Istituzione di modelli di ratto che imitano le terapie ormonali per l'affermazione del genere

La nostra ricerca ha sviluppato modelli animali per replicare terapie ormonali di affermazione di genere per individui transgender utilizzando il testosterone per gli uomini transgender e gli estrogeni con anti-androgeni per le donne transgender. Stiamo esaminando se coloro che si sottopongono a queste terapie sono vulnerabili alle sostanze chimiche ambientali come la popolazione generale e se ci sono effetti collaterali a lungo termine del trattamento ormonale. Questo modello è unico nel suo campo poiché sono attualmente disponibili dati e strumenti per valutare la suscettibilità potenzialmente diversa alle sostanze chimiche delle persone transgender sottoposte a terapia ormonale e i loro effetti collaterali.

Un risultato significativo del nostro lavoro è l'uso della CPS epatica specifica per sesso come marcatore per valutare il successo delle terapie ormonali. Questo approccio, sviluppato per la prima volta nel nostro studio, fornisce uno strumento prezioso per confermare l'accuratezza e l'efficacia del modello.

Il nostro protocollo affronta il divario nella comprensione degli effetti a lungo termine delle terapie ormonali. Studia inoltre se l'esposizione quotidiana al cibo e alle sostanze chimiche ambientali può interagire o alterare gli effetti dei trattamenti ormonali nel tempo.

In futuro, esploreremo se il modello è adatto per test a lungo termine e studieremo ulteriori biomarcatori come test comportamentali ristretti per valutare meglio gli effetti della terapia.

[Istruttore] Inizia pizzicando e sollevando la pelle nel sito di iniezione per somministrare testosterone ed estradiolo più acetato di ciproterone disciolto in olio di sesamo. Inserire l'ago di una siringa da un millilitro parallelamente alla schiena dell'animale. Una volta che l'ago è all'interno, iniettare lentamente 100 microlitri di testosterone o 200 microlitri di estradiolo più ciproterone acetato, a seconda del modello. Dopo due settimane di trattamento, posizionare ogni ratto anestetizzato in posizione supina su un termoforo. Successivamente, preparare una siringa da cinque millilitri con un ago calibro 21, assicurandosi che il vuoto venga rimosso. Usa le dita per localizzare il cuore. Pulire delicatamente la parete toracica e inserire con cura l'ago nella parete toracica laterale, perpendicolare al corpo, nel punto allineato con i gomiti flessi, tra le costole cinque e sei. Una volta che l'ago raggiunge il ventricolo cardiaco, il sangue entrerà nella siringa per capillarità. Ritrarre il pistone della siringa lentamente e continuamente fino a quando il sangue non viene prelevato. Dopo il sacrificio, posizionare ogni animale sul tavolo di dissezione supino, con le zampe anteriori rivolte verso l'alto e le zampe posteriori verso il basso. Fissare gli arti con degli spilli, quindi cospargere la superficie ventrale dell'animale con una soluzione disinfettante per prepararsi alla dissezione. Usando le forbici, taglia lungo la linea mediana dal pube alla parte superiore dell'addome. Praticare due tagli laterali lungo le superfici mediali di ciascun arto posteriore dall'incisione addominale ventrale della linea mediana ed esporre i visceri addominali. Nei ratti maschi, asportare i testicoli situati nel sacco scrotale intra-addominale. Premere il sacco scrotale per assicurarsi che i testicoli sporgano e afferrarli delicatamente. Usa le pinze per trattenere il grasso viscerale, quindi taglia con cura i testicoli lontano dai visceri. Pesare i testicoli prima di conservarli nella soluzione di Bois per l'analisi istopatologica. Nelle femmine di ratto, afferrare delicatamente l'utero. Identifica le ovaie alle estremità di entrambe le corna uterine e tagliale via dal tessuto adiposo viscerale circostante. Pesare le ovaie dopo l'escissione. Quindi, afferra il fegato con una pinza, assicurandoti che non si rompa. Usa le pinze per afferrare il processo xifoideo e taglia completamente il diaframma con le forbici. Usa le forbici per separare il fegato dal diaframma. Sollevare il processo xifoideo con una pinza ed estrarre il fegato dalla cavità addominale. Dopo l'escissione, pesare il fegato e conservarlo in modo appropriato. Usando le forbici, taglia perpendicolarmente lungo il collo dell'animale. Rimuovere la pelle e la muscolatura per esporre la trachea, dove si trova la ghiandola tiroidea. Taglia delicatamente le estremità della trachea per rimuovere la ghiandola tiroidea. Dopo aver rimosso il testicolo, afferra l'epididimo, che è attaccato al margine posteriore del testicolo ed è contenuto all'interno dello scroto. Per raccogliere lo sperma, pulire la coda dell'epididimo destro rimuovendo il grasso e il tessuto connettivo con le forbici. Separare la coda dalla parte rimanente e metterla in una capsula di Petri contenente un millilitro di DMEM. Tagliare la coda con le forbici e utilizzare una pipetta passata per far scorrere delicatamente il contenuto e facilitare il rilascio. Ora, trasferire il liquido raccolto in una provetta da 15 millilitri e regolare il volume a 10 millilitri con DMEM per ottenere un fattore di diluizione da uno a 10. Pipettare il contenuto per omogeneizzare e creare una sospensione. Dopo aver agitato delicatamente, prelevare 10 microlitri di sospensione per caricare la camera Neubauer.