Name: Un modello di commozione cerebrale pediatrica nei topi: trauma cranico chiuso con disturbi a lungo termine (CHILD) (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-02-07T13:40:00.000+00:00
Duration: 7 min 1 s
Description: Scopri il modello CHILD per lo studio della commozione cerebrale pediatrica nei topi. Questo metodo riproduce lesioni craniche chiuse per analizzare neuroinfiammazione, alterazioni della sostanza bianca e disfunzioni comportamentali a lungo termine.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Gli esperimenti sono stati riprodotti in 2 siti, l'Università di Bordeaux (Francia) e l'Università della California Riverside (CA, USA).
A Bordeaux, tutti gli esperimenti sono stati eseguiti su topi maschi e femmine P17 C57Bl6J allevati nella struttura per animali dell'Università. I riproduttori iniziali sono stati ottenuti da una fonte commerciale e allevati in condizioni standard con un ciclo buio/luce di 12/12 ore, una temperatura di 21 °C ± 1 °C e un'umidità del 55% ± 10%, e cibo e acqua forniti ad libitum. Le procedure sperimentali sono conformi ai regolamenti del Comitato per la cura degli animali dell'Università di Bordeaux, alle leggi francesi che regolano l'uso degli animali da laboratorio (autorizzazione #29324-2021012118549817 v3), alle direttive del Consiglio europeo (86/609/CEE) e alle linee guida ARRIVE. Questo protocollo, essendo un modello lieve di lesione cerebrale traumatica, non produce dolore o angoscia. In quanto tale, non richiede alcuna gestione specifica del dolore al di fuori della normale gestione del dolore. Lo svezzamento dei cuccioli (TBI, Shams) è stato efficace a P25.
A Riverside, sono stati ottenuti commercialmente topi femmina C57Bl6J gravidi E13 e tutti gli esperimenti sono stati eseguiti sulle cucciolate risultanti in cuccioli maschi e femmine di età P17. Gli animali sono stati allevati con un ciclo di buio/luce automatizzato di 12/12 ore e una temperatura di 21 °C. Le dighe e i cuccioli avevano accesso ad libitum a cibo e acqua. Tutte le procedure sperimentali sono state approvate dall'Università della California, Riverside Institutional Animal Care and Use Committee e sono state conformi all'Animal Welfare Act e alla politica del servizio sanitario pubblico. Tutti i cuccioli (TBI, Sham) in quella struttura sono stati svezzati al P21.
I dettagli degli animali, dei reagenti e delle attrezzature utilizzate in questo studio sono elencati nella Tabella dei materiali.
1. Fasi preliminari
<ol>
	<li>Per prevenire l'ipotermia, riscaldare in anticipo la camera per l'induzione dell'anestesia e le gabbie di recupero con cuscinetti riscaldanti.</li>
	<li>Posizionare l'apparecchio stereotassico con l'impattatore montato a un angolo di 90°.</li>
	<li>Verificare che tutte le parti siano serrate e fissate correttamente e che il pistone sia saldamente avvitato al dispositivo di simulazione.</li>
	<li>Taglia un foglio di alluminio che si adatti all'apparato stereotassico (in questo caso, 18 cm x 30 cm). L'alluminio utilizzato qui è di qualità standard. Avvolgi il telaio stereotassico con la pellicola per formare un cuscinetto su cui verrà adagiato l'animale. Fissare la posizione e la tensione della pellicola con un normale nastro adesivo da laboratorio per sostenere il peso dell'animale.</li>
	<li>Accendere il controller dell'impattatore e, in funzione della gravità della lesione, impostare la velocità di impatto su 2 m.s-1 per il grado 1 (G1) o 3 m.s-1 per il grado 2 (G2) per un impatto più grave (la modifica di questo parametro influirà sulla gravità della commozione cerebrale).</li>
	<li>Pesa gli animali. A P17, il peso degli animali deve essere superiore a 5,9 g per i topi C57Bl6. Sono esclusi gli animali che rientrano in tale peso. NOTA: Per alcuni studi sono stati utilizzati topi CD1 e per P17 la soglia è stata fissata a oltre 6,5 g (dati personali).</li>
</ol>
2. Procedura per lesioni cerebrali traumatiche lievi giovanili
<ol>
	<li>Anestetizzare il topo con un'esposizione di 5 minuti all'isoflurano. Impostare la composizione del gas su una miscela al 2,5% (in questo caso, il vettore è una miscela d'aria sintetica con il 21% di ossigeno) con una portata di 1,5 L/min. NOTA: Da questo passaggio, tutte le azioni devono essere eseguite rapidamente, poiché gli animali non interessati si sveglieranno entro 5 minuti.</li>
	<li>Posizionare la testa del mouse sotto l'impattatore. Il cucciolo dovrebbe essere distribuito a tutte le lunghezze. La punta ha un diametro di 3 mm ed è ricoperta di gomma per ridurre al minimo l'effetto del metallo sul cranio.</li>
	<li>Abbassare l'impattatore portando la manopola in posizione Extend. </li>
	<li>Abbassare approssimativamente l'impattatore e posizionare il mouse in modo che l'impattatore sia proprio tra le orecchie. Quindi, far scorrere il mouse in modo che la punta del pistone sia spostata in avanti all'equivalente di una punta del pistone e di una punta del pistone a sinistra dell'animale (vedere la Figura 1). NOTA: Gli animali finti sono posizionati leggermente lontano dal pistone (nessuna parte dell'animale deve essere colpita).</li>
	<li>Abbassare il dispositivo di simulazione in modo che tocchi la testa dell'animale (Figura 1E2).</li>
	<li>Impostare il dispositivo di simulazione su Retrazione (Figura 1E3).</li>
	<li>Per determinare la gravità della lesione, spostare il pistone di 1 mm verso il basso per il grado 1 (G1). Per un impatto più violento di grado 2 (G2), spostare il pistone di 3 mm verso il basso (Figura 1E4).</li>
	<li>Impostare il tempo di permanenza su 0,1 s indipendentemente dalla gravità (la modifica di questo parametro non influirà sulla gravità della commozione cerebrale).</li>
	<li>Premere Impact sulla manopola destra (Figura 1E5).</li>
	<li>Impostare rapidamente la manopola sinistra in posizione off in modo che il sistema non si surriscaldi. Per ulteriori informazioni, vedere il diagramma di flusso (Figura 2).</li>
</ol>
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67667/67667fig01.jpg"> 
Figura 1: Posizionamento della punta del dispositivo di simulazione. (A) La punta del dispositivo di simulazione viene posizionata prima sulla linea mediana tra le orecchie. (B) La punta viene quindi spostata in avanti di 3 mm (l'equivalente del diametro di una punta). (C) Infine, la punta del pistone viene spostata di 3 mm sul lato sinistro del mouse. (D,E) Possibili posizioni della punta del dispositivo di simulazione rispetto alla canna magnetica. (D) Il dispositivo di simulazione ha 3 posizioni rispetto al corpo del pistone (neutro, retratto o esteso/impatto) con una distanza di 5 mm tra di loro. (E) Posizioni della punta del dispositivo di simulazione rispetto alla superficie del cranio nelle diverse fasi della procedura. (1) posizione del dispositivo di simulazione in posizione neutra; (2) il pistone viene spostato per toccare delicatamente il cranio dell'animale (passaggio 2.5); (3) il dispositivo di simulazione è quindi impostato per ritrarsi (passaggio 3.6); (4) l'intero corpo del dispositivo di simulazione viene spostato di x mm verso il basso (passaggio 2.7). Per il grado G1, una velocità d'urto (y) di 2 m.s-1 con 1 mm di profondità (x) per G1 o una velocità d'urto (y) di 3 m.s-1 con 3 mm (x) di profondità per G2. (5) Una volta premuto l'impatto della leva, la punta dell'impattatore si sposta di x mm sotto la superficie del cranio a una velocità y durante il tempo di permanenza dopo essere tornata in posizione neutra. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67667/67667fig01large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67667/67667fig02.jpg"> 
Figura 2: Diagramma di flusso CHILD. Diagramma di flusso che descrive in dettaglio i passaggi per indurre CHILD nei topi PND17 codificati a colori per indicare le diverse fasi dell'induzione della commozione cerebrale. Le fotografie dell'installazione includono (A) l'intera configurazione dell'induzione CHILD (il dispositivo per anestesia non è visibile), incluso il controller di impatto, il dispositivo stereotassico con l'impattatore e la punta posizionati sopra la carta stagnola tesa e la scatola di recupero situata sopra un termoforo. (B) Punta d'urto in gomma (3 mm) con scala. (C) Il dispositivo stereotassico con un foglio di stagnola teso attraverso il telaio stereotassico e il solenoide del dispositivo di simulazione con la punta d'impatto posizionata sopra il foglio. (D) Camera di recupero posizionata sul cuscinetto termico. (E) Il controller di impatto con due interruttori di controllo, evidenziati come nel diagramma di flusso (casella rossa = estensione/ritrazione/spegnimento; casella viola = interruttore di impatto). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67667/67667fig02large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
3. Follow-up post-trauma
NOTA: I seguenti passaggi possono essere videoregistrati per l'analisi offline, consentendo allo sperimentatore di eseguire CHILD su più animali di seguito. Tuttavia, dovrebbero essere effettuate valutazioni regolari e ripetute del benessere degli animali.
<ol>
	<li>Notare la durata dell'apnea, se presente (subito dopo l'impatto), e se c'è stata una rotazione della testa durante l'impatto.</li>
	<li>Posiziona il mouse sul fianco destro in una gabbia di recupero.</li>
	<li>Notare il tempo di raddrizzamento del mouse (impennamento su 4 zampe) e il tempo di ripresa di un comportamento esplorativo. In genere, i topi finti si svegliano entro 3-4 minuti e riprendono un comportamento esplorativo 3-4 minuti dopo (Figura 3). I topi bambini si svegliano entro 7-12 minuti dall'impatto (Figura 3A) e riprendono l'esplorazione entro 12-18 minuti dall'impatto (Figura 3B), in base al sesso e alla gravità dell'impatto (Figura 3A, B). NOTA: Se l'animale interessato non riprende il suo comportamento esplorativo entro 30 minuti, l'animale viene escluso.</li>
	<li>Una volta completamente recuperati, riporta gli animali nella loro gabbia di casa. A questo punto, il comportamento dei topi fittizi e CHILD (gravità G1 o G2) dovrebbe essere esattamente simile e i gruppi di animali non dovrebbero essere distinguibili all'interno della cucciolata. NOTA: Gli animali possono essere mantenuti fino a 18 mesi dopo l'infortunio14 nelle condizioni indicate all'inizio dei metodi. Le valutazioni degli esiti comportamentali possono essere eseguite utilizzando una batteria di test in associazione con misurazioni MRI, imaging con miniscopio, istologia e immunoistochimica12. L'immunoistochimica per GFAP e NeuN può essere utilizzata in momenti precoci per convalidare il modello e la presenza di cambiamenti tissutali.</li>
</ol>
4. Immunoistochimica
NOTA: Un giorno dopo l'infortunio, gli animali dei gruppi G2 e sham (n = 4 topi per G2 e n = 4 per Sham) sono stati anestetizzati e perfusi transcardialmente con paraformaldeide (PFA) al 4% preparata in soluzione salina tamponata con fosfato (PBS) 0,1 M, pH 7,4 a 4 °C. I cervelli sono stati estratti10 dal cranio e immersi nella stessa soluzione di PFA durante la notte, quindi trasferiti in PBS con sodio azide (0,1%) prima del taglio. Le sezioni coronali sono state quindi preparate a 50 μm di spessore utilizzando un vibratomo. Per una lunga conservazione, le sezioni sono state poste in mezzo crioprotettivo (30% glicole etilenico e 20% glicerolo in PBS) a -20 °C fino all'uso. Per caratterizzare l'impatto della commozione cerebrale sulla gliosi cerebrale e sulla perdita neuronale, è stata eseguita un'immunoistochimica mirata a GFAP e NeuN come descritto di seguito.
<ol>
	<li>Lavare le sezioni cerebrali 4 volte per 10 minuti in PBS.</li>
	<li>Trasferire le sezioni in soluzione bloccante (1% BSA, 0,3% Triton X-100 in PBS) per 10 minuti a temperatura ambiente (RT).</li>
	<li>Incubare le sezioni per una notte a 4 °C con i seguenti anticorpi primari diluiti in soluzione bloccante: anti-GFAP di pollo (1:3000) e anti-NeuN di coniglio (1:500).</li>
	<li>Lavare le fette 4 volte per 10 minuti in PBS sotto agitazione.</li>
	<li>Quindi, trasferire le sezioni in una soluzione bloccante contenente gli anticorpi fluorescenti secondari diluiti 1:1000 per 1 ora a RT, Alexa-Fluor-488-nm capra anti-coniglio e Alexa-Fluor-568-nm capra anti-pollo.</li>
	<li>Lavare quindi le sezioni 4 volte per 10 minuti in PBS sotto agitazione.</li>
	<li>Montare le sezioni sulle guide utilizzando un mezzo di montaggio e aggiungere un vetrino coprioggetto. Conservare i vetrini a 4 °C fino all'acquisizione dell'immagine.</li>
	<li>Acquisizione dell'immunofluorescenza utilizzando un microscopio a epifluorescenza e un software micromanager. Utilizzare un plug-in di stitching con una lente 10x per ottenere immagini affiancate degli emisferi omolaterali e controlaterali. NOTA: La colorazione con controllo negativo in cui l'anticorpo primario o l'anticorpo secondario è stato omesso non ha mostrato alcuna marcatura rilevabile. Per un'analisi più dettagliata delle immagini, il software Fiji15 può essere utilizzato per quantificare i parametri di immunocolorazione in varie regioni di interesse16.</li>
</ol>

<meta charset="utf8"></head><body>Modello CHILD - Ricapitolazione della commozione cerebrale giovanile e degli esiti a lungo termine nei topi

<ol><li>Dewan, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estimating+the+global+incidence+of+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosurg%22%5BJournal%5D)">Estimating the global incidence of traumatic brain injury.</a> J Neurosurg. 130 (4), 1080-1097 (2018).</li>
<li>Rivara, F. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Persistence+of+disability+24+to+36+months+after+pediatric+traumatic+brain+injury%3A+a+cohort+study%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Persistence of disability 24 to 36 months after pediatric traumatic brain injury: a cohort study.</a> J Neurotrauma. 29 (15), 2499-2504 (2012).</li>
<li>Fesharaki-Zadeh, A., Datta, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+overview+of+preclinical+models+of+traumatic+brain+injury+%28TBI%29%3A+Relevance+to+pathophysiological+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Neurosci%22%5BJournal%5D)">An overview of preclinical models of traumatic brain injury (TBI): Relevance to pathophysiological mechanisms.</a> Front Cell Neurosci. 18, (2024).</li>
<li>Panchenko, P. E., Hippauf, L., Konsman, J. P., Badaut, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Do+astrocytes+act+as+immune+cells+after+pediatric+TBI%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Dis%22%5BJournal%5D)">Do astrocytes act as immune cells after pediatric TBI.</a> Neurobiol Dis. 185, 106231(2023).</li>
<li>Kochanek, P. M., Wallisch, J. S., Bayır, H., Clark, R. S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pre-clinical+models+in+pediatric+traumatic+brain+injury-challenges+and+lessons+learned%5BTitle%5D)+AND+%22Childs+Nerv+Syst%22%5BJournal%5D)">Pre-clinical models in pediatric traumatic brain injury-challenges and lessons learned.</a> Childs Nerv Syst. 33 (10), 1693-1701 (2017).</li>
<li>Smith, A. M., Grayson, B. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+strike+to+the+head%3A+Parallels+between+the+pediatric+and+adult+human+and+the+rodent+in+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Res%22%5BJournal%5D)">A strike to the head: Parallels between the pediatric and adult human and the rodent in traumatic brain injury.</a> J Neurosci Res. 102 (7), e25364(2024).</li>
<li>McNamara, E. H., Grillakis, A. A., Tucker, L. B., McCabe, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+closed-head+impact+model+of+engineered+rotational+acceleration+%28CHIMERA%29+as+an+application+for+traumatic+brain+injury+pre-clinical+research%3A+A+status+report%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">The closed-head impact model of engineered rotational acceleration (CHIMERA) as an application for traumatic brain injury pre-clinical research: A status report.</a> Exp Neurol. 333, 113409(2020).</li>
<li>Bodnar, C. N., Roberts, K. N., Higgins, E. K., Bachstetter, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+systematic+review+of+closed-head+injury+models+of+mild+traumatic+brain+injury+in+mice+and+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">A systematic review of closed-head injury models of mild traumatic brain injury in mice and rats.</a> J Neurotrauma. 36 (11), 1683-1706 (2019).</li>
<li>Semple, B. D., Blomgren, K., Gimlin, K., Ferriero, D. M., Noble-Haeusslein, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+development+in+rodents+and+humans%3A+Identifying+benchmarks+of+maturation+and+vulnerability+to+injury+across+species%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Brain development in rodents and humans: Identifying benchmarks of maturation and vulnerability to injury across species.</a> Prog Neurobiol. 106-107, 1-16 (2013).</li>
<li>Rodriguez-Grande, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gliovascular+changes+precede+white+matter+damage+and+long-term+disorders+in+juvenile+mild+closed+head+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Glia%22%5BJournal%5D)">Gliovascular changes precede white matter damage and long-term disorders in juvenile mild closed head injury.</a> Glia. 66 (8), 1663-1677 (2018).</li>
<li>Ichkova, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+cerebrovascular+and+long-term+neurological+modifications+ensue+following+juvenile+mild+traumatic+brain+injury+in+male+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Dis%22%5BJournal%5D)">Early cerebrovascular and long-term neurological modifications ensue following juvenile mild traumatic brain injury in male mice.</a> Neurobiol Dis. 141, 104952(2020).</li>
<li>Badaut, J., et al. Endocannabinoid-mediated rescue of somatosensory cortex activity, plasticity and related behaviors following an early in life concussion. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBadaut%2C+J+%22bioRxiv%22">bioRxiv</a>. , (2024).</li>
<li>Leyba, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurovascular+hypoxia+after+mild+traumatic+brain+injury+in+juvenile+mice+correlates+with+heart-brain+dysfunctions+in+adulthood%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Physiol%22%5BJournal%5D)">Neurovascular hypoxia after mild traumatic brain injury in juvenile mice correlates with heart-brain dysfunctions in adulthood.</a> Acta Physiol. 238 (2), e13933(2023).</li>
<li>Obenaus, A., et al. Progressive lifespan modifications in the corpus callosum following a single juvenile concussion in male mice monitored by diffusion MRI. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aObenaus%2C+A+%22bioRxiv%22">bioRxiv</a>. , (2023).</li>
<li>Schindelin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fiji%3A+An+open-source+platform+for+biological-image+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Fiji: An open-source platform for biological-image analysis.</a> Nat Methods. 9 (7), 676-682 (2012).</li>
<li>Clément, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Juvenile+mild+traumatic+brain+injury+elicits+distinct+spatiotemporal+astrocyte+responses%5BTitle%5D)+AND+%22Glia%22%5BJournal%5D)">Juvenile mild traumatic brain injury elicits distinct spatiotemporal astrocyte responses.</a> Glia. 68 (3), 528-542 (2020).</li>
<li>Drieu, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Persistent+neuroinflammation+and+behavioural+deficits+after+single+mild+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Persistent neuroinflammation and behavioural deficits after single mild traumatic brain injury.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 42 (12), 2216-2229 (2022).</li>
<li>Obenaus, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+single+mild+juvenile+TBI+in+male+mice+leads+to+regional+brain+tissue+abnormalities+at+12+months+of+age+that+correlate+with+cognitive+impairment+at+the+middle+age%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathol+Commun%22%5BJournal%5D)">A single mild juvenile TBI in male mice leads to regional brain tissue abnormalities at 12 months of age that correlate with cognitive impairment at the middle age.</a> Acta Neuropathol Commun. 11 (1), 32(2023).</li>
<li>Ryan, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Traumatic+brain+injury+in+children%3A+Glial+fibrillary+acidic+protein+and+clinical+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatr+Emerg+Care%22%5BJournal%5D)">Traumatic brain injury in children: Glial fibrillary acidic protein and clinical outcomes.</a> Pediatr Emerg Care. 38 (3), e1139-e1142 (2022).</li>
<li>Czeiter, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+biomarkers+on+admission+in+acute+traumatic+brain+injury%3A+Relations+to+severity%2C+CT+findings+and+care+path+in+the+CENTER-TBI+study%5BTitle%5D)+AND+%22EBioMedicine%22%5BJournal%5D)">Blood biomarkers on admission in acute traumatic brain injury: Relations to severity, CT findings and care path in the CENTER-TBI study.</a> EBioMedicine. 56, 102785(2020).</li>
<li>Edwards, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serum+GFAP%2C+NfL%2C+and+tau+concentrations+are+associated+with+worse+neurobehavioral+functioning+following+mild%2C+moderate%2C+and+severe+TBI%3A+A+cross-sectional+multiple-cohort+study%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurol%22%5BJournal%5D)">Serum GFAP, NfL, and tau concentrations are associated with worse neurobehavioral functioning following mild, moderate, and severe TBI: A cross-sectional multiple-cohort study.</a> Front Neurol. 14, 1223960(2023).</li>
<li>Smith, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-fat+diet+consumption+negatively+influences+closed-head+traumatic+brain+injury+in+a+pediatric+rodent+model%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">High-fat diet consumption negatively influences closed-head traumatic brain injury in a pediatric rodent model.</a> Exp Neurol. 379, 114888(2024).</li>
<li>Hunniford, V. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+systematic+assessment+of+preclinical+multilaboratory+studies+and+a+comparison+to+single+laboratory+studies%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">A systematic assessment of preclinical multilaboratory studies and a comparison to single laboratory studies.</a> eLife. 12, e76300(2023).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>BSA</td><td>Sigma Aldrich Chimie S.a.r.l 80 Rue de Luzais L'lsle-d'Abeau Chesnes - BP701 38297 Saint-Quentin-Fallavier Cedex France</td><td>A7030</td><td></td></tr><tr><td>C57Bl6J mice&nbsp;</td><td>Charles River Laboratory Francia CRLF 9 Tutti. Moulin Berger, 69130 &Eacute; cully, Francia</td><td></td><td>Bordeaux</td></tr><tr><td>Impattatore elettromagnetico</td><td>Leica Biosystems, Richmond, IL USA</td><td>Impact One impattatore</td><td></td>stereotassico</tr><tr><td>Microscopio a epifluorescenza</td><td>Olympus, BX41, Center Valley, PA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Glicole etilenico</td><td>Sigma Aldrich Chimie S.a.r.l 80 Rue de Luzais L'lsle-d'Abeau Chesnes - BP701 38297 Saint-Quentin-Fallavier Cedex Francia</td><td>102466</td><td></td></tr><tr><td>GFAP anticorpo primario</td><td>Millipore, Billerica, MA</td><td>AB5541</td><td>pollo anti-GFAP</td></tr><tr><td>GFAP anticorpo secondario</td><td>Molecular Probes, Invitrogen</td><td>A11034</td><td>capra anti-coniglio AlexaFluor&nbsp; 488</td></tr><tr><td>Glicerolo</td><td>Sigma Aldrich Chimie S.a.r.l 80 Rue de Luzais L'lsle-d'Abeau Chesnes - BP701 38297 Saint-Quentin-Fallavier Cedex France</td><td>G5516</td><td></td></tr><tr><td>Foglio di alluminio per impieghi gravosi</td><td>Kirkland</td><td>RK611</td><td>ottenuto presso Cosco</td></tr><tr><td>Micromanager software&nbsp;</td><td>(NIH, USA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Anticorpo primario NeuN</td><td>AbCam, Discovery Drive, Cambridge Biomedical Campus, Cambridge, CB2 0AX, Regno Unito</td><td>AB128886</td><td>coniglio</td></tr><tr><td>anticorpo secondario NeuN</td><td>Sonde molecolari, Invitrogen</td><td>A11041</td><td>capra anti-pollo AlexaFluor 568</td></tr><tr><td>PBS</td><td>Sigma Aldrich Chimie S.a.r.l 80 Rue de Luzais L'lsle-d'Abeau Chesnes - BP701 38297 Saint-Quentin-Fallavier Cedex France</td><td>P5493</td><td></td></tr><tr><td>PFA</td><td>Sigma Aldrich Chimie S.a.r.l 80 Rue de Luzais L'lsle-d'Abeau Chesnes - BP701 38297 Saint-Quentin-Fallavier Cedex France</td><td>1.04003</td><td></td></tr><tr><td>Sodio azide</td><td>Sigma Aldrich Chimie S.a.r.l 80 Rue de Luzais L'lsle-d'Abeau Chesnes - BP701 38297 Saint-Quentin-Fallavier Cedex France</td><td>26628-22-8</td><td></td></tr><tr><td>Cornice stereotassica - base</td><td>KOPF instruments 7324 Elmo St, Tujunga, CA 91042, &Eacute; tats-Unis</td><td>900-C</td><td></td></tr><tr><td>Telaio stereotassico - manipolatore di elettrodi</td><td>KOPF instruments 7324 Elmo St, Tujunga, CA 91042, &Eacute; tats-Unis</td><td>960</td><td></td></tr><tr><td>Stereotaxic frame - u-frame</td><td>KOPF instruments 7324 Elmo St, Tujunga, CA 91042, &Eacute; tats-Unis</td><td>900-U</td><td></td></tr><tr><td>Triton x-100</td><td>Sigma Aldrich Chimie S.a.r.l 80 Rue de Luzais L'lsle-d'Abeau Chesnes - BP701 38297 Saint-Quentin-Fallavier Cedex France</td><td>X100</td><td></td></tr><tr><td>Vectashield</td><td>Vector laboratories</td><td>H-1000-10</td><td>Mezzo di montaggio</td></tr><tr><td>Vibratome</td><td>Leica Biosystems, Richmond, IL USA</td><td>VTS1000</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Laboratorio Jackson Il laboratorio Jackson 600 Main Street Bar Harbor, ME Stati Uniti d'America 04609</td><td></td><td>UCR</td></tr></tbody></table>

un modello di commozione cerebrale pediatrica nei topi: trauma cranico chiuso con disturbi a lungo termine (child) 

A Pediatric Concussion Model in Mice: Closed Head Injury with Long-Term Disorders (CHILD)

Il modello CHILD è un modello relativamente rapido e riproducibile di mTBI nei topi pediatrici, che consente anche variazioni di gravità e posizione. I topi CHILD, come previsto, hanno mostrato tempi di recupero significativamente più lunghi da un trauma cranico chiuso (Figura 3). Quando le coorti (n = 36 femmine sham, n = 140 maschi sham, n = 30 femmine G1, n = 55 maschi G1, n = 32 femmine G2, n = 141 maschi G2) sono state aggregate, è stato osservato un ritardo nel tempo di raddrizzamento ...

Un modello di commozione cerebrale pediatrica nei topi: trauma cranico chiuso con disturbi a lungo termine (CHILD) 

Concussions and mild traumatic brain injuries (mTBI) during childhood represent a significant health endangerment, with many patients later in life ...

a-pediatric-concussion-model-mice-closed-head-injury-with-long-term

Research

Ricerca

JoVE Journal

Neuroscience

Neuroscienze

Fonte: Yang, Z., et.al. Un modello ripetitivo di trauma cranico concussivo nei topi. J. Vis. Exp. (2016). Questo video mostra l'induzione di lesioni cerebrali concussive ripetute in un topo utilizzando un dispositivo a impatto elettromagnetico. La procedura prevede il posizionamento della punta d'impatto tra le suture interfrontali e lambdoidi sul cranio di un topo anestetizzato e l'utilizzo di una punta della sonda per impostare con precisione la profondità d'impatto. L'impatto viene erogato a...

Modellazione di lesioni ripetitive alla testa da commozione cerebrale in un modello murino

La commozione cerebrale rappresenta il tipo più comune di lesione cerebrale traumatica. Pertanto, un modello animale di commozione cerebrale ripetitiva, che replica le caratteristiche importanti di una lesione nei pazienti, può fornire un mezzo per studiare la commozione cerebrale in modo rigoroso, controllato ed efficiente.

Un ripetitivo Concussive trauma cranico Modello nei topi

Gli atleti assorbono ogni anno centinaia di lievi infezioni traumatiche cerebrali (mTBI) / concussioni; Tuttavia, la conseguenza di queste nel cervello è poco capita. Pertanto, un modello animale di mTBI singolo e ripetitivo che replica costantemente sintomi clinicamente rilevanti fornisce i mezzi per avanzare lo studio di mTBI e concussione.

Un modello di mouse del singolo e ripetitivo dolore cerebrale traumatico lieve

Il protocollo descrive una lieve lesione cerebrale traumatica in un modello murino. In particolare, viene spiegato un protocollo passo-passo per indurre un lieve trauma cranico chiuso della linea mediana e la caratterizzazione del modello animale.

Modello elettromagnetico controllato a testa chiusa di lieve lesione cerebrale traumatica nei topi

Qui, presentiamo un modello di ratto con lesione cerebrale traumatica lieve (mTBI) a testa chiusa e la sua convalida che mostra una notevole somiglianza con l'mTBI umano per quanto riguarda le manifestazioni comportamentali durante le fasi acute e subacute.

Modello di ratto di lesione traumatica lieve a testa chiusa e sua convalida

Questo protocollo presenta un modello murino modificato di lesione cerebrale traumatica lieve ripetitiva (rmTBI) indotta tramite un metodo di lesione cranica chiusa (CHI). L'approccio presenta una finestra cranica assottigliata e una percussione fluida per ridurre l'infiammazione comunemente causata dall'esposizione alle meningi, insieme a una migliore riproducibilità e accuratezza nella modellazione dell'rmTBI nei roditori.

Modello murino modificato di lesione cerebrale traumatica lieve ripetitiva che incorpora finestra cranica assottigliata e percussione fluida

Qui descriviamo una lettura molecolare di lungo termine dell'adattamento...

Una lettura molecolare di lungo termine adattamento olfattivo nel<em&gt; C. elegans</em

Cellule ensheathing olfattive (OECs) sono cellule della cresta neurale che permettono la crescita dei neuroni olfattivi primari. Questa proprietà specifica può essere utilizzato per il trapianto cellulare. Presentiamo qui un modello di trapianto cellulare basata sull'uso di OECs in un modello di lesione del nervo laringeo.

Il trapianto di cellule olfattive ensheathing per valutare il recupero funzionale dopo Peripheral Nerve Injury

Immagini dal vivo della coclea embrionale dei mammiferi è impegnativo, perché i processi di sviluppo a portata di mano operano su un gradiente temporale nell'arco di dieci giorni. Qui vi presentiamo un metodo per la coltura e quindi l'imaging embrionale dei tessuti espianto cocleare preso da un topo reporter fluorescente in cinque giorni.

A lungo termine Time Lapse Imaging del mouse cocleari Espianti

Qui si descrive un metodo per infliggere cranico chiuso lesione cerebrale traumatica (TBI) in Drosophila. Questo metodo fornisce un gateway per studiare i meccanismi cellulari e molecolari che sono alla base delle patologie TBI utilizzando la vasta gamma di strumenti sperimentali e le tecniche disponibili per le mosche.

Un metodo per infliggere Chiuso Testa trauma cranico in<em&gt; Drosophila</em

Scopri il modello CHILD per lo studio della commozione cerebrale pediatrica nei topi. Questo metodo riproduce lesioni craniche chiuse per analizzare neuroinfiammazione, alterazioni della sostanza bianca e disfunzioni comportamentali a lungo termine.

Un modello di commozione cerebrale pediatrica nei topi: trauma cranico chiuso con disturbi a lungo termine (CHILD)

Esplora altri video