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DOI: 10.3791/67548-v
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Questo protocollo delinea una procedura dettagliata per la generazione di cellule T del recettore chimerico dell'antigene (CAR) transitorio utilizzando mRNA non integrato per l'immunoterapia del cancro e fornisce metodi affidabili per valutare le cellule CAR-T e la loro funzione citotossica.
La terapia con cellule CAR T ha ottenuto un successo senza precedenti nel trattamento di alcuni tumori patologici. In questo studio, abbiamo introdotto un approccio non virale a lunga integrazione per la generazione di cellule CAR T transitorie e fornito procedure mirate per valutare la funzione delle cellule CAR T. La nostra ricerca mira a generare cellule CAR T sicure ed efficaci con un approccio più conveniente.
Le cellule CAR T sono tipicamente generate dalla trasduzione virale. I retrovirus e gli antivirus sono i vettori virali più comuni per la consegna del gene CAR. La produzione di vettori virali è complessa e costosa e la trasduzione virale induce l'integrazione casuale e permanente del DNA codificante CAR nel genoma delle cellule T, il che può causare problemi di sicurezza.
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