Name: Prelievo di organi terminali vestibolari in condizioni fisiologiche durante la labirintectomia (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-11-29T14:50:00.000+00:00
Duration: 3 min 8 s
Description: Scopri una tecnica subacquea per prelevare organi terminali vestibolari umani durante la labirintectomia in condizioni fisiologiche. Questo metodo consente di studiare direttamente i tessuti dell'orecchio interno per comprendere meglio patologie come la malattia di Menière.

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<ol><li>Monsanto, R. D. C., Pauna, H. F., Paparella, M. M., Cureoglu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Otopathology+in+the+United+States%3A+History%2C+Current+Situation%2C+and+Future+Perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Otol+Neurotol%22%5BJournal%5D)">Otopathology in the United States: History, Current Situation, and Future Perspectives.</a> Otol Neurotol. 39 (9), 1210-1214 (2018).</li>
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</ol>

<table><tbody><tr><td>10x soluzione salina tamponata con fosfato</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P5493</td><td></td></tr><tr><td>soluzione madre di paraformaldeide al 32%</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>50-980-495</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 anticorpo secondario anti-coniglio</td><td>Jackson Immunoresearch</td><td>111545144</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 568 anticorpo secondario anti-topo</td><td>Jackson</td><td>Immunoresearch 115575146</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 647 Anticorpo secondario anti-capra</td><td>Jackson Immunoresearch</td><td>705607003</td><td></td></tr><tr><td>Soluzione salina bilanciata</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>14040117</td><td></td></tr><tr><td>Albumina sierica bovina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>10711454001</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio confocale</td><td>Nikon A1&nbsp;</td><td>A1</td><td></td></tr><tr><td>Vetro di copertura (18 mm x 18 mm, spessore #1,5</td>) <td>Corning&nbsp;</td><td>2850-18</td><td></td></tr><tr><td>Endo-Scrub 2 Guaina per la pulizia delle lenti</td><td>Medtronic</td><td>IPCES2SYSKIT</td><td></td></tr><tr><td>Soluzione acida di etilendiamminotetraacetico (EDTA)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E8008</td><td></td></tr><tr><td>Anticorpo anti-oncomodulina di capra</td><td>R & D Systems</td><td>AF6345</td><td></td></tr><tr><td>Hopkins 0 Degree Telescope</td><td>Karl Storz</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Topo Anticorpo anti-calretinina</td><td>BD Biosciences</td><td>610908</td><td></td></tr><tr><td>Reagente antidissolvenza ProLong Gold</td><td>Invitrogen</td><td>P10144</td><td></td></tr><tr><td>Coniglio Anticorpo anti-tenascina C</td><td>Millipore</td><td>AB19013</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>9036-19-5</td><td></td></tr></tbody></table>

prelievo di organi terminali vestibolari in condizioni fisiologiche durante la labirintectomia

Harvest of Vestibular End-Organs under Physiologic Conditions during Labyrinthectomy

Utilizzando questa tecnica, l'utricolo umano e le ampolle del canale laterale e superiore sono stati prelevati intatti con un trauma minimo (Figura 2). Come si può vedere nella Figura 2, le ampolle possono essere prelevate con una porzione sostanziale del dotto membranoso. La marcatura immunofluorescente con anti-tenascicina-C (proteina della matrice extracellulare) e anti-oncomodulina (piccola proteina legante il calcio della famiglia delle proteine della parvalbumina) ha mostrato cellule ciliate vestibolari di tipo 1 intatte (Figura 3). La densità delle cellule ciliate era di 82 per 10.000 μm2. Questi risultati dimostrano l'utilità di questa tecnica per la raccolta di tessuto umano dell'orecchio interno con un trauma minimo al neuroepitelio.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67523/67523fig01.jpg"> 
Figura 1: Illustrazione dell'impostazione chirurgica. Illustrazione dell'assetto chirurgico: la cavità mastoidea sinistra è mostrata con i canali semicircolari laterali, superiori e posteriori. La cavità mastoidea viene immersa in una soluzione salina bilanciata e viene utilizzato un endoscopio a zero gradi per visualizzare la cavità mastoidea mentre un trapano diamantato viene utilizzato per aprire il labirinto. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67523/67523fig01large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67523/67523fig02.jpg"> 
Figura 2: Labirinto membranoso. Le ampolle del canale umano (A) raccolte (A) e laterali e (B) del canale superiore sotto uno stereomicroscopio ottico con ingrandimento 5x. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67523/67523fig02large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67523/67523fig03.jpg"> 
Figura 3: Utricolo. Proiezioni di massima intensità di marcatura in immunofluorescenza dell'utricolo umano con ingrandimento 40x effettuate con un microscopio confocale. Le schisi sinaptiche del calice sono marcate con anticorpi anti-tenascicina-C (verde). Le cellule vestibolari di tipo 1 sono colorate con anti-oncomodulina (rosso). Barra della scala: 50 μm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67523/67523fig03large.jpg" target="_blank">Fare clic qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>

Prelievo di organi terminali vestibolari in condizioni fisiologiche durante la labirintectomia

The living human inner ear is challenging to study because it is encased within dense otic capsule bone that limits access to biological tissue. ...

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