Name: Cellule Neurali Della Cresta Cranica Protocollo Tridimensionale In Vitro Di Differenziazione Per Saggio Multiplexed (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-02-14T14:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 55 s
Description: Scopri un protocollo tridimensionale in vitro per la differenziazione di cellule della cresta cranica neurali da cellule staminali embrionali murine. Questo metodo riduce la variabilità delle neurosfere e consente saggi multiplexed per studiare lo sviluppo embrionale.

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<ol><li>Rothstein, M., Bhattacharya, D., Simoes-Costa, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+molecular+basis+of+neural+crest+axial+identity%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">The molecular basis of neural crest axial identity.</a> Dev Biol. 444, S170-S180 (2018).</li>
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<li>Zalc, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reactivation+of+the+pluripotency+program+precedes+formation+of+the+cranial+neural+crest%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Reactivation of the pluripotency program precedes formation of the cranial neural crest.</a> Science. 371 (6529), eabb4776(2021).</li>
<li>Perera, S. N., Kerosuo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On+the+road+again%3A+Establishment+and+maintenance+of+stemness+in+the+neural+crest+from+embryo+to+adulthood%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">On the road again: Establishment and maintenance of stemness in the neural crest from embryo to adulthood.</a> Stem Cells. 39 (1), 7-25 (2021).</li>
<li>Nguyen, B. H., Ishii, M., Maxson, R. E., Wang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Culturing+and+manipulation+of+O9-1+neural+crest+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Culturing and manipulation of O9-1 neural crest cells.</a> J Vis Exp. (140), e58346(2018).</li>
<li>Ishii, M., Arias, A. C., Liu, L., Chen, Y. B., Bronner, M. E., Maxson, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+stable+cranial+neural+crest+cell+line+from+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+Dev%22%5BJournal%5D)">A stable cranial neural crest cell line from mouse.</a> Stem Cells Dev. 21 (17), 3069-3080 (2012).</li>
<li>Rada-Iglesias, A., Bajpai, R., Prescott, S., Brugmann, S. A., Swigut, T., Wysocka, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epigenomic+annotation+of+enhancers+predicts+transcriptional+regulators+of+human+neural+crest%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Epigenomic annotation of enhancers predicts transcriptional regulators of human neural crest.</a> Cell Stem Cell. 11 (5), 633-648 (2012).</li>
<li>Cederquist, G. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Specification+of+positional+identity+in+forebrain+organoids%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Specification of positional identity in forebrain organoids.</a> Nat Biotechnol. 37 (4), 436-444 (2011).</li>
<li>Rada-Iglesias, A., Bajpai, R., Swigut, T., Brugmann, S. A., Flynn, R. A., Wysocka, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+unique+chromatin+signature+uncovers+early+developmental+enhancers+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A unique chromatin signature uncovers early developmental enhancers in humans.</a> Nature. 470 (7333), 279-283 (2011).</li>
<li>Prescott, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhancer+divergence+and+cis-regulatory+evolution+in+the+human+and+chimp+neural+crest%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Enhancer divergence and cis-regulatory evolution in the human and chimp neural crest.</a> Cell. 163 (1), 68-83 (2015).</li>
<li>Chaddah, R., Arntfield, M., Runciman, S., Clarke, L., van der Kooy, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clonal+neural+stem+cells+from+human+embryonic+stem+cell+colonies%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Clonal neural stem cells from human embryonic stem cell colonies.</a> J Neurosci. 32 (23), 7771-7781 (2012).</li>
<li>Bajpai, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CHD7+cooperates+with+PBAF+to+control+multipotent+neural+crest+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">CHD7 cooperates with PBAF to control multipotent neural crest formation.</a> Nature. 463 (7283), 958-962 (2010).</li>
<li>Sipahi, R., Zupanc, G. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stochastic+cellular+automata+model+of+neurosphere+growth%3A+Roles+of+proliferative+potential%2C+contact+inhibition%2C+cell+death%2C+and+phagocytosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Theor+Biol%22%5BJournal%5D)">Stochastic cellular automata model of neurosphere growth: Roles of proliferative potential, contact inhibition, cell death, and phagocytosis.</a> J Theor Biol. 445, 151-165 (2018).</li>
<li>Mori, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+neurosphere+size+on+the+growth+rate+of+human+neural+stem%2Fprogenitor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Res%22%5BJournal%5D)">Effect of neurosphere size on the growth rate of human neural stem/progenitor cells.</a> J Neurosci Res. 84 (8), 1682-1691 (2006).</li>
<li>Kress, C., Vandormael-Pournin, S., Baldacci, P., Cohen-Tannoudji, M., Babinet, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonpermissiveness+for+mouse+embryonic+stem+%28ES%29+cell+derivation+circumvented+by+a+single+backcross+to+129%2FSv+strain%3A+establishment+of+ES+cell+lines+bearing+the+Omd+conditional+lethal+mutation%5BTitle%5D)+AND+%22Mamm+Genome%22%5BJournal%5D)">Nonpermissiveness for mouse embryonic stem (ES) cell derivation circumvented by a single backcross to 129/Sv strain: establishment of ES cell lines bearing the Omd conditional lethal mutation.</a> Mamm Genome. 9 (12), 998-1001 (1998).</li>
<li>Simões-Costa, M., Bronner, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishing+neural+crest+identity%3A+a+gene+regulatory+recipe%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Establishing neural crest identity: a gene regulatory recipe.</a> Development. 142 (2), 242-257 (2015).</li>
<li>Memberg, S. P., Hall, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dividing+neuron+precursors+express+neuron-specific+tubulin%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Dividing neuron precursors express neuron-specific tubulin.</a> J Neurobiol. 27 (1), 26-43 (1995).</li>
<li>Kim, C. N., Shin, D., Wang, A., Nowakowski, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatiotemporal+molecular+dynamics+of+the+developing+human+thalamus%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Spatiotemporal molecular dynamics of the developing human thalamus.</a> Science. 382, eadf9941(2023).</li>
<li>Grimaldi, A., Comai, G., Mella, S., Tajbakhsh, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+bipotent+progenitors+that+give+rise+to+myogenic+and+connective+tissues+in+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22ELife%22%5BJournal%5D)">Identification of bipotent progenitors that give rise to myogenic and connective tissues in mouse.</a> ELife. 11, e70235(2022).</li>
<li>To, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+multiomic+atlas+of+human+early+skeletal+development%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A multiomic atlas of human early skeletal development.</a> Nature. 635 (8039), 657-667 (2024).</li>
<li>Bajpai, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+stages+of+rapid+and+uniform+neuralization+of+human+embryonic+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+Differ%22%5BJournal%5D)">Molecular stages of rapid and uniform neuralization of human embryonic stem cells.</a> Cell Death Differ. 16 (6), 807-825 (2009).</li>
<li>Kerosuo, L., Nie, S., Bajpai, R., Bronner, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Crestospheres%2C+Long-term+maintenance+of+multipotent%2C+premigratory+neural+crest+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">Crestospheres, Long-term maintenance of multipotent, premigratory neural crest stem cells.</a> Stem Cell Reports. 5 (4), 499-507 (2015).</li>
<li>Abe, S., Yamaguchi, S., Sato, Y., Harada, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sphere-derived+multipotent+progenitor+cells+obtained+from+human+oral+mucosa+are+enriched+in+neural+crest+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Sphere-derived multipotent progenitor cells obtained from human oral mucosa are enriched in neural crest cells.</a> Stem Cells Transl Med. 5 (1), 117-128 (2016).</li>
<li>Jensen, J. B., Parmar, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strengths+and+limitations+of+the+neurosphere+culture+system%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Strengths and limitations of the neurosphere culture system.</a> Mol Neurobiol. 34 (3), 153-161 (2006).</li>
<li>Ziegler, L., Grigoryan, S., Yang, I. H., Thakor, N. V., Goldstein, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+generation+of+Schwann+cells+from+human+embryonic+stem+cell-derived+neurospheres%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Rev+Rep%22%5BJournal%5D)">Efficient generation of Schwann cells from human embryonic stem cell-derived neurospheres.</a> Stem Cell Rev Rep. 7 (2), 394-403 (2011).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0,22 &mu; m filtri per siringhe</td><td>ClearLine</td><td>146560</td><td></td></tr><tr><td>15 mL Polipropilene ad alta trasparenza Tubo conico</td><td>Falcon</td><td>352096</td><td></td></tr><tr><td>200 &; L ClearLine Plus Puntali con filtro a basso legame</td><td>Dutscher</td><td>713263</td><td></td></tr><tr><td>40 &; m filtri</td><td>Falcon</td><td>352340</td><td></td></tr><tr><td>5 mL Pipetta sierologica</td><td>Starstedt</td><td>86.1253.001</td><td></td></tr><tr><td>50 mL Polipropilene ad alta trasparenza Tubo conico</td><td>Falcon</td><td>352070</td><td></td></tr><tr><td>Accutase</td><td>Merck-Sigma</td><td>A6964</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 asino anti coniglio IgG (H+L)</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>A21206</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 594 asino anti topo IgG (H+L)</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>A21203</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 647 asino anti capra IgG (H+L)</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>A31571</td><td></td></tr><tr><td>Soluzione antibiotico-antimicotica&nbsp;</td><td>Integratore Merck-Sigma</td><td>A5955</td><td></td></tr><tr><td>B27 PLUS</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>17504044</td><td></td></tr><tr><td>Albumina sierica bovina (BSA)</td><td>Merck-Sigma</td><td>A9418</td><td></td></tr><tr><td>Cloroformio</td><td>Carlo Erba</td><td>438601</td><td></td></tr><tr><td>Collagenasi di tipo IV</td><td>Thermofisher Scientific, Gibco</td><td>17104019</td><td></td></tr><tr><td>Costar Piastre a pozzetti multipli trattate con TC a 6 pozzetti</td><td>Corning</td><td>3516</td><td></td></tr><tr><td>Occhiali di copertura, rotondi</td><td>VWR</td><td>&nbsp; 630-2113&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>DMEM KnockOut</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>10829018</td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F12+Glutamax</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>10565018</td><td></td></tr><tr><td>DMEM ad alto glucosio</td><td>Merck-Sigma</td><td>D0822</td><td></td></tr><tr><td>DNA LoBind Provette da 2 mL</td><td>Eppendorf</td><td>30108078</td><td></td></tr><tr><td>Acqua distillata senza DNasi/RNasi</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>10977-035</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco' s Soluzione salina tamponata con fosfato (PBS)</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>14190144</td><td></td></tr><tr><td>Eppendorf Safe-Lock Tubes, 0,5 mL</td><td></td><td>Eppendorf 30121023</td><td></td></tr><tr><td>Eppendorf Safe-Lock Tubes, 2 mL</td><td>Eppendorf</td><td>30120094</td><td></td></tr><tr><td>ESGRO mLIF Medium Supplement</td><td>Merck-Sigma</td><td>ESG1107</td><td></td></tr><tr><td>Etanolo 70%</td><td>Carlo Erba</td><td>528170</td><td></td></tr><tr><td>Fetale Siero bovino</td><td>Merck-Sigma</td><td>F7524</td><td></td></tr><tr><td>Fibronectina</td><td>Merck-Sigma</td><td>F085-2MG</td><td></td></tr><tr><td>Fluoromount-G</td><td>Invitrogen</td><td>00-4958-02</td><td></td></tr><tr><td>Soluzione di gelatina</td><td>Merck-Sigma</td><td>ES-006-B</td><td></td></tr><tr><td>GlutaMAX</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>35050061</td><td></td></tr><tr><td>Human EGF</td><td>Peprotech</td><td>AF-100-15-500UG</td><td></td></tr><tr><td>FGF umano-basic</td><td>Peprotech</td><td>100-18B</td><td></td></tr><tr><td>Anticorpo SOX9 umano</td><td>R& Dsystems</td><td>AF3075</td><td></td></tr><tr><td>Insulina da pancreas bovino</td><td>Merck-Sigma</td><td>I6634</td><td></td></tr><tr><td>iScript cDNA Synthesis Kit</td><td>Biorad</td><td>1708891</td><td></td></tr><tr><td>Mouse Anti-Human AP-2 Alpha Monoclonal Antibody,</td> Anticorpo monoclonale non coniugato <td>DSHB</td><td>3B5</td><td></td></tr><tr><td>Mouse Anti-Human PAX7, Integratore</td><td></td><td></td> DSHB PAX7 <td></td>N2 non coniugato</tr><tr><td></td><td>Thermofisher Scientific</td><td>17502048</td><td></td></tr><tr><td>Neurobasal Medium</td><td>Thermofisher Scientific 21103049</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Piastra trattata con coltura non tissutale, 96 pozzetti,</td><td>Falcon</td> a fondo piatto <td>351172</td><td></td></tr><tr><td>Piastra trattata con coltura non tissutale, 96 pozzetti, Falcon con fondo a U</td><td></td><td>351177</td><td></td></tr><tr><td>Soluzione di paraformaldeide al 16%,</td><td>Microscopia elettronica</td> em grade <td>15710</td><td></td></tr><tr><td>Propan-2-olo</td><td>Carlo Erba</td><td>415154</td><td></td></tr><tr><td>Purificato anti-Tubulina & beta; 3 (TUJ1) Anticorpo</td><td>Biolegend</td><td>MMS-435P</td><td></td></tr><tr><td>RapiClear 1.47</td><td>Sunjin Lab</td><td>RC147001</td><td></td></tr><tr><td>RapiClear 1.52</td><td>Sunjin Lab</td><td>RC152001</td><td></td></tr><tr><td>Scotch Biadesivo 12,7 mm e volte; 22,8 m</td><td></td><td></td><td>Nastro biadesivo trasparente senza fibre</td></tr><tr><td>Kit SensiFAST SYBR No-ROX</td><td>Meridian Bioscience</td><td>BIO-98020</td><td></td></tr><tr><td>Bisturi chirurgici monouso sterili</td><td>Swann-Morton</td><td>05XX</td><td></td></tr><tr><td>Superfrost Plus Vetrini per microscopio ad adesione</td><td>Epredia</td><td>J1800AMNZ</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Thermofisher</td><td>Scientific A16046. </td><td></td></tr><tr><td>Reagente AP TRIzol</td><td>FisherScientific</td><td>15596026</td><td></td></tr><tr><td>Tripsina-EDTA (0,05%)</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>25300054</td><td></td></tr><tr><td>Tween-20</td><td>Fisher Scientific</td><td>10113103</td><td></td></tr><tr><td>TWIST1 Rabbit mAb (formulato IF)</td><td>Tecnologia di segnalazione cellulare</td><td>E7E2G</td><td></td></tr><tr><td>&beta;-mercaptoetanolo</td><td>Thermofisher Scientific</td><td></td><td></td>31350010</tr></tbody></table>

cellule neurali della cresta cranica protocollo tridimensionale in vitro di differenziazione per saggio multiplexed

Cranial Neural Crest Cells Three-Dimensional In Vitro Differentiation Protocol for Multiplexed Assay

Seguendo il protocollo, le colonie di mESC sono state dissociate e 3000 cellule sono state seminate in piastre a 96 pozzetti con fondo a U non trattate con TC. Il giorno 2, le NS aggregate sono state trasferite in piastre a fondo piatto a 96 pozzetti non trattate con TC per consentirne l'adesione. Una visualizzazione semplificata del protocollo di aggregazione NS è fornita nella Figura 1A. Le NS sono state coltivate fino al giorno 9 e poi processate per la colorazione in immunofluorescenza. ...

Cellule Neurali Della Cresta Cranica Protocollo Tridimensionale In Vitro Di Differenziazione Per Saggio Multiplexed

With their remarkable capacity to generate both ectodermal and mesenchymal derivatives, cranial neural crest cells (CNCC) have attracted a lot of interest ...

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Per coltivare le cellule staminali neurali cresta (NCSC) in vitro, un mezzo speciale (NCSCM) è obbligatorio. Parte essenziale della NCSCM è embrione estratto di pulcino (CEE). Noi qui descrivere le tecniche accurate per produrre una quantità di massimizzare la qualità CEE pura e alta, compresi i dettagli come l'isolamento, la macerazione, centrifugazione, filtrazione e processi.

Produzione di estratto di Chick dell&#39;embrione per la coltivazione delle cellule della cresta neurale Murine staminali

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Isolamento e la coltura delle cellule della cresta neurale da Embryonic Murine tubo neurale

Questo video illustra una tecnica per isolare le pieghe neurali craniche dalla regione del mesencefalo degli embrioni di pollo. Presenta un dettagliato processo di dissezione delle pieghe neurali, il loro posizionamento e l'attaccamento su vetrini coprioggetti rivestiti di fibronectina, seguito dall'osservazione della migrazione delle cellule della cresta neurale dalle pieghe neurali.

Isolamento delle pieghe neurali craniche da un embrione di pollo per una coltura di cellule neurali in cresta

Cresta neurale (NC), le cellule derivate da cellule umane staminali pluripotenti (HPSC) hanno un grande potenziale per modellare lo sviluppo umano e la malattia e per le terapie di sostituzione cellulare. Qui, un libero adattamento-feeder della tuttora ampiamente...

Derivazione libero-Feeder della cresta neurale progenitrici Cellule pluripotenti da cellule staminali umane

Con l'intento di caratterizzare i cambiamenti nei miRNA su cellule staminali neurali umane differenziate (hNSC), descriviamo la differenziazione delle hNSC su un sistema tridimensionale, la valutazione dei cambiamenti nell'espressione dei microRNA mediante array PCR di miRNA e l'analisi computazionale per la previsione del bersaglio dei miRNA e la sua convalida mediante doppio saggio della luciferasi.

Differenziazione di una linea di cellule staminali neurali umane in Tre Culture dimensionali, Geni Analisi di MicroRNA e putativo di destinazione

Descriviamo una tecnica per utilizzare le cellule staminali embrionali murine per generare due o tre corpi embrionali tridimensionali. Abbiamo poi spiegato come indurre la differenziazione neuronale delle cellule del corpo embrionali di acido retinoico, e come analizzare il loro stato di differenziazione dal marcatore di cellule progenitrici immunofluorescenza e immunoblotting.

Analisi di acido retinoico-indotta neurale differenziazione di cellule staminali embrionali di topo a organi embrionali due e tridimensionali

Questo protocollo descrive la dissezione e la coltura delle cellule creste neurali craniche dai modelli murini, principalmente per lo studio della migrazione cellulare. Descriviamo le tecniche di imaging dal vivo utilizzate e l'analisi dei cambiamenti di velocità e forma delle cellule.

Dissezione, cultura e analisi delle cellule staminali primarie dal mouse per lo studio della delaminazione e della migrazione delle cellule creste neurali

Presentato qui è un protocollo per la generazione di una coltura unicellulare di cellule staminali embrionali umane e la loro successiva differenziazione in cellule progenitrici neurali. Il protocollo è semplice, robusto, scalabile e adatto per lo screening farmacologico e le applicazioni di medicina rigenerativa.

Differenziazione neurale efficiente utilizzando la coltura a cella singola di cellule staminali embrionali umane

In questo protocollo, descriviamo una strategia di differenziazione stabile e altamente efficiente per la generazione di neuroni simpatici postganglionici dalle cellule staminali pluripotenti umane. Questo modello renderà i neuroni disponibili per l'uso di studi di disturbi autonomici multipli.

Differenziazione efficiente dei neuroni simpatici postganglionici utilizzando cellule staminali pluripotenti umane in condizioni di coltura senza alimentatore e definite chimicamente

Qui, abbiamo stabilito un metodo a basso costo e facile da usare che indirizza una differenziazione rapida ed efficiente dalle cellule staminali embrionali ai neuroni. Questo metodo è adatto per la popolarità tra i laboratori e può essere uno strumento utile per la ricerca neurologica.

Differenziazione neuronale dalle cellule staminali embrionali del topo in vitro

Questo protocollo versatile descrive l'isolamento delle cellule della cresta neurale premigratoria (NCC) attraverso l'escissione di pieghe neurali craniche da embrioni di pulcino. Dopo la placcatura e l'incubazione, gli NCC migratori emergono dagli espianti di piega neurale, consentendo la valutazione della morfologia cellulare e della migrazione in un ambiente 2D semplificato.

Preparazione e analisi morfologica di colture cellulari di cresta neurale cranica di pulcino

Scopri un protocollo tridimensionale in vitro per la differenziazione di cellule della cresta cranica neurali da cellule staminali embrionali murine. Questo metodo riduce la variabilità delle neurosfere e consente saggi multiplexed per studiare lo sviluppo embrionale.

Cellule Neurali Della Cresta Cranica Protocollo Tridimensionale In Vitro Di Differenziazione Per Saggio Multiplexed

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