Name: Rilevazione di alcaloidi regolati dellergot in matrici alimentari mediante cromatografia liquida-spettrometria di mobilità ionica intrappolata-spettrometria di massa a tempo di volo (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-11-22T14:50:00.000+00:00
Duration: 8 min 56 s
Description: Scopri un metodo validato di cromatografia liquida-spettrometria di mobilità ionica-spettrometria di massa ad alta risoluzione per rilevare alcaloidi dell'ergot nelle matrici alimentari.

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<meta charset="utf8"></head><body>Separazione isomerica migliorata degli alcaloidi dell'ergot mediante LC-IMS-MS

<ol><li>Kanu, A. B., Dwivedi, P., Tam, M., Matz, L., Hill, H. H. Jr <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ion+mobility-mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mass+Spectrom%22%5BJournal%5D)">Ion mobility-mass spectrometry.</a> J Mass Spectrom. 43 (1), 1-22 (2008).</li>
<li>Gabelica, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recommendations+for+reporting+ion+mobility+Mass+spectrometry+measurements%5BTitle%5D)+AND+%22Mass+Spectrom+Rev%22%5BJournal%5D)">Recommendations for reporting ion mobility Mass spectrometry measurements.</a> Mass Spectrom Rev. 38 (3), 291-320 (2019).</li>
<li>Feuerstein, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparability+of+steroid+collision+cross+sections+using+three+different+IM-HRMS+technologies%3A+An+interplatform+study%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Soc+Mass+Spectrom%22%5BJournal%5D)">Comparability of steroid collision cross sections using three different IM-HRMS technologies: An interplatform study.</a> J Am Soc Mass Spectrom. 33 (10), 1951-1959 (2022).</li>
<li>Regueiro, J., Negreira, N., Berntssen, M. H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ion-mobility-derived+collision+cross+section+as+an+additional+identification+point+for+multiresidue+screening+of+pesticides+in+fish+feed%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Ion-mobility-derived collision cross section as an additional identification point for multiresidue screening of pesticides in fish feed.</a> Anal Chem. 88 (22), 11169-11177 (2016).</li>
<li>Regueiro, J., Negreira, N., Hannisdal, R., Berntssen, M. H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted+approach+for+qualitative+screening+of+pesticides+in+salmon+feed+by+liquid+chromatography+coupled+to+traveling-wave+ion+mobility%2Fquadrupole+time-of-flight+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Control%22%5BJournal%5D)">Targeted approach for qualitative screening of pesticides in salmon feed by liquid chromatography coupled to traveling-wave ion mobility/quadrupole time-of-flight mass spectrometry.</a> Food Control. 78, 116-125 (2017).</li>
<li>Hernández-Mesa, M., Monteau, F., Le Bizec, B., Dervilly-Pinel, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potential+of+ion+mobility-mass+spectrometry+for+both+targeted+and+non-targeted+analysis+of+phase+II+steroid+metabolites+in+urine%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chim+Acta%3A+X%22%5BJournal%5D)">Potential of ion mobility-mass spectrometry for both targeted and non-targeted analysis of phase II steroid metabolites in urine.</a> Anal Chim Acta: X. 1, 100006(2019).</li>
<li>George, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interplatform+comparison+between+three+ion+mobility+techniques+for+human+plasma+lipid+collision+cross+sections%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chim+Acta%22%5BJournal%5D)">Interplatform comparison between three ion mobility techniques for human plasma lipid collision cross sections.</a> Anal Chim Acta. 1304, 342535(2024).</li>
<li>Mairinger, T., Causon, T. J., Hann, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+potential+of+ion+mobility-mass+spectrometry+for+non-targeted+metabolomics%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Chem+Biol%22%5BJournal%5D)">The potential of ion mobility-mass spectrometry for non-targeted metabolomics.</a> Curr Opin Chem Biol. 42, 9-15 (2018).</li>
<li>Hernández-Mesa, M., Escourrou, A., Monteau, F., Le Bizec, B., Dervilly-Pinel, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+applications+and+perspectives+of+ion+mobility+spectrometry+to+answer+chemical+food+safety+issues%5BTitle%5D)+AND+%22TrAC+Trend+Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Current applications and perspectives of ion mobility spectrometry to answer chemical food safety issues.</a> TrAC Trend Anal Chem. 94, 39-53 (2017).</li>
<li>European, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Commission+Regulation+%28EU%29+2023%2F915+of+25+April+2023+on+maximum+levels+for+certain+contaminants+in+food+and+repealing+Regulation+%28EC%29+No+1881%2F2006%5BTitle%5D)+AND+%22Off+J+Eur+Union%22%5BJournal%5D)">Commission Regulation (EU) 2023/915 of 25 April 2023 on maximum levels for certain contaminants in food and repealing Regulation (EC) No 1881/2006.</a> Off J Eur Union. 119, 103-157 (2023).</li>
<li>Carbonell-Rozas, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Occurrence+of+egot+alkaloids+in+major+and+minor+cereals+from+Northern+Italy%3A+A+three+harvesting+years+scenario%5BTitle%5D)+AND+%22J+Agricl+Food+Chem%22%5BJournal%5D)">Occurrence of egot alkaloids in major and minor cereals from Northern Italy: A three harvesting years scenario.</a> J Agricl Food Chem. 71 (42), 15821-15828 (2023).</li>
<li>Arroyo-Manzanares, N., Gámiz-Gracia, L., García-Campaña, A. M., Diana Di Mavungu, J., De Saeger, S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aArroyo-Manzanares%2C+N+%22Fungal+Metabolites%22">Fungal Metabolites</a>. Jean-Michel Mérillon, J. -M., Ramawat, K. G. , Springer International Publishing. (2016).</li>
<li>van Dongen, P., de Groot, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((History+of+ergot+alkaloids+from+ergotism+to+ergometrine%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Obstet+Gynecol+Reprod+Biol%22%5BJournal%5D)">History of ergot alkaloids from ergotism to ergometrine.</a> Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 60 (2), 109-116 (1995).</li>
<li>European Food Safety Authority. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+and+animal+dietary+exposure+to+ergot+alkaloids%5BTitle%5D)+AND+%22EFSA+J%22%5BJournal%5D)">Human and animal dietary exposure to ergot alkaloids.</a> EFSA J. 15 (7), e04902(2017).</li>
<li>Nam, M., Kim, D., Kim, M. -S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+determination+of+total+ergot+alkaloids+in+wheat+flour+by+Orbitrap+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Chem%22%5BJournal%5D)">Simultaneous determination of total ergot alkaloids in wheat flour by Orbitrap mass spectrometry.</a> Food Chem. 441, 138363(2024).</li>
<li>García-Juan, A., León, N., Armenta, S., Pardo, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+validation+of+an+analytical+method+for+the+simultaneous+determination+of+12+ergot%2C+2+tropane%2C+and+28+pyrrolizidine+alkaloids+in+cereal-based+food+by+LC-MS%2FMS%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Res+Int%22%5BJournal%5D)">Development and validation of an analytical method for the simultaneous determination of 12 ergot, 2 tropane, and 28 pyrrolizidine alkaloids in cereal-based food by LC-MS/MS.</a> Food Res Int. 174 (Pt 1), 113614(2023).</li>
<li>Carbonell-Rozas, L., Mahdjoubi, C. K., Arroyo-Manzanares, N., García-Campaña, A. M., Gámiz-Gracia, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Occurrence+of+ergot+alkaloids+in+barley+and+wheat+from+Algeria%5BTitle%5D)+AND+%22Toxins%22%5BJournal%5D)">Occurrence of ergot alkaloids in barley and wheat from Algeria.</a> Toxins. 13 (5), 316(2021).</li>
<li>Carbonell-Rozas, L., Gámiz-Gracia, L., Lara, F. J., García-Campaña, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+the+main+ergot+alkaloids+and+their+epimers+in+oat-based+functional+foods+by+ultra-high+performance+liquid+chromatography+tandem+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">Determination of the main ergot alkaloids and their epimers in oat-based functional foods by ultra-high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry.</a> Molecules. 26 (12), 3717(2021).</li>
<li>Carbonell-Rozas, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ion+mobility-mass+spectrometry+to+extend+analytical+performance+in+the+determination+of+ergot+alkaloids+in+cereal+samples%5BTitle%5D)+AND+%22J+Chromatogr+A%22%5BJournal%5D)">Ion mobility-mass spectrometry to extend analytical performance in the determination of ergot alkaloids in cereal samples.</a> J Chromatogr A. 1682, 463502(2022).</li>
<li>European Commission. Commission Implementing Regulation (EU) 2023/2782 of 14 December 2023 laying down the methods of sampling and analysis for the control of the levels of mycotoxins in food and repealing Regulation (EC) No 401/2006. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Off+J+Eur+Union%22">Off J Eur Union</a>. , (2023).</li>
<li>Carbonell-Rozas, L., Vander Cruyssen, L., Dall'Asta, C., Leggieri, M. C., Battilani, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fit-for-purpose+method+development+to+determine+co-occurring+multiclass+mycotoxins+in+apple+and+apple+puree+samples%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Anal+Methods%22%5BJournal%5D)">Fit-for-purpose method development to determine co-occurring multiclass mycotoxins in apple and apple puree samples.</a> Food Anal Methods. 16 (8), 1403-1412 (2023).</li>
<li>Laouni, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emerging+mycotoxin+occurrence+in+chicken+feed+and+eggs+from+Algeria%5BTitle%5D)+AND+%22Mycotoxin+Res%22%5BJournal%5D)">Emerging mycotoxin occurrence in chicken feed and eggs from Algeria.</a> Mycotoxin Res. 40, 447-456 (2024).</li>
<li>Ben Hassouna, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mycotoxin+occurrence+in+milk+and+durum+wheat+samples+from+Tunisia+using+dispersive+liquid-liquid+microextraction+and+liquid+chromatography+with+fluorescence+detection%5BTitle%5D)+AND+%22Toxins%22%5BJournal%5D)">Mycotoxin occurrence in milk and durum wheat samples from Tunisia using dispersive liquid-liquid microextraction and liquid chromatography with fluorescence detection.</a> Toxins. 15 (11), 633(2023).</li>
<li>Narváez, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Occurrence+and+exposure+assessment+of+mycotoxins+in+ready-to-eat+tree+nut+products+through+ultra-high+performance+liquid+chromatography+coupled+with+high+resolution+Q-orbitrap+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Metabolites%22%5BJournal%5D)">Occurrence and exposure assessment of mycotoxins in ready-to-eat tree nut products through ultra-high performance liquid chromatography coupled with high resolution Q-orbitrap mass spectrometry.</a> Metabolites. 10 (9), 344(2020).</li>
<li>Arroyo-Manzanares, N., Rodríguez-Estévez, V., García-Campaña, A. M., Castellón-Rendón, E., Gámiz-Gracia, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+principal+ergot+alkaloids+in+swine+feeding%5BTitle%5D)+AND+%22J+Sci+Food+Agric%22%5BJournal%5D)">Determination of principal ergot alkaloids in swine feeding.</a> J Sci Food Agric. 101 (12), 5214-5224 (2021).</li>
<li>Pereira, V. L., Fernandes, J. O., Cunha, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+assessment+of+three+cleanup+procedures+after+QuEChERS+extraction+for+determination+of+trichothecenes+%28type+A+and+type+B%29+in+processed+cereal-based+baby+foods+by+GC-MS%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Chem%22%5BJournal%5D)">Comparative assessment of three cleanup procedures after QuEChERS extraction for determination of trichothecenes (type A and type B) in processed cereal-based baby foods by GC-MS.</a> Food Chem. 182, 143-149 (2015).</li>
<li>Tuzimski, T., Szubartowski, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Method+development+for+selected+bisphenols+analysis+in+sweetened+condensed+milk+from+a+can+and+breast+milk+samples+by+HPLC-DAD+and+HPLC-QqQ-MS%3A+Comparison+of+sorbents+%28Z-SEP%2C+Z-SEP+Plus%2C+PSA%2C+C18%2C+chitin+and+EMR-lipid%29+for+clean-up+of+QuEChERS+extract%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">Method development for selected bisphenols analysis in sweetened condensed milk from a can and breast milk samples by HPLC-DAD and HPLC-QqQ-MS: Comparison of sorbents (Z-SEP, Z-SEP Plus, PSA, C18, chitin and EMR-lipid) for clean-up of QuEChERS extract.</a> Molecules. 24 (11), 2093(2019).</li>
<li>Łozowicka, B., Rutkowska, E., Jankowska, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+QuEChERS+modifications+on+recovery+and+matrix+effect+during+the+multi-residue+pesticide+analysis+in+soil+by+GC%2FMS%2FMS+and+GC%2FECD%2FNPD%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Sci+Pollut+Res%22%5BJournal%5D)">Influence of QuEChERS modifications on recovery and matrix effect during the multi-residue pesticide analysis in soil by GC/MS/MS and GC/ECD/NPD.</a> Environ Sci Pollut Res. 24 (8), 7124-7138 (2017).</li>
<li>Schummer, C., Xandonella, I., van Nieuwenhuyse, A., Moris, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epimerization+of+ergot+alkaloids+in+feed%5BTitle%5D)+AND+%22Heliyon%22%5BJournal%5D)">Epimerization of ergot alkaloids in feed.</a> Heliyon. 6 (6), e04336(2020).</li>
<li>Cherewyk, J. E., Grusie-Ogilvie, T. J., Parker, S. E., Blakley, B. R., Al-Dissi, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+impact+of+storage+temperature+and+time+on+ergot+alkaloid+concentrations%5BTitle%5D)+AND+%22Toxins%22%5BJournal%5D)">The impact of storage temperature and time on ergot alkaloid concentrations.</a> Toxins. 15 (8), 497(2023).</li>
<li>Silva, Â, Mateus, A. R., Barros, S. C., Silva, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ergot+alkaloids+on+cereals+and+seeds%3A+Analytical+methods%2C+occurrence%2C+and+future+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">Ergot alkaloids on cereals and seeds: Analytical methods, occurrence, and future perspectives.</a> Molecules. 28 (20), 7233(2023).</li>
</ol>

La spettrometria di massa a mobilità ionica (IMS) sta diventando una tecnica analitica sempre più utilizzata, spesso presentata come una dimensione di separazione aggiuntiva integrata nella tradizionale cromatografia liquido/gassosa (LC/GC) accoppiata ai flussi di lavoro MS. L'IMS consiste nella separazione di molecole lungo una cella di mobilità, riempita con un gas tampone, sotto un campo elettrico e a pressione atmosferica1. A seconda del rapporto massa/carica (m/z) e della conformazione geometrica, una molecola ionizzata interagirà con il gas tampone mentre si muove attraverso la cella di mobilità, che si riflette nel parametro2 della mobilità ionica (K) e viene calcolato attraverso la seguente equazione:
<img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/67484/67484eq01v2.jpg" style="margin: auto;">
dove D rappresenta la lunghezza totale della deriva, td è il tempo totale di deriva ed E è il campo elettrico. Pertanto, K è misurato in m2 V−1 s−1, anche se per ragioni pratiche è spesso espresso come cm2 V−1 s−1. La capacità intrinseca di muoversi attraverso la cella di mobilità può essere misurata dal tempo di deriva e successivamente convertita nel cosiddetto valore della sezione d'urto di collisione (CCS), che è un parametro altamente riproducibile per ciascuna molecola indipendentemente dallo strumento IMS3. La CCS può essere derivata dalla mobilità seguendo questa equazione:
<img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/67484/67484eq02v2.jpg" style="margin: auto;">
q è la carica dello ione; N la densità numerica del gas tampone; μ la massa ridotta dei partner di collisione tampona gli ioni gas; kB la costante di Boltzmann; e T la temperatura del gas tampone. Pertanto, l'IMS fornisce informazioni aggiuntive complementari ai dati analitici risultanti dalla cromatografia e dalle analisi MS.
È stato dimostrato che l'implementazione dell'IMS nelle piattaforme LC-MS aumenta l'affidabilità delle determinazioni analitiche, soprattutto quando si lavora con composti che si trovano a concentrazioni di tracce. Diversi studi hanno riportato che i metodi LC-IMS-MS migliorano la qualità degli spettri di massa riducendo il rumore di fondo, che in ultima analisi influisce sulla sensibilità del metodo, e riduce il tasso di falsi positivi e negativi forniti dalle metodologie LC-MS multi-residuo 4,5,6. Inoltre, la riproducibilità dei valori CCS consente il confronto non solo tra diversi strumenti che utilizzano la stessa tecnologia, ma anche tra diverse tecnologie di mobilità ionica, vale a dire la spettrometria di mobilità ionica a onde viaggianti (TWIMS), la spettrometria di mobilità ionica intrappolata (TIMS) e la spettrometria di mobilità ionica a tubo di deriva (DTIMS)2,7, che sono i sistemi più frequentemente utilizzati 1. Pertanto, una notevole conseguenza del potenziale della CCS come parametro di identificazione risiede nella possibilità di costruire librerie di CCS, che si riflette nella sua applicabilità negli studi di metabolomica8. Tuttavia, una delle caratteristiche più potenti dell'IMS è la capacità di separare i composti isomerici e isobarici che potrebbero non essere sufficientemente risolti dai metodi LC-MS. Questo può essere il caso quando si lavora con grandi insiemi di analiti di interesse in matrici complesse, che è una situazione comune nell'analisi ambientale e alimentare. In questo contesto, sono stati proposti metodi LC-IMS-MS per il monitoraggio dei pesticidi e, in misura minore, dei farmaci veterinari e delle micotossine negli alimenti9.
Grazie al loro elevato potere risolutivo e selettività, le piattaforme LC/GC-IMS-MS emergono come gli strumenti più utili per affrontare alcune delle attuali sfide nella sicurezza alimentare, in particolare quelle relative alle miscele isomeriche. La preoccupazione per la salute legata alle miscele isomeriche come contaminanti alimentari è stata riflessa nell'attuale legislazione europea, che, ad esempio, limita la concentrazione massima di sei alcaloidi principali dell'ergot (EA) e dei loro corrispondenti sei epimeri in diversi prodotti alimentari10.
Gli EA costituiscono una famiglia di metaboliti secondari tossici prodotti da un'ampia gamma di funghi, principalmente della famiglia delle Clavicipitaceae (ad esempio, Claviceps purpurea, il più importante produttore di EA grazie alla sua ampia gamma di ospiti), ma anche Trichocomaceae, che possono parassitare il seme di piante viventi (come segale, orzo, grano e avena) al momento della fioritura11, 12. In condizioni specifiche, in particolare la temperatura e l'attività dell'acqua, i funghi Claviceps possono produrre EA che si accumulano nei corpi fruttiferi, noti come sclerozi o segale cornuta, nella coltura ospite. In una certa misura, gli EA possono resistere alla lavorazione della materia prima fino a raggiungere il prodotto finale; quindi, irrompendo nella catena alimentare. L'ingestione di cibo contaminato può portare all'intossicazione da EA, nota come ergotismo, che si presenta con sintomi acuti come dolore addominale, vomito, sensazione di bruciore della pelle, insonnia e allucinazioni13. Per ridurre l'impatto degli EA sulla salute umana, la Commissione europea ha fissato i livelli massimi (ML) in diversi alimenti per la somma dei principali EA: gli epimeri R ergometrina (Em), ergotamina (Et), ergosina (Es), ergocristina (Ecr), ergokryptina (Ekr) ed ergocornina (Eco) e i loro corrispondenti epimeri S: ergometrinina (Emn), ergosinina (Esn), ergotaminina (Etn), ergocorninina (Econ), ergokryptinine (Ekrn), ed ergocristinina (Ecrn). Questi composti possono epimerizzare da forme R a S e viceversa, soprattutto in caso di esposizione a luce intensa, conservazione prolungata o contatto con alcuni solventi ad alto o basso pH 12. Sebbene la percentuale di forme R e S possa variare a seconda delle condizioni, il gruppo CONTAM dell'EFSA ha segnalato una maggiore presenza di forme R rispetto alle forme S dopo aver esaminato la letteratura disponibile sugli EA nei prodotti alimentari14. Pertanto, i ML variano a seconda di diversi fattori, come la suscettibilità della coltura, il grado di lavorazione o la frequenza di consumo. Nel quadro dell'UE, i valori limite di colesterolo per i prodotti lavorati di orzo, frumento, farro e avena sono stati fissati a 50 o 150 μg/kg (a seconda del tenore di ceneri inferiore o superiore a 900 mg/100 g, rispettivamente), mentre i cereali destinati direttamente al consumo umano sono soggetti a un limite massimo di 150 μg/kg, ad eccezione degli alimenti per la prima infanzia a base di cereali, in cui il ML è ridotto a 20 μg/kg10.
Questa legislazione rigorosa richiede metodologie analitiche sufficientemente sensibili da determinare i livelli di concentrazione in tracce (μg/kg) e identificare correttamente gli EA regolati e i loro epimeri corrispondenti, poiché entrambe le forme, gli isomeri R e S, possono essere trovate insieme in campioni contaminati. Questo compito rappresenta una grande sfida poiché ogni coppia tossina-epimero condivide lo stesso identico modello di massa e frammentazione. Inoltre, una corretta separazione cromatografica tra i due composti può essere complessa. Pertanto, sono necessari gradienti LC ben ottimizzati per evitare un'errata quantificazione quando gli epimeri EA si verificano in concomitanza nei campioni alimentari. Sebbene diversi studi abbiano riportato metodi LC-MS per la determinazione univoca degli EA 15,16,17,18, il metodo cromatografico deve essere studiato ampiamente per ottenere un'adeguata separazione dei picchi cromatografici per identificare inequivocabilmente gli EA. Tuttavia, questo non è solitamente fattibile per i metodi multiclasse in cui vengono determinati contemporaneamente contaminanti appartenenti a diverse famiglie chimiche. In questo contesto, un recente studio condotto da Carbonell-Rozas, Hernández-Mesa, et al.19 ha riportato un metodo LC-IMS-MS per la quantificazione degli EA in campioni di frumento e orzo, utilizzando due diversi strumenti TWIMS che hanno fornito valori CCS riproducibili e bassi limiti di quantificazione (LOQ) per rilevare eventuali non conformità in conformità con la normativa vigente. Pertanto, l'obiettivo di questo protocollo è quello di mostrare come l'integrazione dell'IMS nei flussi di lavoro LC-MS contribuisca alla separazione degli EA isomeri, migliorando la selettività del metodo analitico. Inoltre, illustra come la generazione di librerie CCS attraverso la caratterizzazione di standard analitici fornisca una maggiore affidabilità per l'identificazione delle micotossine. Questo protocollo è stato concepito per spiegare chiaramente i vantaggi dell'implementazione dell'IMS nell'analisi della sicurezza alimentare, prendendo come esempio la determinazione degli EA nei cereali. Questo protocollo riguarda il trattamento del campione basato su una procedura QuEChERS, l'analisi del campione mediante LC-TIMS-MS e l'estrazione e l'interpretazione dei dati IMS.

<table><tbody><tr><td>Acetonitrile</td><td>VWR</td><td>83640.32</td><td></td></tr><tr><td>Provette in vetro ambrato 4 mL</td><td>VWR</td><td>548-0052</td><td></td></tr><tr><td>Provette in vetro ambrato 12 mL</td><td>VWR</td><td>548-0903</td><td></td></tr><tr><td>Fiale ambrate 1,5 mL</td><td>Agilent</td><td>5190-9063</td><td></td></tr><tr><td>Carbonato di ammonio</td><td>Fluka</td><td>9716</td><td></td></tr><tr><td>Bilancia analitica BAS 31&nbsp;</td><td>Boeco</td><td>4400519</td><td></td></tr><tr><td>Balance CP 323 S&nbsp;</td><td>Sartorius</td><td>23-84182</td><td></td></tr><tr><td>C18</td><td>Supelco</td><td>52604-U</td><td></td></tr><tr><td>Provette per centrifuga, 15 mL</td><td>VWR</td><td>525-1082</td><td></td></tr><tr><td>Provette per centrifuga, 50 mL</td><td>VWR</td><td>525-0155</td><td></td></tr><tr><td>Centrifuga universale 320 R</td><td>Hettich</td><td>1406</td><td></td></tr><tr><td>Bussola HyStar&nbsp;</td><td>Bruker</td><td></td><td>Software di acquisizione</td></tr><tr><td>DataAnalysis</td><td>Bruker</td><td></td><td>Software qualitativo</td></tr><tr><td>Elute PLUS&nbsp; UHPLC</td><td>Bruker</td><td></td><td></td></tr><tr><td>EVA EC-S evaporatore</td><td>VLM</td><td>V830.012.12</td><td></td></tr><tr><td>Acido formico GR per analisi ACS, Reag. Ph Eur</td><td>Merck</td><td>100264</td><td></td></tr><tr><td>Grinder TitanMill300</td><td>Cecotec</td><td>1559</td><td></td></tr><tr><td>Metanolo</td><td>VWR</td><td>83638.32</td><td></td></tr><tr><td>Sistema di purificazione dell'acqua Milli-Q (18,2 M&Omega; cm)</td><td>Millipore</td><td>ZD5211584</td><td></td></tr><tr><td>Puntali per pipette 1- 5 mL</td><td>Labortecnic</td><td>162005</td><td></td></tr><tr><td>Puntali per pipette 100 - 1000 &; L</td><td>Labortecnic</td><td>1622222</td><td></td></tr><tr><td>Puntali per pipette 5 - 200 &; micro; L</td><td>Labortecnic</td><td>162001</td><td></td></tr><tr><td>Pippette Transferpette S variabile, DE-M 10 - 100 &micro; </td><td>L MARCA</td><td>704774</td><td></td></tr><tr><td>Pippette Transferpette S variabile, DE-M 100 - 1000 &micro; L</td><td>MARCA</td><td>704780</td><td></td></tr><tr><td>Pippette Transferpette S variabile, DE-M 500 - 5000 &micro; L</td><td>BRAND</td><td>704782</td><td></td></tr><tr><td>Siringa 2 mL</td><td>VWR</td><td>613-2003</td><td></td></tr><tr><td>Filtro per siringa 13 mm, 0,22&micro; m</td><td>Phenomenex</td><td>AF-8-7707-12</td><td></td></tr><tr><td>TASQ</td><td>Bruker</td><td></td><td>Software quantitativo</td></tr><tr><td>timsTOFPro2 IM-HRMS</td><td>Bruker</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Vortex Genie 2</td><td>Scientific Industries</td><td>15547335</td><td></td></tr><tr><td>Zorbax Eclipse Plus RRHD C18 colonna (50&nbsp; x&nbsp; 2,1 mm, 1,8 & micro; m granulometria)</td><td>Agilent&nbsp;</td><td>959757-902</td><td></td></tr><tr><td>Z-Sep+</td><td>Supelco</td><td>55299-U</td><td>Assorbente a base di zirconia</td></tr><tr><td>Alcaloidi dell'ergot</td><td></td><td></td><td>CAS registro sorbente</td></tr><tr><td>Ergocornina (Eco)</td><td>Techno Spec</td><td>E178</td><td>564-36-3</td></tr><tr><td>Ergocorninina (Econ)</td><td>Techno Spec</td><td>E130</td><td>564-37-4</td></tr><tr><td>Ergocristina (Ecr)</td><td>Techno Spec</td><td>E180</td><td>511-08-0</td></tr><tr><td>Ergocristinina (Ecrn)</td><td>Techno Spec</td><td>E188</td><td>511-07-9</td></tr><tr><td>Ergokryptine (Ekr)</td><td>Techno Spec</td><td>E198</td><td>511-09-1</td></tr><tr><td>Ergopkryptinine (Ekrn)</td><td>Techno Spec</td><td>E190</td><td>511-10-4</td></tr><tr><td>Ergometrina (Em)</td><td>Romer Labs</td><td>"002067"</td><td>60-79-7</td></tr><tr><td>Ergometrinina (Emn)</td><td>Romer Labs</td><td>LMY-090-5ML</td><td>479-00-5</td></tr><tr><td>Ergosina (Es)</td><td>Techno Spec</td><td>E184</td><td>561-94-4</td></tr><tr><td>Ergosinina (Esn)</td><td>Techno Spec</td><td>E194</td><td>596-88-3</td></tr><tr><td>Ergotamina (Et)</td><td>Romer Labs</td><td>"002069"</td><td>113-15-5</td></tr><tr><td>Ergotaminina (Etn)</td><td>Romer Labs</td><td>"002075"</td><td>639-81-6</td></tr></tbody></table>

rilevazione di alcaloidi regolati dell'ergot in matrici alimentari mediante cromatografia liquida-spettrometria di mobilità ionica intrappolata-spettrometria di massa a tempo di volo

Detection of Regulated Ergot Alkaloids in Food Matrices by Liquid Chromatography-Trapped Ion Mobility Spectrometry-Time-of-Flight Mass Spectrometry

In primo luogo, le soluzioni standard funzionanti sono state iniettate nello strumento LC-IMS-MS per ottenere tutte le caratteristiche di identificazione (ad esempio, tempo di ritenzione, CCS e spettri di massa) di ciascun EA analizzato qui. Poiché i parametri di identificazione, ad eccezione della massa esatta, erano inizialmente sconosciuti, il metodo di acquisizione si è basato su un evento a due scansioni, iniziando con una scansione completa dell'intero spettro di massa seguita da un bbCID. Il modo retrospettivo di affrontare questo studio è reso possibile dallo spettrometro di massa ad alta risoluzione Q-TOF, che acquisisce e genera dati senza alcun input o informazione preliminare sugli analiti. La massa esatta di ciascuna coppia di epimeri EA principali è stata ricercata all'interno dei dati acquisiti per ottenere anche le loro altre caratteristiche di identificazione (ad esempio, tempi di ritenzione e valori CCS), che verranno utilizzate per creare un metodo quantitativo per l'elaborazione dei dati del campione. I parametri sperimentali ottenuti dopo l'analisi sono dettagliati nella Tabella 1.
La separazione cromatografica ha fornito picchi chiari e ben risolti per ciascuna coppia EA-epimero principale, ad eccezione di Et ed Etn (Figura 3). Le somiglianze tra i tempi di ritenzione dei picchi cromatografici di Et (6,85 min) e Etn (6,98 min) hanno fornito una risoluzione inadeguata tra di loro, che mostra una leggera sovrapposizione e, di conseguenza, può portare a un'errata quantificazione considerando che i tempi di ritenzione possono variare durante le corse. Ciononostante, si osserva una separazione di base di questa stessa coppia di molecole negli spettri di mobilità ionica (Figura 4), ottenendo valori di CCS distinguibili per ciascun analita; quindi, mostrando i vantaggi dell'implementazione dell'IMS quando si lavora con un insieme di composti strutturalmente simili.
Una volta stabiliti i parametri di identificazione per ogni EA, è stato preparato il set di campioni in conformità alla normativa europea vigente per la validazione delle metodologie analitiche20. In base al ML stabilito dalle autorità europee, sono stati selezionati tre livelli di calibrazione: il limite stesso (150 μg/kg), 1,5 volte il ML (225 μg/kg) e 0,5 volte il ML (75 μg/kg). È molto importante tenere presente che questo ML corrisponde alla somma totale dei 12 EA. Ai fini della validazione, è stato considerato un contributo uguale per il ML; quindi, i livelli di concentrazione testati erano correlati a 12,50, 18,75 e 6,25 μg/kg, rispettivamente, per ogni EA. Inoltre, un set di otto campioni bianchi e due curve di calibrazione sono stati preparati in solvente pulito (curva di calibrazione standard) insieme a una curva di calibrazione abbinata alla matrice, e sono stati analizzati all'interno dello stesso lotto analitico. L'intervallo lineare è stato valutato su sette punti nell'intervallo di concentrazione da 0,08 a 41,6 ng/L (livelli di concentrazione strumentale per ciascun EA). Le prestazioni del metodo sono mostrate nella Tabella 2.
In primo luogo, le curve di calibrazione per ciascun composto sono state costruite nel software quantitativo e l'intervallo lineare è stato valutato utilizzando l'area del picco in funzione della concentrazione dell'analita. È importante ottenere un buon adattamento lineare (R2 &gt; 0,99) garantendo al contempo una deviazione standard relativa inferiore al 20% in termini di precisione per ogni livello di concentrazione. A tale scopo, la ponderazione della curva può essere impostata su "1/x". Una buona linearità è stata osservata per tutti gli analiti nell'intervallo lineare 2,6-41,3 ng/mL (1,95-31,2 g/kg nei campioni); anche se per alcuni analiti, l'intervallo lineare era ancora più ampio con un limite inferiore a 0,65 ng/mL pur mantenendo un rapporto segnale/rumore superiore a 10. La Figura 5 mostra un esempio della curva di calibrazione (a) standard e (b) a matrice per Econ.
Il confronto tra le pendenze delle curve di calibrazione standard e quelle abbinate alla matrice fornisce informazioni su come i potenziali co-eluenti della matrice possono influenzare l'analisi. Questo disturbo è noto come effetto di soppressione/potenziamento del segnale (SSE) e può essere valutato confrontando le pendenze di entrambe le curve di calibrazione e applicando la seguente equazione:
<img alt="Equation 3" src="/files/ftp_upload/67484/67484eq03v3.jpg" style="margin: auto;">
Come mostrato nella Tabella 2, l'SSE variava da -23 a 18%, indicando che la presenza della matrice non ha quasi alcuna influenza sulla ionizzazione degli analiti; Pertanto, la loro quantificazione può essere effettuata utilizzando la curva di calibrazione standard.
Quindi, conoscendo l'influenza della matrice, il passo successivo consiste nella quantificazione dei campioni addizionati ai tre livelli di concentrazione precedentemente citati, utilizzando le curve di calibrazione, per valutare quanta parte dell'EA iniziale viene recuperata dopo il processo di estrazione. A causa del basso SSE mostrato, le curve di calibrazione preparate nel solvente sono state utilizzate nel software quantitativo per determinare automaticamente la concentrazione dei campioni addizionati. Per calcolare il recupero, la concentrazione misurata è stata poi confrontata con la concentrazione teorica seguendo questa equazione:
<img alt="Equation 4" src="/files/ftp_upload/67484/67484eq04.jpg" style="margin: auto;">
Tutti gli analiti hanno mostrato valori di recupero compresi tra il 72 e il 117% per tutti i livelli di concentrazione. Ciò significa che il metodo ha fornito misurazioni della concentrazione nei campioni addizionati abbastanza vicine ai valori teorici, mostrando quindi la corretta esattezza. Tuttavia, il metodo ha mostrato una precisione limitata per l'Etn, i cui valori di concentrazione variavano dal 43% al 45% riferiti ai livelli di fortificazione teorici. La precisione delle misurazioni è stata valutata calcolando la deviazione standard relativa (RSD) dei recuperi per ogni livello di fortificazione ottenuto nello stesso giorno (RSDr, n = 3) e durante l'intero studio (RSDWR, n = 9). È stata osservata una precisione accettabile considerando che tutti i valori variavano al di sotto del 20%.
Infine, per valutare la sensibilità del metodo proposto, i LOQ sono stati stimati sulla base della curva di calibrazione a matrice. In questo protocollo, questi valori sono stati determinati come la concentrazione più bassa all'interno dell'intervallo lineare della curva che mostrava uno scostamento inferiore al 20% dal valore teorico e un rapporto segnale/rumore superiore a 10. Come mostrato nella Tabella 2, i LOQ variavano da 0,65 a 2,60 ng/mL (da 0,49 a 1,95 μg/kg nei campioni).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67484/67484fig01.jpg"> 
Figura 1: Flusso di lavoro schematico per la preparazione di soluzioni standard intermedie e di lavoro. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67484/67484fig01large.jpg" target="_blank">Fare clic qui per visualizzare una versione più ampia di questa figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67484/67484fig02.jpg"> 
Figura 2: Lista di lavoro progettata per l'analisi LC-IMS-MS nello studio di convalida di campioni di cereali aggregati. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67484/67484fig02large.jpg" target="_blank">Fare clic qui per visualizzare una versione più ampia di questa figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67484/67484fig03.jpg"> 
Figura 3: Cromatogrammi ionici estratti sovrapposti degli EA analizzati. Abbreviazioni: EA = alcaloidi della segale cornuta; Eco = Ergocornina; Econ = Ergocorninina; Ecr = Ergocristina; Ecrn = ergocristinina; Ekr = Ergokryptine; Ekrn = Ergokryptinine; Emn = ergometrinina; Es = ergosina; Esn = ergosinina; Et = Ergotamina; Etn = Ergotaminina. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67484/67484fig03large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67484/67484fig04.jpg"> 
Figura 4: Cromatogramma ionico estratto (superiore) e spettri di mobilità ionica (inferiore) di Et ed Etn. Abbreviazioni: Et = Ergotamina; Etn = Ergotaminina. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67484/67484fig04large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67484/67484fig05.jpg"> 
Figura 5: Curve di calibrazione di Econ. (A) solvente puro e (B) abbinato alla matrice. Abbreviazione: Econ = Ergocorninina. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67484/67484fig05large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Analiti</td>
			<td>Rt (min)</td>
			<td>CCS (Å2)</td>
			<td>[M+H]+ (m/z)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eco</td>
			<td>6.95</td>
			<td>231.67</td>
			<td>562.3029</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Econ</td>
			<td>8.21</td>
			<td>229.96</td>
			<td>562.3029</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ecr</td>
			<td>8.61</td>
			<td>237.74</td>
			<td>610.3029</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ercn</td>
			<td>9.85</td>
			<td>235.56</td>
			<td>610.3029</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ekr</td>
			<td>8.15</td>
			<td>233.61</td>
			<td>576.3185</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ekrn</td>
			<td>9.38</td>
			<td>229.93</td>
			<td>576.3185</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Em</td>
			<td>3.57</td>
			<td>179.35</td>
			<td>326.1668</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Emn</td>
			<td>4.48</td>
			<td>179.01</td>
			<td>326.1668</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ES</td>
			<td>6.41</td>
			<td>229.29</td>
			<td>548.2872</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Esn</td>
			<td>6.54</td>
			<td>226.65</td>
			<td>548.2872</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Et</td>
			<td>6.85</td>
			<td>230.33</td>
			<td>582.2716</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Etn</td>
			<td>6.98</td>
			<td>228.3</td>
			<td>582.2716</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabella 1: Parametri LC-IMS-MS caratterizzati per l'identificazione univoca degli alcaloidi dell'ergot applicando il metodo descritto in questo protocollo. Abbreviazioni: Rt = Tempo di ritenzione; CCS = Sezione trasversale di collisione; LC-IMS-MS = cromatografia liquida-mobilità ionica-spettrometria di massa.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td colspan="3">Recupero (%)</td>
			<td colspan="3">Precisione (%) [RSDr, (RSDWR)]</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Analiti</td>
			<td>Linearità (R2)</td>
			<td>SSE (%)</td>
			<td>0,5 ML</td>
			<td>ML</td>
			<td>1,5 ML</td>
			<td>0,5 ML</td>
			<td>ML</td>
			<td>1,5 ML</td>
			<td>LOQ nel campione (μg/kg)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eco</td>
			<td>0.9937</td>
			<td>-23</td>
			<td>114</td>
			<td>111</td>
			<td>100</td>
			<td>6 (15)</td>
			<td>4 (19)</td>
			<td>13 (17)</td>
			<td>0.49</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Econ</td>
			<td>0.9915</td>
			<td>-12</td>
			<td>105</td>
			<td>117</td>
			<td>124</td>
			<td>6 (10)</td>
			<td>7 (18)</td>
			<td>8 (14)</td>
			<td>0.49</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ecr</td>
			<td>0.9965</td>
			<td>18</td>
			<td>79</td>
			<td>107</td>
			<td>110</td>
			<td>13 (19)</td>
			<td>13 (18)</td>
			<td>6 (18)</td>
			<td>0.49</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ercn</td>
			<td>0.9906</td>
			<td>-20</td>
			<td>99</td>
			<td>110</td>
			<td>104</td>
			<td>10 (15)</td>
			<td>11 (10)</td>
			<td>12 (10)</td>
			<td>0.49</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ekr</td>
			<td>0.992</td>
			<td>-10</td>
			<td>106</td>
			<td>101</td>
			<td>93</td>
			<td>6 (9)</td>
			<td>7 (7)</td>
			<td>10 (9)</td>
			<td>0.49</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ekrn</td>
			<td>0.9925</td>
			<td>-16</td>
			<td>97</td>
			<td>118</td>
			<td>114</td>
			<td>5 (11)</td>
			<td>7 (4)</td>
			<td>9 (9)</td>
			<td>0.98</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Em</td>
			<td>0.9947</td>
			<td>-9</td>
			<td>72</td>
			<td>79</td>
			<td>74</td>
			<td>7 (8)</td>
			<td>6 (5)</td>
			<td>9 (9)</td>
			<td>0.98</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Emn</td>
			<td>0.9909</td>
			<td>-32</td>
			<td>83</td>
			<td>87</td>
			<td>84</td>
			<td>6 (5)</td>
			<td>11 (10)</td>
			<td>7 (9)</td>
			<td>1.95</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ES</td>
			<td>0.9953</td>
			<td>-16</td>
			<td>89</td>
			<td>112</td>
			<td>111</td>
			<td>5 (7)</td>
			<td>8 (5)</td>
			<td>15 (8)</td>
			<td>0.98</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Esn</td>
			<td>0.9971</td>
			<td>-13</td>
			<td>86</td>
			<td>90</td>
			<td>81</td>
			<td>3 (6)</td>
			<td>14 (12)</td>
			<td>10 (10)</td>
			<td>0.49</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Et</td>
			<td>0.9953</td>
			<td>-16</td>
			<td>79</td>
			<td>88</td>
			<td>81</td>
			<td>12 (15)</td>
			<td>19 (18)</td>
			<td>11 (20)</td>
			<td>0.98</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Etn</td>
			<td>0.9997</td>
			<td>-1</td>
			<td>45</td>
			<td>43</td>
			<td>44</td>
			<td>9 (12)</td>
			<td>5 (13)</td>
			<td>12 (17)</td>
			<td>0.98</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabella 2: Prestazioni del metodo degli EA in termini di linearità, effetto matrice, recupero, precisione e limiti di quantificazione. Abbreviazioni: Eco = Ergocornina; Econ = Ergocorninina; Ecr = Ergocristina; Ecrn = ergocristinina; Ergokryptine = Ekr; Ergokryptinine = Ekrn; Emn = ergometrinina; Es = ergosina; Esn = ergosinina; Et = Ergotamina; Etn = Ergotaminina; LOQ = Limite di quantificazione; ML = Livello massimo; RSDr = deviazione standard relativa di ripetibilità; RSDWR = all'interno della deviazione standard relativa del laboratorio; SEE = effetto di soppressione/potenziamento.

Rilevazione di alcaloidi regolati dell'ergot in matrici alimentari mediante cromatografia liquida-spettrometria di mobilità ionica intrappolata-spettrometria di massa a tempo di volo

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Questo studio ha sviluppato una cromatografia liquida ad alte prestazioni abbinata al metodo della spettrometria di massa a tripla quadrupola (HPLC-QQQ-MS) per identificare e quantificare gli alcaloidi tropani (iociammina, anisodamina, scopolamina) in Anisodus tanguticus. Il metodo si rivelò rapido, accurato e affidabile per l'analisi ad alto rendimento delle piante medicinali.

Un metodo HPLC-QQQ-MS efficiente e rapido per la quantificazione degli alcaloidi tropani nelle piante medicinali

La profilazione dei metaboliti non mirati mediante cromatografia liquida ad alte prestazioni accoppiata con spettrometria di massa (UPLC-MS) è una tecnica potente per studiare il metabolismo.  Questo articolo descrive un flusso di lavoro tipico utilizzato per la profilazione dei metaboliti non mirati del siero, tra cui l'organizzazione e la preparazione dei campioni, l'acquisizione dei dati, l'analisi dei dati, il controllo di qualità e l'identificazione dei metaboliti.

Su larga scala e non mirato Profiling Metabolomica di siero da Ultra Performance Liquid Chromatography-Spettrometria di Massa (UPLC-MS)

Non mirati metabolomica fornisce una ipotesi la generazione di un'istantanea di un profilo di metabolico. Questo protocollo dimostrerà la estrazione e l'analisi delle metaboliti provenienti da cellule, siero, o tessuto. Una gamma di metaboliti vengono intervistati usando l'estrazione in fase liquido-liquido, microflusso UltraPerformance liquida cromatografia in fase / ad alta-risoluzione di massa spettrometria di (UPLC-HRMS) accoppiato ad software di analisi differenziale di.

Metabolomica non mirati da fonti biologiche Uso UltraPerformance cromatografia liquida-spettrometria di massa ad alta risoluzione (UPLC-HRMS)

Un protocollo per determinare l'efficacia di fotocatalizzatori in degradanti aria interna concentrazione (ppb) modello volatili organici carboni come 2-propanolo è descritto.

Analizzando la foto-ossidazione di 2-propanolo a concentrazione a livello dell'aria interna mediante spettrometria di mobilità dello ione asimmetrica campo

Qui, descriviamo un'analisi cromatografica accoppiata con la separazione di mobilità dello ione dei precursori del peptide seguita dalla ad alta risoluzione (~ 30.000) MS-rilevazione dei frammenti peptidici per la quantificazione degli standard del peptide a spillo in un anticorpo monoclonale digest.

Un saggio di HS-MRM per la quantificazione delle proteine di cellula ospite in biofarmaceutica di proteine mediante spettrometria di massa di liquido cromatografia dello ione mobilità QTOF

La spettrometria di massa ionica secondaria a tempo di volo viene applicata per dimostrare la morfologia chimica di mappatura e corrosione all'interfaccia metallo-vernice di una lega di alluminio dopo essere stata esposta ad una soluzione salina rispetto ad un campione esposto all'aria.

Corrosione dell'imaging nell'interfaccia Metal-Paint con spettrometria di massa ionica secondaria a tempo di volo

Scopri un metodo validato di cromatografia liquida-spettrometria di mobilità ionica-spettrometria di massa ad alta risoluzione per rilevare alcaloidi dell'ergot nelle matrici alimentari.

Rilevazione di alcaloidi regolati dellergot in matrici alimentari mediante cromatografia liquida-spettrometria di mobilità ionica intrappolata-spettrometria di massa a tempo di volo (Video) | JoVE Journal

Rilevazione di alcaloidi regolati dell'ergot in matrici alimentari mediante cromatografia liquida-spettrometria di mobilità ionica intrappolata-spettrometria di massa a tempo di volo

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