Name: Valutazione dei geni correlati alla crescita anormale di cellule staminali e progenitrici ematopoietiche combinando la tecnologia CRISPR/Cas9 con il conteggio delle cellule (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-02T12:55:00.000+00:00
Duration: 7 min 1 s
Description: Scopri come identificare geni chiave per la proliferazione anomala di cellule staminali ematopoietiche combinando CRISPR/Cas9 con saggi CCK-8. Questo metodo rivela potenziali bersagli terapeutici per la leucemia.

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<ol><li>Wilkinson, A. C., Igarashi, K. J., Nakauchi, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Haematopoietic+stem+cell+self-renewal+in+vivo+and+ex+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Genet%22%5BJournal%5D)">Haematopoietic stem cell self-renewal in vivo and ex vivo.</a> Nat Rev Genet. 21 (9), 541-554 (2020).</li>
<li>Eaves, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hematopoietic+stem+cells%3A+Concepts%2C+definitions%2C+and+the+new+reality%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Hematopoietic stem cells: Concepts, definitions, and the new reality.</a> Blood. 125 (17), 2605-2613 (2015).</li>
<li>Seita, J., Weissman, I. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hematopoietic+stem+cell%3A+Self-renewal+versus+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22Wiley+Interdiscip+Rev+Syst+Biol+Med%22%5BJournal%5D)">Hematopoietic stem cell: Self-renewal versus differentiation.</a> Wiley Interdiscip Rev Syst Biol Med. 2 (6), 640-653 (2010).</li>
<li>Vetrie, D., Helgason, G. V., Copland, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+leukaemia+stem+cell%3A+Similarities%2C+differences+and+clinical+prospects+in+cml+and+aml%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">The leukaemia stem cell: Similarities, differences and clinical prospects in cml and aml.</a> Nat Rev Cancer. 20 (3), 158-173 (2020).</li>
<li>Chopra, M., Bohlander, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+cell+of+origin+and+the+leukemia+stem+cell+in+acute+myeloid+leukemia%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Chromosomes+Cancer%22%5BJournal%5D)">The cell of origin and the leukemia stem cell in acute myeloid leukemia.</a> Genes Chromosomes Cancer. 58 (12), 850-858 (2019).</li>
<li>Cox, C. V., Diamanti, P., Evely, R. S., Kearns, P. R., Blair, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+CD133+on+leukemia-initiating+cells+in+childhood+all%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Expression of CD133 on leukemia-initiating cells in childhood all.</a> Blood. 113 (14), 3287-3296 (2009).</li>
<li>González-García, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IL-7R+is+essential+for+leukemia-initiating+cell+activity+of+T-cell+acute+lymphoblastic+leukemia%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">IL-7R is essential for leukemia-initiating cell activity of T-cell acute lymphoblastic leukemia.</a> Blood. 134 (24), 2171-2182 (2019).</li>
<li>Jinek, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+programmable+dual-rna-guided+DNA+endonuclease+in+adaptive+bacterial+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">A programmable dual-rna-guided DNA endonuclease in adaptive bacterial immunity.</a> Science. 337 (6096), 816-821 (2012).</li>
<li>Porteus, M. H., Baltimore, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chimeric+nucleases+stimulate+gene+targeting+in+human+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Chimeric nucleases stimulate gene targeting in human cells.</a> Science. 300 (5620), 763-763 (2003).</li>
<li>Wang, S. -W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+applications+and+future+perspective+of+CRISPR%2FCas9+gene+editing+in+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cancer%22%5BJournal%5D)">Current applications and future perspective of CRISPR/Cas9 gene editing in cancer.</a> Mol Cancer. 21 (1), (2022).</li>
<li>Zhao, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HIT-Cas9%3A+A+CRISPR%2Fcas9+genome-editing+device+under+tight+and+effective+drug+control%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther+Nucleic+Acids%22%5BJournal%5D)">HIT-Cas9: A CRISPR/cas9 genome-editing device under tight and effective drug control.</a> Mol Ther Nucleic Acids. 13, 208-219 (2018).</li>
<li>Joung, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genome-scale+CRISPR-Cas9+knockout+and+transcriptional+activation+screening%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Genome-scale CRISPR-Cas9 knockout and transcriptional activation screening.</a> Nat Protoc. 12 (4), 828-863 (2017).</li>
<li>Kühn, R., Schwenk, F., Aguet, M., Rajewsky, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inducible+gene+targeting+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Inducible gene targeting in mice.</a> Science. 269 (5229), 1427-1429 (1995).</li>
<li>Arnheiter, H., Skuntz, S., Noteborn, M., Chang, S., Meier, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transgenic+mice+with+intracellular+immunity+to+influenza+virus%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Transgenic mice with intracellular immunity to influenza virus.</a> Cell. 62 (1), 51-61 (1990).</li>
<li>Randall, T. D., Weissman, I. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phenotypic+and+functional+changes+induced+at+the+clonal+level+in+hematopoietic+stem+cells+after+5-fluorouracil+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Phenotypic and functional changes induced at the clonal level in hematopoietic stem cells after 5-fluorouracil treatment.</a> Blood. 89 (10), 3596-3606 (1997).</li>
<li>Gavrilescu, L. C., Van Etten, R. A. Murine retroviral bone marrow transplantation models for the study of human myeloproliferative disorders. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGavrilescu%2C+LC+%22Curr+Protoc+Pharmacol%22">Curr Protoc Pharmacol</a>. Chapter 14 (Unit 14.10), (2008).</li>
<li>Pinello, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analyzing+CRISPR+genome-editing+experiments+with+CRISPResso%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Analyzing CRISPR genome-editing experiments with CRISPResso.</a> Nat Biotechnol. 34 (7), 695-697 (2016).</li>
<li>Cai, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+genome-wide+long+noncoding+RNA+CRISPRi+screen+identifies+PRANCR+as+a+novel+regulator+of+epidermal+homeostasis%5BTitle%5D)+AND+%22Genome+Res%22%5BJournal%5D)">A genome-wide long noncoding RNA CRISPRi screen identifies PRANCR as a novel regulator of epidermal homeostasis.</a> Genome Res. 30 (1), 22-34 (2020).</li>
<li>Ng, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CRISPR-mediated+modeling+and+functional+validation+of+candidate+tumor+suppressor+genes+in+small+cell+lung+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">CRISPR-mediated modeling and functional validation of candidate tumor suppressor genes in small cell lung cancer.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 117 (1), 513-521 (2020).</li>
<li>Crowther, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genome-wide+CRISPR-Cas9+screening+reveals+ubiquitous+T+cell+cancer+targeting+via+the+monomorphic+MHC+class+i-related+protein+MR1%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Immunol%22%5BJournal%5D)">Genome-wide CRISPR-Cas9 screening reveals ubiquitous T cell cancer targeting via the monomorphic MHC class i-related protein MR1.</a> Nat Immunol. 21 (2), 178-185 (2020).</li>
<li>Ma, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiplexed+labeling+of+genomic+loci+with+dCas9+and+engineered+sgRNAs+using+CRISPRainbow%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Multiplexed labeling of genomic loci with dCas9 and engineered sgRNAs using CRISPRainbow.</a> Nat Biotechnol. 34 (5), 528-530 (2016).</li>
<li>Szlachta, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CRISPR+knockout+screening+identifies+combinatorial+drug+targets+in+pancreatic+cancer+and+models+cellular+drug+response%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">CRISPR knockout screening identifies combinatorial drug targets in pancreatic cancer and models cellular drug response.</a> Nat Commun. 9 (1), 4275(2018).</li>
<li>Baeten, J. T., Liu, W., Preddy, I. C., Zhou, N., Mcnerney, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Crispr+screening+in+human+hematopoietic+stem+and+progenitor+cells+reveals+an+enrichment+for+tumor+suppressor+genes+within+chromosome+7+commonly+deleted+regions%5BTitle%5D)+AND+%22Leukemia%22%5BJournal%5D)">Crispr screening in human hematopoietic stem and progenitor cells reveals an enrichment for tumor suppressor genes within chromosome 7 commonly deleted regions.</a> Leukemia. 36 (5), 1421-1425 (2022).</li>
<li>Korkmaz, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+genetic+screens+for+enhancer+elements+in+the+human+genome+using+crispr-cas9%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Functional genetic screens for enhancer elements in the human genome using crispr-cas9.</a> Nat Biotechnol. 34 (2), 192-198 (2016).</li>
<li>Heckl, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+mouse+models+of+myeloid+malignancy+with+combinatorial+genetic+lesions+using+CRISPR-Cas9+genome+editing%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Generation of mouse models of myeloid malignancy with combinatorial genetic lesions using CRISPR-Cas9 genome editing.</a> Nat Biotechnol. 32 (9), 941-946 (2014).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0,45 &mu; m membrana di microfiltrazione</td><td>Sartoriu</td><td>16533K-1</td><td></td></tr><tr><td>provetta EP da 1,5 mL</td><td>LABLEAD</td><td>MCT-150-CLD-1</td><td></td></tr><tr><td>piatto da 10 cm</td><td>Corning</td><td>430167</td><td></td></tr><tr><td>provetta da 15 mL</td><td>LABLEAD</td><td>LXG1500</td><td></td></tr><tr><td>siringa</td><td></td><td></td><td></td>sterile da 1 mL</tr><tr><td>2x Accurate Taq Master Mix (dye plus)</td><td>Accurate Biology</td><td>AG11010</td><td>Per la PCR delle colonie</td></tr><tr><td>Provetta da 50 mL</td><td>LABLEAD</td><td>LXG5000</td><td></td></tr><tr><td>5-Fluorouracile</td><td>Sigma</td><td>F6627-1</td><td></td></tr><tr><td>Piastra a 6 pozzetti</td><td>Corning</td><td>3516</td><td></td></tr><tr><td>70 &; setaccio per cellule m</td><td>Falcon&reg;</td><td>352350</td><td></td></tr><tr><td>Piastre a 96 pozzetti</td><td>Corning</td><td>3599</td><td></td></tr><tr><td>ACK Lisi Tampone</td><td>Leagene</td><td>CS0001</td><td></td></tr><tr><td>Agar</td><td>BIODEE</td><td>DE0010</td><td></td></tr><tr><td>Ampicillina</td><td>Solarbio</td><td>A8180</td><td></td></tr><tr><td>Termociclatori Applied Biosystems per PCR</td><td>Thermofisher</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kit di conteggio delle cellule-8</td><td>Bimake</td><td>B34304</td><td></td></tr><tr><td>Centrifuga</td><td>eppendorf</td><td>Centrifuga 5810R</td><td></td></tr><tr><td>CO2 Incubatore</td><td>Thermo SCIENTIFIC</td><td></td><td></td></tr><tr><td>DMEM</td><td>Gibco C11995500BT</td><td></td><td></td></tr><tr><td>DNA Clean& Concentratore-5</td><td>ZYMO</td><td>D4014</td><td></td></tr><tr><td>Dneasy Sangue & Kit di tissura</td><td>Qiagen</td><td>69504</td><td></td></tr><tr><td>Esp3I (BsmbI)</td><td>NEB</td><td>R0580L</td><td></td></tr><tr><td>Siero fetale bovino</td><td>ExCell</td><td>FSP500</td><td></td></tr><tr><td>GraphPad Prism 9.3</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>HEK-293T</td><td>ATCC; Virginia, USA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>HEPEs</td><td>Sigma</td><td>V900477</td><td></td></tr><tr><td>KOD-Plus-Neo</td><td>TOYOBO</td><td>KOD-401</td><td></td></tr><tr><td>lentiGuide-Puro</td><td>Addgene</td><td>52963</td><td>vettore dorsale</td></tr><tr><td>LSL-Cas9 topi</td><td>Modello Animal Centro di ricerca di UNIVERSITÀ DI NANCHINO&nbsp;</td><td></td><td>spettrofotometro di</td></tr><tr><td>assorbanza per micropiastre</td><td>T002249 BIO-RAD</td><td>xMark&trade;</td><td></td></tr><tr><td>Nacl</td><td>Rhawn</td><td>R019772</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>Solarbio</td><td>P1003</td><td></td></tr><tr><td>PEI</td><td>Proteintech</td><td>B600070</td><td></td></tr><tr><td>Soluzione di penicillina-streptomicina, 100x</td><td>Solarbio</td><td>P1400</td><td></td></tr><tr><td>pMD2.G plasmide</td><td>Addgene</td><td>12259</td><td></td></tr><tr><td>polibrene</td><td>Beyotime</td><td>C0351</td><td></td></tr><tr><td>Sale sodico dell'acido poliinosinico-policitidilico</td><td>Sigma</td><td>P1530</td><td></td></tr><tr><td>psPAX2</td><td>Addgene</td><td>12260</td><td></td></tr><tr><td>Kit di purificazione PCR QIAquick</td><td>Qiagen</td><td>28104</td><td></td></tr><tr><td>RicombinanteMurinoIL-3</td><td>Peprotech</td><td>213-13-10ug</td><td></td></tr><tr><td>RicombinanteMurinoIL-6</td><td>Peprotech</td><td>216-16-2ug</td><td></td></tr><tr><td>RicombinanteMurinoSCF</td><td>Peprotech</td><td>250-03-10ug</td><td></td></tr><tr><td>Agarosio regolare</td><td>BIOWEST</td><td>BY-R0100</td><td></td></tr><tr><td>Gamberetti Fosfatasi alcalina (rSAP)</td><td>NEB</td><td>M0371S</td><td></td></tr><tr><td>SpectraMax QuickDrop Ultra-Micro Spettrofotometro</td><td>DISPOSITIVI MOLECOLARI</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Stbl3 Cellule competenti</td><td>BioMed</td><td>BC108-01&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>T4 Polinucleotide chinasi</td><td>NEB</td><td>M0201L</td><td></td></tr><tr><td>T4-Ligasi</td><td>Takara</td><td>2011B</td><td></td></tr><tr><td>TIANprep Rapid Mini Plasmid Kit TIANGEN</td><td></td><td>DP105-03</td><td></td></tr><tr><td>Soluzione di Trypan Blue</td><td>LABLEAD</td><td>C0040-100ml</td><td></td></tr><tr><td>Tripsina-EDTA</td><td>Gibco</td><td>25200072</td><td></td></tr><tr><td>Triptone</td><td>OXOID</td><td>LP0042</td><td></td></tr><tr><td>WEHI-CM</td><td>Nanjing Fuksai Biotecnologia&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>CBP50079 ESTRATTO DI LIEVITO</td><td>OXOID</td><td>LP0021</td><td></td></tr></tbody></table>

valutazione dei geni correlati alla crescita anormale di cellule staminali e progenitrici ematopoietiche combinando la tecnologia crispr/cas9 con il conteggio delle cellule

Evaluation of Abnormal Growth-related Genes of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells by Combining CRISPR/Cas9 Technology with Cell Counting

Effetto del knockout di Trp53 sulla capacità proliferativa delle HSPC di topo Qui, abbiamo usato il knockout Trp53 come esempio per dimostrare questo protocollo. Per studiare l'effetto del knockout di Trp53 sulla capacità proliferativa delle HSPC di topo, abbiamo impiegato la trasfezione lentivirale per introdurre l'sgRNA Trp53 nelle cellule del midollo osseo che esprimono Cas9 arricchite per le HSPC dopo il trattamento con 5-FU. C...

Valutazione dei geni correlati alla crescita anormale di cellule staminali e progenitrici ematopoietiche combinando la tecnologia CRISPR/Cas9 con il conteggio delle cellule

Hematopoietic stem cells possess the ability for long-term self-renewal and the potential to differentiate into various types of mature blood cells. ...

evaluation-abnormal-growth-related-genes-hematopoietic-stem

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Genica mirata di editing con CRISPR/Cas9 ha notevolmente facilitato la comprensione delle funzioni biologiche dei geni. Qui, utilizziamo la metodologia CRISPR/Cas9 a modello calreticulina mutazioni in cellule ematopoietiche citochina-dipendente al fine di studiare la loro attività oncogena.

Utilizzando CRISPR/Cas9 Gene Editing per studiare l'attività oncogena di calreticulina mutante in cellule ematopoietiche Cytokine dipendente

Un protocollo per la veloce rottura CRISPR/Cas9-mediata del gene nel topo ed emopoietici umani primari è descritto in questo articolo. Cas9-sgRNA ribonucleoproteine vengono introdotti tramite elettroporazione con sgRNAs generato tramite trascrizione in vitro e commerciale Cas9. Alta efficienza di editing si ottiene con tempo limitato e costi finanziari.

Rottura del Gene altamente efficiente di cellule progenitrici ematopoietiche Murine ed umane di CRISPR/Cas9

Questo manoscritto descrive un cluster regolarmente intervallate breve palindromo si ripete (CRISPR) CRISPR Cas9 metodo basato per indagine semplice e rapida del ruolo di geni candidati multipli nella proliferazione delle cellule di leucemia mieloide acuta (LMA) in parallelo. Questa tecnica è scalabile e può essere applicata in altre linee cellulari di cancro pure.

Indagine delle dipendenze genetiche utilizzando dosaggi di concorrenza basati su CRISPR-Cas9

Una libreria CRISPR/sgRNA è stata applicata a interrogare i geni di proteina-codificazione. Tuttavia, la fattibilità di una libreria di sgRNA per scoprire la funzione di un confine CTCF nella regolazione genica rimane inesplorata. Qui, descriviamo una raccolta di specifiche sgRNA loci HOX per delucidare la funzione dei confini CTCF in loci HOX .

HOX Loci Focused CRISPR/sgRNA biblioteca Screening identificazione critico CTCF confini

Descritto sono protocolli per l'editing genomico altamente efficiente di cellule staminali e progenitrici (HSPC) murine (HSPC) dal sistema CRISPR/Cas9 per sviluppare rapidamente sistemi di modelli murini con modifiche genetiche specifiche del sistema ematopoietico.

Modifica del genoma mediato da Lentiviral/Cas9 per lo studio delle cellule ematopoietiche nei modelli di malattia

La somministrazione diretta di complessi preassemblati di ribonucleoproteina di RNA Cas9/guide è un mezzo veloce ed efficiente per l'editing del genoma nelle cellule ematopoietiche. Qui, utilizziamo questo approccio per eliminare un silenziatore intronico RUNX1 ed esaminare le risposte trascrizionali nelle cellule leucemiche OCI-AML3.

Indagine sul ruolo trascrizionale di un silenziatore intronico RUNX1 di CRISPR/Cas9 Ribonucleoprotein acuta

Il presente protocollo descrive una procedura di coltura ottimizzata di cellule staminali e progenitrici ematopoietiche (HSPC) per l'attecchimento robusto di cellule geneticamente modificate in vivo.

CRISPR/Cas9 Gene Editing di cellule staminali e progenitrici ematopoietiche per applicazioni di terapia genica

Nuove strategie per modellare fedelmente le mutazioni somatiche nelle cellule staminali e progenitrici ematopoietiche (HSPC) sono necessarie per studiare meglio la biologia delle cellule staminali ematopoietiche e le neoplasie ematologiche. Qui, viene descritto un protocollo per modellare mutazioni eterozigoti con guadagno di funzione nelle HSPC combinando l'uso di CRISPR / Cas9 e la doppia trasduzione del donatore rAAV.

Ingegnerizzazione di mutazioni oncogeniche eterozigoti con guadagno di funzione in cellule staminali e progenitrici ematopoietiche umane

Il metodo presentato descrive la generazione di un knockout genico mediato da CRISPR nella linea H9 di cellule staminali embrionali umane (hESC), che esprime stabilmente sgRNA che hanno come bersaglio il gene L2HGDH utilizzando un sistema di rilascio genico lentivirale mediato altamente efficiente.

Delezione genica mediata da CRISPR-Cas9 in cellule staminali pluripotenti umane coltivate in condizioni prive di alimentatore

Abbiamo sviluppato un protocollo ottimizzato di screening knockout CRISPR-Cas9 per le cellule CAR T primarie. Riducendo il trasferimento del gDNA tramite la digestione enzimatica e il pulldown delle cassette sgRNA, questo approccio minimizza gli artefatti PCR, garantendo una rilevazione accurata degli sgRNA e un'identificazione robusta dei bersagli genici funzionali.

Migliorare gli schermi CRISPR-Cas9 nelle cellule CAR T: un metodo raffinato per la preparazione delle librerie

Scopri come identificare geni chiave per la proliferazione anomala di cellule staminali ematopoietiche combinando CRISPR/Cas9 con saggi CCK-8. Questo metodo rivela potenziali bersagli terapeutici per la leucemia.

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Valutazione dei geni correlati alla crescita anormale di cellule staminali e progenitrici ematopoietiche combinando la tecnologia CRISPR/Cas9 con il conteggio delle cellule

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