Un metodo efficiente per l'estrazione degli epiteli umani delle tube di Falloppio per l'analisi di singole cellule

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07:03 min.

28 marzo 2025

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28 marzo 2025

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Lauryn Ruegg¹^,² , Laura B. James-Allan¹^,² , Gabriella DiBernardo¹^,² , Christopher Ochoa¹^,²^,³ , Yan-Ruide Li⁴^,⁵ , Lili Yang²^,³^,⁴^,⁵^,⁶^,⁷ , Sanaz Memarzadeh¹^,²^,³^,⁷^,⁸^,⁹

¹Department of Obstetrics and Gynecology, David Geffen School of Medicine, University of California, Los Angeles, ²Eli and Edythe Broad Center of Regenerative Medicine and Stem Cell Research, University of California, Los Angeles, ³Molecular Biology Institute, University of California, Los Angeles, ⁴Department of Bioengineering, University of California, Los Angeles, ⁵Department of Microbiology, Immunology and Molecular Genetics, University of California, Los Angeles, ⁶Parker Institute for Cancer Immunotherapy, University of California, Los Angeles, ⁷The Jonsson Comprehensive Cancer Center, University of California Los Angeles, ⁸The VA Greater Los Angeles Healthcare System, ⁹Department of Medical and Molecular Pharmacology, David Geffen School of Medicine, University of California, Los Angeles

Questo protocollo descrive un metodo di un giorno per l'isolamento delle cellule epiteliali delle tube di Falloppio umane. Le cellule epiteliali isolate possono essere piastrate in coltura bidimensionale (2D) o dissociate in sospensioni di singole cellule e utilizzate in esperimenti a valle, tra cui la citometria a flusso e il sequenziamento dell'RNA a singola cellula.

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Isolamento di cellule epiteliali

sospensione di singole cellule

sequenziamento dell'RNA a singola cellula

citometria a flusso

digestione meccanica

digestione enzimatica

cellule EpCAM positive

contaminazione da cellule stromali

Chapters in this video

0:00

Introduction

1:11

Fallopian Tube Collection and Preparation for Epithelial Cell Isolation

2:06

Epithelial Cell Isolation and Dissociation

4:18

Digestion of Isolated Epithelial Cells to Obtain a Single-Cell Suspension

6:02

Representative Results