiore e inferiore per limitare il movimento del mouse. Usa le pinzette per estrarre delicatamente i quattro arti del mouse attraverso i piccoli fori su ciascun lato del tubo. Una volta che gli arti sono esposti, fissarli delicatamente all'esterno del corpo del tubo. Individua i punti di agopuntura PC6 e ST36 toccando gli arti del mouse con il dito medio della mano destra. Quindi pungere delicatamente la pelle del topo con la punta dell'ago sterile. Inserire rapidamente l'ago obliquamente a una profondità di circa tre millimetri. Quindi rimuovere la mano destra. Ora accendi la macchina per la terapia dell'elettroagopuntura e regolala su un'onda intermittente di un hertz. Fissare la clip eccitata della macchina per terapia di elettroagopuntura all'impugnatura dell'ago, assicurandosi di una clip per ago. Quindi regolare la corrente, con la clip attaccata a un milliampere. Dopo 15 minuti, osservare lo stato dei topi durante il pretrattamento di elettroagopuntura. Il tessuto miocardico nel gruppo di controllo mostrava una struttura intatta con cardiomiociti disposti regolarmente e non sono state osservate lesioni apparenti. Nel gruppo modello, le cellule miocardiche erano disposte in modo irregolare, con alcune cellule che mostravano danni e disintegrazione insieme a una significativa infiltrazione di cellule infiammatorie nello spazio interstiziale. Nel gruppo pre-trattamento, la struttura del tessuto miocardico era chiara, con un piccolo numero di cellule danneggiate e disintegrate, ma senza altre lesioni significative. Gli indici di funzione cardiaca dell'ecocardiografia hanno mostrato che il diametro telediastolico del ventricolo sinistro e il diametro telesistolico del ventricolo sinistro erano significativamente aumentati nel gruppo modello, mentre la frazione di eiezione ventricolare sinistra e l'accorciamento frazionario del ventricolo sinistro erano significativamente ridotti. Nel gruppo pretrattamento, il diametro telediastolico del ventricolo sinistro e il diametro telesistolico del ventricolo sinistro erano significativamente ridotti, mentre la frazione di eiezione ventricolare sinistra e l'accorciamento frazionario del ventricolo sinistro erano significativamente aumentati rispetto al gruppo modello. I livelli di glucosio nel sangue erano significativamente elevati nel gruppo modello rispetto al gruppo di controllo il giorno 36. Dopo il trattamento di elettroagopuntura, i livelli di glucosio nel sangue nel gruppo pre-trattamento erano significativamente ridotti entro il giorno 49 rispetto al gruppo modello.
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Questo studio presenta un protocollo per stabilire un modello murino di cardiomiopatia diabetica e introduce un nuovo dispositivo di fissazione per elettroagopuntura progettato per i topi. Il dispositivo migliora la sicurezza e la facilità d'uso durante i trattamenti di elettroagopuntura.
Reliable fixation and quantitative monitoring are critical for preclinical evaluation of electroacupuncture interventions in metabolic disease models. The described mouse fixation device enables standardized, reproducible electroacupuncture pretreatment in diabetic cardiomyopathy models, supporting robust assessment of cardiac and metabolic endpoints. This capability strengthens predictive confidence in early-stage therapeutic hypothesis testing and informs translational research on non-pharmacological interventions.
This fixation device and workflow integrate into the early discovery and preclinical continuum for metabolic and cardiovascular disease research.