Name: Imaging dei segnali Ca2+ in piccole vene polmonari a pressioni intraluminali fisiologiche (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-03-21T13:20:00.000+00:00
Duration: 5 min 35 s
Description: Scopri l'imaging dei segnali Ca²⁺ in piccole vene polmonari a pressioni intraluminali fisiologiche. Questo metodo con Fluo-4 AM e microscopia confocale avanza la comprensione della regolazione vascolare.

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<ol><li>Suresh, K., Shimoda, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+circulation%5BTitle%5D)+AND+%22Compr+Physiol%22%5BJournal%5D)">Lung circulation.</a> Compr Physiol. 6 (2), 897-943 (2016).</li>
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<li>Daneva, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Caveolar+peroxynitrite+formation+impairs+endothelial+TRPV4+channels+and+elevates+pulmonary+arterial+pressure+in+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Caveolar peroxynitrite formation impairs endothelial TRPV4 channels and elevates pulmonary arterial pressure in pulmonary hypertension.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 118 (17), e2023130118(2021).</li>
<li>Daneva, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+pannexin+1-TRPV4+channel+signaling+lowers+pulmonary+arterial+pressure+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Endothelial pannexin 1-TRPV4 channel signaling lowers pulmonary arterial pressure in mice.</a> Elife. 10, e67777(2021).</li>
<li>Kuhr, F. K., Smith, K. A., Song, M. Y., Levitan, I., Yuan, J. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+mechanisms+of+pulmonary+arterial+hypertension%3A+role+of+Ca2%2B+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">New mechanisms of pulmonary arterial hypertension: role of Ca2+ signaling.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 302 (8), H1546-H1562 (2012).</li>
<li>Sonkusare, S. K., Laubach, V. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+TRPV4+channels+in+lung+edema+and+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Top+Membr%22%5BJournal%5D)">Endothelial TRPV4 channels in lung edema and injury.</a> Curr Top Membr. 89, 43-62 (2022).</li>
<li>Kuppusamy, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Purinergic+P2Y2+receptor-induced+activation+of+endothelial+TRPV4+channels+mediates+lung+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Signal%22%5BJournal%5D)">Purinergic P2Y2 receptor-induced activation of endothelial TRPV4 channels mediates lung ischemia-reperfusion injury.</a> Sci Signal. 16 (808), eadg1553(2023).</li>
<li>Alvarez, D. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transient+receptor+potential+vanilloid+4-mediated+disruption+of+the+alveolar+septal+barrier%3A+a+novel+mechanism+of+acute+lung+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Transient receptor potential vanilloid 4-mediated disruption of the alveolar septal barrier: a novel mechanism of acute lung injury.</a> Circ Res. 99 (9), 988-995 (2006).</li>
<li>Balakrishna, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TRPV4+inhibition+counteracts+edema+and+inflammation+and+improves+pulmonary+function+and+oxygen+saturation+in+chemically+induced+acute+lung+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">TRPV4 inhibition counteracts edema and inflammation and improves pulmonary function and oxygen saturation in chemically induced acute lung injury.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 307 (2), L158-L172 (2014).</li>
<li>Suresh, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reactive+oxygen+species+induced+Ca2%2B+influx+via+TRPV4+and+microvascular+endothelial+dysfunction+in+the+SU5416%2Fhypoxia+model+of+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Reactive oxygen species induced Ca2+ influx via TRPV4 and microvascular endothelial dysfunction in the SU5416/hypoxia model of pulmonary arterial hypertension.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 314 (5), L893-L907 (2018).</li>
<li>Haissaguerre, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spontaneous+initiation+of+atrial+fibrillation+by+ectopic+beats+originating+in+the+pulmonary+veins%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Spontaneous initiation of atrial fibrillation by ectopic beats originating in the pulmonary veins.</a> N Engl J Med. 339 (10), 659-666 (1998).</li>
<li>Heijman, J., Voigt, N., Nattel, S., Dobrev, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+and+molecular+electrophysiology+of+atrial+fibrillation+initiation%2C+maintenance%2C+and+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Cellular and molecular electrophysiology of atrial fibrillation initiation, maintenance, and progression.</a> Circ Res. 114 (9), 1483-1499 (2014).</li>
<li>Brunton, T. L., Fayrer, J. XXII <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Note+on+independent+pulsation+of+the+pulmonary+veins+and+vena+cava%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+R+Soc+Lond%22%5BJournal%5D)">Note on independent pulsation of the pulmonary veins and vena cava.</a> Proc R Soc Lond. 25, 174-176 (1877).</li>
<li>Namekata, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Involvement+of+the+Na%28%2B%29%2FCa%282%2B%29+exchanger+in+the+automaticity+of+guinea-pig+pulmonary+vein+myocardium+as+revealed+by+SEA0400%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Sci%22%5BJournal%5D)">Involvement of the Na(+)/Ca(2+) exchanger in the automaticity of guinea-pig pulmonary vein myocardium as revealed by SEA0400.</a> J Pharmacol Sci. 110 (1), 111-116 (2009).</li>
<li>Cros, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regional+differences+in+Ca2%2B+signaling+and+transverse-tubules+across+left+atrium+from+adult+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Regional differences in Ca2+ signaling and transverse-tubules across left atrium from adult sheep.</a> Int J Mol Sci. 24 (3), 2347(2023).</li>
<li>Dabertrand, F., Nelson, M. T., Brayden, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ryanodine+receptors%2C+calcium+signaling%2C+and+regulation+of+vascular+tone+in+the+cerebral+parenchymal+microcirculation%5BTitle%5D)+AND+%22Microcirculation%22%5BJournal%5D)">Ryanodine receptors, calcium signaling, and regulation of vascular tone in the cerebral parenchymal microcirculation.</a> Microcirculation. 20 (4), 307-316 (2013).</li>
<li>Nair, R., Lamaa, N. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aNair%2C+R+%22Pulmonary+capillary+wedge+pressure%22">Pulmonary capillary wedge pressure</a>. , StatPearls Publishing. Treasure Island, FL, USA. (2024).</li>
<li>Fukuta, H., Little, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+cardiac+cycle+and+the+physiologic+basis+of+left+ventricular+contraction%2C+ejection%2C+relaxation%2C+and+filling%5BTitle%5D)+AND+%22Heart+Fail+Clin%22%5BJournal%5D)">The cardiac cycle and the physiologic basis of left ventricular contraction, ejection, relaxation, and filling.</a> Heart Fail Clin. 4 (1), 1-11 (2008).</li>
<li>Daneva, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+IK+and+SK+channel+activation+decreases+pulmonary+arterial+pressure+and+vascular+remodeling+in+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Pulm+Circ%22%5BJournal%5D)">Endothelial IK and SK channel activation decreases pulmonary arterial pressure and vascular remodeling in pulmonary hypertension.</a> Pulm Circ. 13 (1), e12186(2023).</li>
<li>Marziano, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nitric+oxide-dependent+feedback+loop+regulates+transient+receptor+potential+vanilloid+4+%28TRPV4%29+channel+cooperativity+and+endothelial+function+in+small+pulmonary+arteries%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Heart+Assoc%22%5BJournal%5D)">Nitric oxide-dependent feedback loop regulates transient receptor potential vanilloid 4 (TRPV4) channel cooperativity and endothelial function in small pulmonary arteries.</a> J Am Heart Assoc. 6 (12), e007157(2017).</li>
<li>Chen, Y. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+smooth+muscle+Ca2%2B-signaling+nanodomains+in+blood+pressure+regulation%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Novel smooth muscle Ca2+-signaling nanodomains in blood pressure regulation.</a> Circulation. 146 (7), 548-564 (2022).</li>
<li>Sonkusare, S. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elementary+Ca2%2B+signals+through+endothelial+TRPV4+channels+regulate+vascular+function%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Elementary Ca2+ signals through endothelial TRPV4 channels regulate vascular function.</a> Science. 336, 597-601 (2012).</li>
<li>Arias-Cavieres, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ryanodine+receptor-mediated+calcium+release+has+a+key+role+in+hippocampal+LTD+induction%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Ryanodine receptor-mediated calcium release has a key role in hippocampal LTD induction.</a> Front Cell Neurosci. 12, 403(2018).</li>
<li>Chen, Y. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Calcium+signal+profiles+in+vascular+endothelium+from+Cdh5-GCaMP8+and+Cx40-GCaMP2+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vasc+Res%22%5BJournal%5D)">Calcium signal profiles in vascular endothelium from Cdh5-GCaMP8 and Cx40-GCaMP2 mice.</a> J Vasc Res. 58 (3), 159-171 (2021).</li>
<li>Ottolini, M., Sonkusare, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+calcium+signaling+mechanisms+in+arterial+smooth+muscle+and+endothelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Compr+Physiol%22%5BJournal%5D)">The calcium signaling mechanisms in arterial smooth muscle and endothelial cells.</a> Compr Physiol. 11 (2), 1831-1869 (2021).</li>
<li>Boyette, L. C., Burns, B. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBoyette%2C+LC+%22Physiology%2C+pulmonary+circulation%22">Physiology, pulmonary circulation</a>. , StatPearls Publishing. Treasure Island, FL, USA. (2024).</li>
<li>Ottolini, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Local+peroxynitrite+impairs+endothelial+transient+receptor+potential+vanilloid+4+channels+and+elevates+blood+pressure+in+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Local peroxynitrite impairs endothelial transient receptor potential vanilloid 4 channels and elevates blood pressure in obesity.</a> Circulation. 141 (16), 1318-1333 (2020).</li>
<li>Shan, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phosphorylation+of+the+ryanodine+receptor+mediates+the+cardiac+fight+or+flight+response+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Phosphorylation of the ryanodine receptor mediates the cardiac fight or flight response in mice.</a> J Clin Invest. 120 (12), 4388-4398 (2010).</li>
<li>Knot, H. J., Standen, N. B., Nelson, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ryanodine+receptors+regulate+arterial+diameter+and+wall+%5BCa2%2B%5D+in+cerebral+arteries+of+rat+via+Ca2%2B-dependent+K%2B+channels%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Ryanodine receptors regulate arterial diameter and wall [Ca2+] in cerebral arteries of rat via Ca2+-dependent K+ channels.</a> J Physiol. 1 (Pt 1), 211-221 (1998).</li>
<li>Tischbirek, C., Birkner, A., Jia, H., Sakmann, B., Konnerth, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deep+two-photon+brain+imaging+with+a+red-shifted+fluorometric+Ca2%2B+indicator%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Deep two-photon brain imaging with a red-shifted fluorometric Ca2+ indicator.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 112 (36), 11377-11382 (2015).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Software SparkAn progettato su misura&nbsp;</td><td>Università del Vermont</td><td></td><td>https://github.com/vesselman/SparkAn</td></tr><tr><td>Fluo-4, AM</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>F14201</td><td></td></tr><tr><td>FN1 Microscopio verticale&nbsp;</td>Riscaldatore / regolatore <td>di temperatura Nikon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>&nbsp;</td>Sistema di imaging <td>Warner Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>&nbsp;</td><td>Andor&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Software di acquisizione iQ 3.x</td><td>Andor&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Telecamere iXon EMCCD</td><td>Andor&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Filo di nylon per legare i vasi sanguigni</td> Sistemi <td>viventi Strumentazione</td> Camera per miografia <td>a pressione THR-G</td><td></td></tr><tr><td>&nbsp;</td><td>Strumentazione e struttura modello, Università del Vermont, Burlington, VT, USA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Revolution WD (con Borealis) Sistema di imaging confocale a disco rotante ad alta velocità</td><td>Andor&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Servoregolatore di pressione Ryanodine</td><td>Bio-Techne</td><td>1329</td><td></td></tr>&<tr><td>nbsp;</td><td>Living Systems Strumentazione</td><td></td><td></td></tr><tr><td>SS Perni di dissezione, 0,2 mm di diametro</td><td>Living Systems Strumentazione</td><td>PIN-0,2 mm</td><td></td></tr><tr><td>Pompa per tubi REGLO</td><td>ISMATEC</td><td>ISM4212</td><td></td></tr></tbody></table>

imaging dei segnali ca2+ in piccole vene polmonari a pressioni intraluminali fisiologiche

Imaging Ca2+ Signals in Small Pulmonary Veins at Physiological Intraluminal Pressures

La Figura 2A mostra un campo visivo da un piccolo PV a una pressione intraluminale di 5 mm Hg. I simboli + indicano i segnali Ca2+ rilevati automaticamente all'interno di un fotogramma selezionato (Video 1), indicato dal contorno verde. Un campo visivo è stato registrato da ogni PV e un PV è stato utilizzato da ciascun mouse. Un piccolo PV è stato considerato come n=1. Il numero di segnali Ca2+ per μm2 al minuto è stato confrontato prima e 5 minuti dopo l'aggiunta dell'inibitore RyR rianodina (5 μM)23 in esperimenti accoppiati. Un t-test accoppiato è stato utilizzato per confronti statistici per rilevare differenze significative. Il numero di segnali di Ca2+ che si verificano spontaneamente è stato di 0,73 ± 0,2 eventi al minuto per μm2 (Figura 2B, C) nelle condizioni sopra descritte. Il trattamento con rianodina ha inibito quasi completamente i segnali di Ca2+ in piccoli PV (Figura 2C, Video 2), come indicato da una drastica riduzione degli eventi al minuto per μm2. Questi dati mostrano che l'attività spontanea dei segnali di Ca2+ nello strato miocitario da piccoli PV pressurizzati rappresenta un'apertura di RyR. Questi risultati forniscono la prova che l'attività dei segnali di Ca2+ può essere studiata in piccoli PV sotto pressioni intraluminali fisiologiche. Questo metodo faciliterà studi futuri sugli effetti della pressione intraluminale e dei mediatori neuroumorali sulla segnalazione del Ca2+ nei piccoli miociti PV, offrendo potenzialmente preziose informazioni sulla regolazione della funzione PV. Mentre l'attuale studio si concentra sul numero di segnali RyR Ca2+ , è anche possibile analizzare le proprietà cinetiche di questi segnali, tra cui la durata, l'ampiezza, la diffusione spaziale e il tempo di salita. Comprendere come gli stimoli fisiologici e patologici influenzano le proprietà cinetiche dei segnali RyR Ca2+ può fornire importanti informazioni sulla regolazione della funzione PV sia in stati sani che malati.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67722/67722fig01v2.jpg"> 
Figura 1: Preparazione e imaging del Ca2+ dei PV. Immagini sequenziali che mostrano l'identificazione e l'isolamento di piccole PV, l'incubazione di fluo4-AM, l'incannulamento e la pressurizzazione (5 mm Hg), l'imaging confocale ad alta velocità del disco rotante e l'analisi delle immagini. Il rettangolo tratteggiato nell'immagine a sinistra rappresenta il PV utilizzato per lo studio. Abbreviazioni: PA = arteria polmonare; RA = atrio destro; PV = vena polmonare; LA = atrio sinistro. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67722/67722fig01largev2.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67722/67277fig02.jpg"> 
Figura 2: Analisi dell'imaging al Ca2+ . (A) Immagini di un campo visivo da un piccolo PV pressurizzato (5 mm Hg), caricato con fluo-4, in assenza (a sinistra) o in presenza di rianodina (5 μM; Inibitore di RyR, a destra). Il rettangolo verde indica l'area selezionata per il rilevamento automatico dei segnali Ca2+ . I segni + rappresentano gli eventi rilevati automaticamente all'interno del frame. I segnali rossi indicano segnali con un'area inferiore a 3000 μm2, mentre i segnali blu indicano segnali che occupavano un'area superiore a 3000 μm2. Ogni segno + indica un evento o un segnale Ca2+ . (B) F/F0 tracce di eventi rilevati dall'area selezionata indicata in A, che mostrano l'attività di segnali Ca2+ nello strato miocitario da piccoli PV pressurizzati in condizioni basali (a sinistra) e in presenza di rianodina (a destra). (C) Quantificazione di eventi al minuto per μm2 di segnali Ca2+ in piccoli PV prima e dopo l'aggiunta di rianodina (1 PV per topo; n=6 topi; **p &lt; 0,01 vs Basale; t-test accoppiato). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67722/67277fig02large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
Video 1: Segnali di Ca2+ in un piccolo PV pressurizzato a 5 mm Hg prima del trattamento con rianodina. Il campo visivo rappresenta il fotogramma selezionato, mostrato in colore verde nella Figura 2. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67722/PV_Baseline_5_mm_Hg.zip" target="_blank">Clicca qui per scaricare questo video.</a>
Video 2: Segnali Ca2+ in un piccolo PV pressurizzato a 5 mm Hg dopo il trattamento con rianodina (5 μM). Il campo visivo rappresenta il fotogramma selezionato, mostrato in colore verde nella Figura 2. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67722/PV_Baseline_5_mm_Hg_ryanodine.zip" target="_blank">Clicca qui per scaricare questo video.</a>

Imaging dei segnali Ca2+ in piccole vene polmonari a pressioni intraluminali fisiologiche

Pulmonary veins (PVs) carry oxygen-rich blood from the lungs back to the left heart, thus serving an important function in the delivery of oxygen-rich ...

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Biologia

Per valutare la diffusione e vascolare risposte polmonari di esercitare, descriviamo la tecnica multipla di ispirazione capacità di diffusione di ossigeno per determinare il volume di sangue capillare e capacità di diffusione a membrana, così come l'ecocardiografia agitato contrasto salina per valutare il reclutamento di anastomosi arterovenose intrapolmonari.

La valutazione di polmonare capillare sanguigno Volume, Diffusione di membrana, e intrapolmonare artero-anastomosi durante l&#39;allenamento

Descriviamo un protocollo di imaging che permette al clinico di visualizzare, in tempo reale, il paziente del intravascolare ed extravascular spazio volumi e impostare di conseguenza i parametri di rimozione di diuresi e fluido per il trattamento sicuro ed efficiente dell'edema polmonare.

Comodino ultrasuono per rimozione guida fluida in pazienti con Edema polmonare: il protocollo di Reverse-cascate

Le dimensioni delle vene polmonari (PV) sono parametri importanti quando si pianifica l'isolamento delle vene polmonari. L'ecocardiografia transesofagea 2D può fornire solo dati limitati sui PV; tuttavia, l'ecocardiografia 3D può valutare i diametri e le aree rilevanti dei PV, nonché la loro relazione spaziale con le strutture circostanti.

Metodo ecocardiografico tridimensionale per la visualizzazione e la valutazione di parametri specifici delle vene polmonari

Qui, descriviamo un flusso di lavoro correlativo per l'escissione, la pressurizzazione, la fissazione e l'imaging della valvola polmonare murina per determinare la conformazione grossolana e le strutture locali della matrice extracellulare.

Chirurgia ed elaborazione dei campioni per l'imaging correlativo della valvola polmonare murina

La microscopia a fluorescenza intravitale può essere utilizzata per studiare le interazioni leucocita-endoteliali e la perfusione capillare in tempo reale. Questo protocollo descrive i metodi per visualizzare e quantificare questi parametri nel microcircolo polmonare utilizzando un sistema di imaging polmonare stabilizzato nel vuoto.

Microscopia a fluorescenza intravitale a campo largo della microcircolazione polmonare polmonare polmonare acuta sperimentale utilizzando un sistema di imaging stabilizzato sotto vuoto

L'ecografia point-of-care (POCUS) dei polmoni fornisce risposte rapide in scenari clinici in rapida evoluzione. Presentiamo un protocollo efficiente e informativo per l'acquisizione di immagini per l'uso in contesti di terapia intensiva.

Ecografia polmonare point-of-care negli adulti: acquisizione di immagini

La valutazione ecografica point-of-care della vena cava inferiore (IVC) è comunemente utilizzata per identificare, tra le altre cose, lo stato del volume. L'imaging deve essere eseguito sistematicamente per garantire la ripetibilità. Questo manoscritto esamina i metodi e le insidie dell'esame ecografico IVC.

Metodo di acquisizione delle immagini per la valutazione ecografica della vena cava inferiore

L'ecocardiografia intracardiaca accurata (ICE) mostra una significativa accuratezza nella stima della struttura atriale sinistra, un metodo di stima della struttura cardiaca prospettico e promettente. Qui proponiamo un protocollo per la modellazione tridimensionale dell'atrio sinistro e delle vene polmonari con ICE e rimodellamento del catetere a mappatura anatomica rapida (FAM).

Modellazione tridimensionale dell'atrio sinistro e delle vene polmonari con un approccio ecocardiografico intracardiaco preciso

Questo protocollo dimostra l'isolamento guidato dalla microscopia e la colorazione in immunofluorescenza delle vene polmonari murine. Prepariamo campioni di tessuto contenenti l'atrio sinistro, le vene polmonari e i polmoni corrispondenti e li coloriamo per la troponina T cardiaca e la connessina 43.

Microdissezione e colorazione in immunofluorescenza di manicotti miocardici nelle vene polmonari murine

Il protocollo fornisce un approccio rapido, basato sul fenotipo, per la valutazione ecografica focalizzata del paziente ipoteso, utilizzando immagini sottocostali della vena cava inferiore e del cuore, con viste aggiuntive dei polmoni superiori e degli spazi pleurici.

Valutazione ecocardiografica mediante esame solo subxifoide per pazienti ipotesi

Qui presentiamo un protocollo per l'applicazione POCUS al letto dei pazienti nella gestione ARDS all'interno della terapia intensiva. Descrive tecniche standardizzate per valutazioni polmonari, cardiache, diaframmatiche, venose e gastriche per guidare la ventilazione, prevedere lo svezzamento e prevenire complicazioni.

L'applicazione dell'ecografia al punto di cura (POCUS) nella gestione della Sindrome da Difficoltà Respiratoria Acuta (ARDS) nell'Unità di Terapia Intensiva

Scopri l'imaging dei segnali Ca²⁺ in piccole vene polmonari a pressioni intraluminali fisiologiche. Questo metodo con Fluo-4 AM e microscopia confocale avanza la comprensione della regolazione vascolare.

Imaging dei segnali Ca²⁺ in piccole vene polmonari a pressioni intraluminali fisiologiche

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