Name: Isolamento di cellule stromali mesenchimali umane derivate dal cordone ombelicalead altoMFGE8 (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-01-10T14:20:00.000+00:00
Duration: 6 min 5 s
Description: Scopri l'isolamento di cellule stromali mesenchimali umane BAMBI alto MFGE8 alto dal cordone ombelicale. Questo metodo analizza il profilo trascrittomico per identificare sottopopolazioni ottimali per terapie rigenerative.

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<meta charset="utf8"></head><body>Analisi funzionale delle sottopopolazioni BAMBIad altoMFGE8UC-MSC

<ol><li>Liechty, K. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+mesenchymal+stem+cells+engraft+and+demonstrate+site-specific+differentiation+after+in+utero+transplantation+in+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">Human mesenchymal stem cells engraft and demonstrate site-specific differentiation after in utero transplantation in sheep.</a> Nat Med. 6 (11), 1282-1286 (2000).</li>
<li>Zhou, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Challenges+and+advances+in+clinical+applications+of+mesenchymal+stromal+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hematol+Oncol%22%5BJournal%5D)">Challenges and advances in clinical applications of mesenchymal stromal cells.</a> J Hematol Oncol. 14 (1), 24(2021).</li>
<li>Xie, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tnf-alpha-mediated+m%286%29a+modification+of+elmo1+triggers+directional+migration+of+mesenchymal+stem+cell+in+ankylosing+spondylitis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Tnf-alpha-mediated m(6)a modification of elmo1 triggers directional migration of mesenchymal stem cell in ankylosing spondylitis.</a> Nat Commun. 12 (1), 5373(2021).</li>
<li>Mcguire, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+stem+cell-derived+interleukin-28+drives+the+selection+of+apoptosis+resistant+bone+metastatic+prostate+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal stem cell-derived interleukin-28 drives the selection of apoptosis resistant bone metastatic prostate cancer.</a> Nat Commun. 12 (1), 723(2021).</li>
<li>Yuan, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+stem+cell+therapy+induces+flt3l+and+cd1c%28%2B%29+dendritic+cells+in+systemic+lupus+erythematosus+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal stem cell therapy induces flt3l and cd1c(+) dendritic cells in systemic lupus erythematosus patients.</a> Nat Commun. 10 (1), 2498(2019).</li>
<li>Wang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Umbilical+cord+mesenchymal+stem+cell+transplantation+in+active+and+refractory+systemic+lupus+erythematosus%3A+A+multicenter+clinical+study%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">Umbilical cord mesenchymal stem cell transplantation in active and refractory systemic lupus erythematosus: A multicenter clinical study.</a> Arthritis Res Ther. 16 (2), R79(2014).</li>
<li>Ortiz, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+stem+cell+engraftment+in+lung+is+enhanced+in+response+to+bleomycin+exposure+and+ameliorates+its+fibrotic+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal stem cell engraftment in lung is enhanced in response to bleomycin exposure and ameliorates its fibrotic effects.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 100 (14), 8407-8411 (2003).</li>
<li>Phinney, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+heterogeneity+of+mesenchymal+stem+cells%3A+Implications+for+cell+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biochem%22%5BJournal%5D)">Functional heterogeneity of mesenchymal stem cells: Implications for cell therapy.</a> J Cell Biochem. 113 (9), 2806-2812 (2012).</li>
<li>Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+transcriptome+atlas+of+human+mesenchymal+stem+cells+exploring+cellular+heterogeneity%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Single-cell transcriptome atlas of human mesenchymal stem cells exploring cellular heterogeneity.</a> Clin Transl Med. 11 (12), e650(2021).</li>
<li>Chen, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+and+spatial+transcriptomics+decodes+wharton%27s+jelly-derived+mesenchymal+stem+cells+heterogeneity+and+a+subpopulation+with+wound+repair+signatures%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Sci+%28Weinh%29%22%5BJournal%5D)">Single-cell and spatial transcriptomics decodes wharton's jelly-derived mesenchymal stem cells heterogeneity and a subpopulation with wound repair signatures.</a> Adv Sci (Weinh). 10 (4), e2204786(2023).</li>
<li>Chen, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dissecting+heterogeneity+reveals+a+unique+bambi%28high%29+mfge8%28high%29+subpopulation+of+human+uc-mscs%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Sci+%28Weinh%29%22%5BJournal%5D)">Dissecting heterogeneity reveals a unique bambi(high) mfge8(high) subpopulation of human uc-mscs.</a> Adv Sci (Weinh). 10 (1), e2202510(2022).</li>
<li>Tsuji, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+different+cell-detaching+methods+on+the+viability+and+cell+surface+antigen+expression+of+synovial+mesenchymal+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplant%22%5BJournal%5D)">Effects of different cell-detaching methods on the viability and cell surface antigen expression of synovial mesenchymal stem cells.</a> Cell Transplant. 26 (6), 1089-1102 (2017).</li>
<li>Lai, T. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Different+methods+of+detaching+adherent+cells+and+their+effects+on+the+cell+surface+expression+of+fas+receptor+and+fas+ligand%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Different methods of detaching adherent cells and their effects on the cell surface expression of fas receptor and fas ligand.</a> Sci Rep. 12 (1), 5713(2022).</li>
<li>Avinash, K., Malaippan, S., Dooraiswamy, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+of+isolation+and+characterization+of+stem+cells+from+different+regions+of+oral+cavity+using+markers%3A+A+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Methods of isolation and characterization of stem cells from different regions of oral cavity using markers: A systematic review.</a> Int J Stem Cells. 10 (1), 12-20 (2017).</li>
<li>Galvao, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rock+inhibition+drives+resolution+of+acute+inflammation+by+enhancing+neutrophil+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Rock inhibition drives resolution of acute inflammation by enhancing neutrophil apoptosis.</a> Cells. 8 (9), 964(2019).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Provetta per microcentrifuga da 0,6 mL</td><td>Corning&nbsp;</td><td>Axygen MCT-060-A</td><td></td></tr><tr><td>Provette per microcentrifuga da 1,5 mL</td><td>Beijing Labgic Technology</td><td>MCT-001-150</td><td></td></tr><tr><td>Piatto per colture cellulari da 100 mm.</td><td>Beijing Labgic Technology</td><td>12311</td><td></td></tr><tr><td>Piastra da 12 pozzetti</td><td>Beijing Labgic Technology</td><td>11210</td><td></td></tr><tr><td>Provetta da centrifuga da 15 mL</td><td>Nanjing Vazyme Material Technology</td><td>TCF00115</td><td></td></tr><tr><td>Piastra da 24 pozzetti</td><td>Beijing Labgic Technology</td><td>11310</td><td></td></tr><tr><td>Provetta da centrifuga da 50 mL</td><td>Nanjing Vazyme Material Technology</td><td>TCF00150</td><td></td></tr><tr><td>5 mL Tubi a fondo tondo</td><td>Corning</td><td>FALCON 352003</td><td></td></tr><tr><td>70 &mu; filtro per cellule m</td><td>Falcon</td><td>352350</td><td>Diluizione: 1:1000</td></tr><tr><td>APC anti-umano CD79a (Ig&alfa;) Anticorpo</td><td>BioLegend</td><td>333505</td><td>581 Diluizione: 1:200</td></tr><tr><td>APC/Cianina7 anti-umano CD73 (Ecto-5'-nucleotidasi) Anticorpo</td><td>BioLegend</td><td>344022</td><td>G46-6 Diluizione: 1:200</td></tr><tr><td>APC-Cy7 IgG1 di topo, &kappa; Controllo degli isotipi</td><td>BD Bioscience</td><td>557873</td><td>MOPC-31C (Controllo degli isotipi) Diluizione: 1:200</td></tr><tr><td>Anticorpo BAMBI</td><td>Bioss</td><td>bs-12418R</td><td></td></tr><tr><td>Brilliant Violet 510 anti-topo/umano CD44 Anticorpo</td><td>BioLegend</td><td>103044</td><td>5E10 Diluizione: 1:200</td></tr><tr><td>Brilliant Violet 510 Rat IgG2b, &kappa; Isotipo Ctrl Anticorpo</td><td>BioLegend</td><td>400646</td><td>MOPC-21 (controllo isotipo) Diluizione: 1:200</td></tr><tr><td>CD105 (endoglin) Anticorpo monoclonale&nbsp; APC</td><td>eBioscience</td><td>17-1057-42</td><td>HM47 Diluizione: 1:200</td></tr><tr><td>Vetrini della camera di conteggio delle cellule</td><td>Shanghai QIUJING</td><td>XB-K-25</td><td></td></tr><tr><td>Centrifuga</td><td>Pechino BAIYANG</td><td>BY-320C</td><td></td></tr><tr><td>ChamQ Universal SYBR qPCR Master Mix</td><td>Vazyme</td><td>Q711-02</td><td></td></tr><tr><td>Cloroformio</td><td>XILONG Scientific</td><td>13700908</td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F-12 (1:1) basico (1x)</td><td>Gibco</td><td>C11330500BT</td><td></td></tr><tr><td>EDTA (0,5 M), pH 8,0, senza RNAsi</td><td>Invitrogen</td><td>AM9260G</td><td>Diluizione: 1:1000</td></tr><tr><td>Etanolo&nbsp; &nbsp;</td><td>XILONG Scientific</td><td>12803405</td><td></td></tr><tr><td>Siero fetale bovino (FBS)</td><td>Gibco</td><td>10099-141C&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>FITC Topo Anti-Umano CD34</td><td>BD Bioscience</td><td>555821</td><td>IM7 Diluizione: 1:200</td></tr><tr><td>FITC Topo Anti-Umano CD45</td><td>BD Bioscience 555482</td><td></td><td>AD2 Diluizione: 1:200</td></tr><tr><td>FITC Topo Anti-Umano HLA-DR</td><td>BD Bioscience 555811</td><td></td><td>SN6 Diluizione: 1:200</td></tr><tr><td>Citometro a flusso</td><td>BD Bioscience</td><td>FACSAria&commercio; III Cell SorterAria</td><td></td></tr><tr><td>Flowjo</td><td>BD Bioscience</td><td>V10</td><td></td></tr><tr><td>Reagente di dissociazione cellulare delicato</td><td>STEMCELL Technologies</td><td>100-0485</td><td></td></tr><tr><td>IgG anti-topo di capra H& L (Alexa Fluor 488)</td><td>abcam</td><td>ab150113</td><td>HI30 Diluizione: 1:200</td></tr><tr><td>IgG H& L (AlexaFluor 594)</td><td>abcam</td><td>ab150080</td><td>Diluizione: 1:1000</td></tr><tr><td>HiScript II Q RT SuperMix per qPCR (+gDNA wiper)</td><td>Vazyme</td><td>R223-01</td><td></td></tr><tr><td>Microscopi invertiti Nikon</td><td></td><td>ECLIPSE Ts2</td><td></td></tr><tr><td>Alcool isopropilico</td><td>XILONG Scientific</td><td>12802505</td><td></td></tr><tr><td>MFGE8 anticorpo</td><td>Biorbyt</td><td>orb388429</td><td>Diluizione: 1:100</td></tr><tr><td>Microcentrifuga</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>FRESCO 21</td><td></td></tr><tr><td>Mouse IgG1 kappa Isotype Control APC</td><td>eBioscience</td><td>17-4714-42</td><td>P3.6.2.8.1 (Controllo dell'isotipo) Diluizione: 1:200</td></tr><tr><td>Mouse IgG1 kappa Isotype Control FITC</td><td>eBioscience</td><td>11-4714-42</td><td>eBMG2b (Isotype Control) Diluizione: 1:200</td></tr><tr><td>Mouse IgG2b kappa Isotype Control FITC</td><td>eBioscience</td><td>11-4732-42</td><td>RTK4530 (controllo isotipico) Diluizione: 1:200</td></tr><tr><td>PBS (10x)</td><td>Sangon Biotech (Shanghai)</td><td>E607016-0500</td><td></td></tr><tr><td>PE-Cy5 Topo Anti-Umano CD90&nbsp;</td><td>BD Bioscience</td><td>555597</td><td>P3.6.2.8.1 (Controllo isotipico) Diluizione: 1:200</td></tr><tr><td>PE-Cy5 IgG1 di topo &kappa; Controllo degli isotipi</td><td>BD Bioscience</td><td>550618</td><td></td></tr><tr><td>Penicillina-Streptomicina 100x</td><td>Cytiva</td><td>SV30010</td><td>Diluizione: 1:100</td></tr><tr><td>Sistema PCR in tempo reale</td><td>Biosistemi applicati diThermo Fisher Scientific</td><td>Q6</td><td></td></tr><tr><td>Spettrofotometro QIAGEN</td><td></td><td>129112</td><td></td>acqua priva di RNasi</tr><tr><td></td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>NanoDrop One (840-317400)</td><td></td></tr><tr><td>Puntali sterili per micropipette</td> Beijing <td>Labgic Technology</td><td></td><td>Diluizione: Pallone per colture cellulari 1:100</td></tr><tr><td>T75</td><td>Beijing Labgic Technology</td><td>13212A</td><td></td></tr><tr><td>Termociclatore</td><td>Biosistemi applicati byThermo Fisher Scientific</td><td>Reagente Veriti</td><td></td></tr><tr><td>Tri Sigma</td><td>Aldrich</td><td>T9424</td><td></td></tr><tr><td>Soluzione Typsin-EDTA</td><td>Bio-Channel Biotechnology</td><td>BC-CE-005</td><td></td></tr><tr><td>Camicia d'acqua CO2&nbsp; Incubatrice</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>3111</td><td></td></tr></tbody></table>

isolamento di cellule stromali mesenchimali umane derivate dal cordone ombelicalead altomfge8

Isolation of Human BAMBIhighMFGE8high Umbilical Cord-Derived Mesenchymal Stromal Cells

La Figura 1 mostra i profili di espressione dei marcatori di superficie cellulare delle UC-MSC umane. Le MSC in coltura erano fortemente positive per l'espressione di CD44, CD73, CD90 e CD105 e negative per l'espressione di CD14, CD34, CD45, CD79 e HLA-DR. Le MSCalte di BAMBIMFGE8sono state selezionate da UC-MSC umane coltivate e la loro espressione di BAMBI e MFGE8 è stata rianalizzata mediante citometria a flusso dopo l'espansione per 3-4 passaggi (<strong class="xfig...

Isolamento di cellule stromali mesenchimali umane derivate dal cordone ombelicalead altoMFGE8

Umbilical cord-derived mesenchymal stromal/stem cells (UC-MSCs) present low immunogenicity and potent immunomodulatory effects for treating various ...

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Scopri l'isolamento di cellule stromali mesenchimali umane BAMBI alto MFGE8 alto dal cordone ombelicale. Questo metodo analizza il profilo trascrittomico per identificare sottopopolazioni ottimali per terapie rigenerative.

Isolamento di cellule stromali mesenchimali umane derivate dal cordone ombelicale^{ad alto}MFGE8

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