Valutazione delle proprietà antiossidanti e antielmintiche degli estratti di Tithonia diversifolia contro le uova di nematodi gastrointestinali mediante saggi in vitro

La mia ricerca si concentra sulla parassitologia, studiando attualmente componenti naturali delle piante per controllare i parassiti interni nei piccoli ruminanti. Vogliamo integrare la conoscenza tradizionale e metodi alternativi per controllare la popolazione mondiale di piccoli ruminanti. Oggi utilizziamo sempre più tecnologie come la modellazione predittiva, i contatori automatici e strumenti molecolari per rilevare avvisi specifici.

Inoltre, diversi istituti in tutto il mondo stanno sviluppando prototipi di vaccini contro le contorsioni di Haemonchus. Questo è un grande passo avanti. Altri utilizzano motori organici per ridurre la dipendenza dagli animali da laboratorio, che è eticamente e scientificamente preziosa.

Nel complesso, esiste un forte e coordinato sforzo globale per far progredire gli strumenti diagnostici e la ricerca, con l'obiettivo di sviluppare strategie innovative e sostenibili per il controllo dei parassiti a livello mondiale e prevenire la resistenza ai farmaci. Per cominciare, mescolare 30 grammi di ogni campione fecale con 50 millilitri di soluzione satura di sale con una densità di 1,2 grammi per millilitro per prepararsi ai test cotrologici. Omogeneizzare tre grammi di campione fecale in 50 millilitri di soluzione satura di cloruro di sodio e filtrare la miscela attraverso una garza.

Esamina il vetrino al microscopio a un ingrandimento 10x e conta le uova di tipo strongilo. Calcola le uova per grammo utilizzando la formula fornita. Filtra le feci due volte con una garza sterile.

Poi, filtra la sospensione risultante e trasferiscila in un setaccio. Lavare il materiale trattenuto sul setaccio con acqua distillata e raccogliere la sospensione lavata in tubi da 15 millilitri. Posizionare i campioni in una centrifuga da tavolo con un rotore oscillante a secchio e girare a circa 4.800 G per cinque minuti a temperatura ambiente.

Sospezione nuovamente le uova e il PBS, e regola la concentrazione delle uova a 100 uova per millilitro per la preparazione del saggio. Prepara il controllo positivo sciogliendo il Fenbendazolo in PBS per ottenere una soluzione di 1.000 microgrammi per millilitro. Dopo aver aggiunto la miscela uno a uno di estratto e sospensione d'uova, aggiungi circa 100 uova per millilitro in ciascun pozzo di una piastra da 48 pozzi.

La principale sfida di questa tecnica risiede nella variabilità della risposta alla schiusa delle uova. Anche seguendo tutti i passaggi del protocollo, la schiusa delle uova può avvenire tra 48 e 72 ore, o in alcuni casi per niente. L'effetto inibitorio dell'estratto di Tithonia diversifolia sulla schiusa delle uova ha mostrato un modello dipendente dalla dose riflesso nel valore EC50 di 521,6 microgrammi per millilitro.

Questo risultato indica che sono necessarie concentrazioni moderate dell'estratto grezzo per raggiungere il 50% di inibizione, suggerendo la presenza di composti bioattivi con potenziale antihelmintico. A dosi basse di 150-300 microgrammi per millilitro, l'inibizione era minima e la variabilità rimaneva bassa, compatibile con un'esposizione insufficiente per interferire con l'embriogenesi o l'emergenza larvale. La variabilità ha raggiunto il picco alla dose intermedia di 1.200 microgrammi per millilitro, coerente con la zona di transizione non lineare di una curva di risposta alla dose, dove piccole differenze biologiche o sperimentali possono causare grandi spostamenti di esito.

Questo è previsto per estratti vegetali greggiori contenenti molteplici composti attivi. Nel complesso, i risultati confermano l'attività anti-schiusa di Tithonia diversifolia con un'efficacia crescente a dosi più elevate. La raffinazione o frazionamento dell'estratto può aumentare la potenza, e sono raccomandati ulteriori studi fitochimici e in vivo per valutarne l'utilità nei programmi di controllo dei parassiti.

I nostri risultati mostrano attività in vitro, confermando il potenziale antiparassitario. Questi rappresentano una scoperta significativa e la potenziale applicazione clinica per migliorare la salute animale. Inoltre, l'approccio a basso costo ed etico di questo saggio conferma l'uso delle conoscenze tradizionali per studi futuri.

Il risultato del nostro studio offre approfondimenti basati su evidenze sulle strategie anti-helmintiche, componenti ecologici validati per supportare strategie di controllo e ridurre la dipendenza da droghe.