Name: Determinazione di quattro componenti in un sistema di somministrazione di RNA di nanoparticelle lipidiche mediante cromatografia liquida combinata con rivelatore di diffusione della luce evaporativa (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-30T12:50:00.000+00:00
Duration: 8 min 54 s
Description: Scopri un metodo HPLC-ELSD per analizzare quattro componenti di nanoparticelle lipidiche in sistemi di somministrazione di RNA. Questa tecnica offre separazione efficiente, elevata sensibilità e costi ridotti per la ricerca.

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<ol><li>Zong, Y., Lin, Y., Wei, T., Cheng, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipid+nanoparticle+%28LNP%29+enables+mRNA+delivery+for+cancer+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Mater%22%5BJournal%5D)">Lipid nanoparticle (LNP) enables mRNA delivery for cancer therapy.</a> Adv Mater. 35 (51), e2303261(2023).</li>
<li>Vlatko, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-immunotherapy+application+of+LNP-mRNA%3A+Maximizing+efficacy+and+safety%5BTitle%5D)+AND+%22Biomedicines%22%5BJournal%5D)">Non-immunotherapy application of LNP-mRNA: Maximizing efficacy and safety.</a> Biomedicines. 9 (5), 530(2021).</li>
<li>Eygeris, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemistry+of+lipid+nanoparticles+for+RNA+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Acc+Chem+Res%22%5BJournal%5D)">Chemistry of lipid nanoparticles for RNA delivery.</a> Acc Chem Res. 55 (1), 2-12 (2021).</li>
<li>Sun, D., Lu, Z. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+and+function+of+cationic+and+ionizable+lipids+for+nucleic+acid+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Pharm+Res%22%5BJournal%5D)">Structure and function of cationic and ionizable lipids for nucleic acid delivery.</a> Pharm Res. 40 (1), 27-46 (2023).</li>
<li>Rebecca, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipid+nanoparticle+formulations+for+enhanced+co-delivery+of+siRNA+and+mRNA%5BTitle%5D)+AND+%22Nano+Lett%22%5BJournal%5D)">Lipid nanoparticle formulations for enhanced co-delivery of siRNA and mRNA.</a> Nano Lett. 18 (6), 3814-3822 (2018).</li>
<li>Maugeri, M., Nawaz, M., Papadimitriou, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Linkage+between+endosomal+escape+of+LNP-mRNA+and+loading+into+EVs+for+transport+to+other+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Linkage between endosomal escape of LNP-mRNA and loading into EVs for transport to other cells.</a> Nat Commun. 10, 4333(2019).</li>
<li>Renee, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+PEGylation+on+LNP+based+mRNA+delivery+to+the+eye%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">The effects of PEGylation on LNP based mRNA delivery to the eye.</a> PLoS One. 15 (10), e0241006(2020).</li>
<li>Benedicto, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+phospholipid+chemistry+for+improved+lipid+nanoparticle+%28LNP%29+delivery+of+messenger+RNA+%28mRNA%29%5BTitle%5D)+AND+%22Biomater+Sci%22%5BJournal%5D)">Optimization of phospholipid chemistry for improved lipid nanoparticle (LNP) delivery of messenger RNA (mRNA).</a> Biomater Sci. 10 (2), 549-559 (2022).</li>
<li>Kamanzi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+visualization+of+lipid+nanoparticle+fusion+as+a+function+of+formulation+and+process+parameters%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Nano%22%5BJournal%5D)">Quantitative visualization of lipid nanoparticle fusion as a function of formulation and process parameters.</a> ACS Nano. 18 (28), 18191-18201 (2024).</li>
<li>Melissa, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+lipid+nanoparticles+for+the+delivery+of+nebulized+therapeutic+mRNA+to+the+lungs%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biomed+Eng%22%5BJournal%5D)">Optimization of lipid nanoparticles for the delivery of nebulized therapeutic mRNA to the lungs.</a> Nat Biomed Eng. 5 (9), 1059-1068 (2021).</li>
<li>Packer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+mechanism+for+the+loss+of+mRNA+activity+in+lipid+nanoparticle+delivery+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">A novel mechanism for the loss of mRNA activity in lipid nanoparticle delivery systems.</a> Nat Commun. 12 (1), 6777(2021).</li>
<li>Snyder, L. R., Kirkland, J. J., Dolan, J. W. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSnyder%2C+LR+%22Introduction+to+Modern+Liquid+Chromatography%22">Introduction to Modern Liquid Chromatography</a>. , John Wiley & Sons. Hoboken, NJ. (2010).</li>
<li>Zhang, L. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+mRNA-LNP+components+of+two+globally+marketed+COVID-19+vaccines+on+efficacy+and+stability%5BTitle%5D)+AND+%22NPJ+Vaccines%22%5BJournal%5D)">Effect of mRNA-LNP components of two globally marketed COVID-19 vaccines on efficacy and stability.</a> NPJ Vaccines. 8 (1), 156(2023).</li>
<li>Zhang, Y., Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Performance+comparison+of+different+ELSD+detectors+in+pharmaceutical+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Methods%22%5BJournal%5D)">Performance comparison of different ELSD detectors in pharmaceutical analysis.</a> Anal Methods. 7 (12), 4800-4807 (2015).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Acido acetico</td><td>ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc.</td><td>CAEQ-4-000319-0050</td><td></td></tr><tr><td>Bilancia</td><td>Shimadzu (Shanghai) Global Laboratory Consumables Co., Ltd</td><td>AP135W</td><td></td></tr><tr><td>Colonna</td><td>Shimadzu (Shanghai) Global Laboratory Consumables Co., Ltd</td><td>ShimNex WP C4 (380-01235-74)</td><td></td></tr> <tr><td>ELSD</td><td>Shimadzu (China) CO., LTD</td><td>ELSD-LT III (228-65900-46)</td><td></td></tr> <tr><td>LabSolutions Software</td><td>Shimadzu (China) CO., LTD</td><td></td><td></td></tr><tr><td>LC</td><td>Shimadzu (Cina) CO., LTD</td><td>LC40D XR</td><td></td></tr><tr><td>Metanolo</td><td>ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc.</td><td>CAEQ-4-003302-4000</td><td></td></tr><tr><td>Pipetta-100 &; L</td><td>Shimadzu (Shanghai) Global Laboratory Consumables Co., Ltd</td><td>00-NAR-100</td><td></td></tr><tr><td>Pipetta-1000 & micro; L</td><td>Shimadzu (Shanghai) Global Laboratory Consumables Co., Ltd</td><td>00-NAR-1000</td><td></td></tr><tr><td>TEA</td><td>ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc.</td><td>CAEQ-4-012190-0250</td><td></td></tr><tr><td>Sistema di acqua ultrapura</td><td>Millipore</td><td>ZIQ7000T0C</td><td></td></tr><tr><td>Vortex Mixer</td><td>ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc.</td><td>VM-B</td><td></td></tr></tbody></table>

determinazione di quattro componenti in un sistema di somministrazione di rna di nanoparticelle lipidiche mediante cromatografia liquida combinata con rivelatore di diffusione della luce evaporativa

Determining Four Components in a Lipid Nanoparticle RNA Delivery System by Liquid Chromatography Combined with Evaporative Light Scattering Detector

L'analisi della soluzione standard LNP utilizzando questo metodo ha raggiunto un grado di separazione maggiore di 1,5 per i quattro componenti, realizzando la separazione di base. Inoltre, non sono stati osservati residui nelle soluzioni standard ad alta concentrazione, come illustrato nella Figura 1. È stata stabilita una curva di calibrazione in un intervallo di concentrazione compreso tra 5 e 250 μg/mL, con coefficienti di correlazione tutti superiori a 0,999, indicando un ampio intervall...

Determinazione di quattro componenti in un sistema di somministrazione di RNA di nanoparticelle lipidiche mediante cromatografia liquida combinata con rivelatore di diffusione della luce evaporativa

This article presents a method for the analysis of lipid nanoparticle (LNP) components. LNP, serving as a pivotal vector for RNA-based drugs, primarily ...

determining-four-components-lipid-nanoparticle-rna-delivery-system

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Questo protocollo descrive un metodo di estrusione per la preparazione di vescicole lipidiche di sub-micron dimensioni con un alto grado di omogeneità. Questo metodo utilizza un sistema a pressione controllata con velocità controllate flusso di azoto per la preparazione di liposomi. La preparazione...

Costante pressione controllata metodo di estrusione per la preparazione del Nano di dimensioni vescicole lipidiche

Un protocollo per l'analisi delle nanoparticelle di monitoraggio (NTA) e high-throughput citometria a flusso per valutare nanoparticelle polimeriche consegna del gene è descritto. NTA è utilizzato per caratterizzare la distribuzione delle particelle nanoparticelle dimensioni e la distribuzione delle particelle per plasmide. High-throughput citometria a flusso consente quantitativa valutazione di efficacia di trasfezione per una libreria di biomateriali di consegna del gene.

Valutazione della consegna del gene polimerici Nanoparticelle per l&#39;analisi delle nanoparticelle Monitoraggio e High-throughput Citometria a Flusso

In questo studio, è stato descritto un metodo per sintetizzare popolazioni ultra-piccole di nanoparticelle biocompatibili, nonché diversi metodi in vitro con cui valutare le loro interazioni cellulari.

Solid Lipid nanoparticelle (linfonodi sentinella) Applicazioni per intracellulare targeting

Il protocollo presentato descrive l'analisi del trasporto mediato da proteine di membrana a livello di singolo trasportatore utilizzando doppi strati lipidici privi di solventi che attraversano i pori. Ciò si ottiene grazie alla creazione di chip array di nanopori prodotti in serie, combinati con l'acquisizione e l'analisi dei dati altamente parallele, consentendo la futura creazione di screening degli effettori delle proteine di membrana.

Trasporto di membrana processi analizzati da un altamente parallelo sistema Nanopore Chip a risoluzione della proteina singolo

gocce lipidiche sono organelli importanti per la replicazione di diversi agenti patogeni, tra cui il virus dell'epatite C (HCV). Si descrive un metodo per isolare le goccioline lipidiche per la spettrometria di massa quantitativa delle proteine ​​associate; può essere utilizzato in una varietà di condizioni, come l'infezione da virus, stress ambientale, o di trattamento farmacologico.

Isolamento Droplet per l&#39;analisi quantitativa dei lipidi Spettrometria di Massa

Questo articolo viene descritto l'incapsulamento di falcarindiol in nanoparticelle di nm 74 del lipido-rivestite. L'assorbimento cellulare delle nanoparticelle di cellule staminali umane in goccioline del lipido è monitorato da formazione immagine di fluorescenza e confocale. Le nanoparticelle sono fabbricate con il metodo di iniezione rapida di solvente spostando e loro dimensione viene misurata con la tecnica di dispersione della luce dinamica.

Assorbimento di nuove nanoparticelle rivestite con lipidi contenenti Falcarindiol di cellule staminali mesenchimali umane

Questo protocollo descrive la fabbricazione di liposomi e come questi possono essere immobilizzati su una superficie e immagine individualmente in modo parallelo massiccio utilizzando la microscopia a fluorescenza. Ciò consente la quantificazione delle dimensioni e dell'inomogeneità compositiva tra singoli liposomi della popolazione.

Un saggio di liposoma singolo basato sulla microscopia quantitativa per rilevare l'inomogeneità compositiva tra i singoli liposomi

Le nanoparticelle lipidiche sono sviluppate utilizzando un approccio di piattaforma di miscelazione microfluidica per l'incapsulamento di mRNA e DNA.

Formulazione e caratterizzazione di nanoparticelle lipidiche per la somministrazione genica utilizzando una piattaforma di miscelazione microfluidica

Dimostriamo come utilizzare un nuovo strumento di analisi del tracciamento delle nanoparticelle per stimare la distribuzione dimensionale e la concentrazione totale di particelle di vescicole extracellulari isolate dal tessuto adiposo perigonadale di topo e dal plasma umano.

Analisi di tracciamento delle nanoparticelle per la quantificazione e la determinazione delle dimensioni delle vescicole extracellulari

Qui viene presentato un protocollo per la formulazione di nanoparticelle lipidiche (LNP) che incapsulano l'mRNA che codifica per la luciferasi delle lucciole. Questi LNP sono stati testati per la loro potenza in vitro in cellule HepG2 e in vivo in topi C57BL/6.

Test dell'efficienza in vitro e in vivo di nanoparticelle mRNA-lipidi formulate mediante miscelazione microfluidica

Viene dimostrato un protocollo dettagliato per la sintesi di nanoparticelle lipidiche (LNP) utilizzando tecnologie di miscelazione a getto a impatto confinato (CIJ), tra cui un CIJ a due getti e un miscelatore a vortice multi-ingresso a quattro getti (μMIVM). I miscelatori CIJ generano ambienti di micromiscelazione riproducibili e turbolenti, con conseguente produzione di LNP monodispersi.

Sintesi di nanoparticelle lipidiche mediante flusso turbolento in miscelatori a getto a impatto confinato

Scopri un metodo HPLC-ELSD per analizzare quattro componenti di nanoparticelle lipidiche in sistemi di somministrazione di RNA. Questa tecnica offre separazione efficiente, elevata sensibilità e costi ridotti per la ricerca.

Determinazione di quattro componenti in un sistema di somministrazione di RNA di nanoparticelle lipidiche mediante cromatografia liquida combinata con rivelatore di diffusione della luce evaporativa (Video) | JoVE Journal

Determinazione di quattro componenti in un sistema di somministrazione di RNA di nanoparticelle lipidiche mediante cromatografia liquida combinata con rivelatore di diffusione della luce evaporativa

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