Name: Grossificazione di globi non neoplastici, compresi gli occhi fetali (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-30T13:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 15 s
Description: Impara le tecniche standardizzate di grossificazione di globi oculari non neoplastici, inclusi gli occhi fetali, per ottenere sezioni istopatologiche di alta qualità. Questo metodo migliora la riproducibilità diagnostica.

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<li>Lu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+progress+in+optical+clearing+of+eye+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Recent progress in optical clearing of eye tissues.</a> Exp Eye Res. 212, 108796(2021).</li>
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</ol>

<table><tbody><tr><td>Righello a pinza</td><td>Mauser</td><td>fuori mercato</td><td>INOX Messchieber 0- 200 mm</td></tr><tr><td>Microscopio da dissezione o microscopio per chirurgia oftalmica scartato</td><td>M&ouml; ller Wedel</td><td>fuori mercato</td><td></td></tr><tr><td>Forcipe</td><td>Fine Scienza</td><td>11203-23</td><td>SS INOX</td></tr><tr><td>HistoBond</td><td>Marienfeld, Germania</td><td>DIN ISO 8037-1</td><td>guide rivestite</td></tr><tr><td>Tubo LED per la transilluminazione in una stanza buia</td><td>Schott, Magonza</td><td>fuori mercato</td><td>KL150</td></tr><tr><td>Lama per microtomo</td><td>Lame per microtomo Feather</td><td>N/A</td><td>Tipo A35</td></tr></tbody></table>

grossificazione di globi non neoplastici, compresi gli occhi fetali

Grossing of Non-neoplastic Globes, Including Fetal Eyes

Dopo l'orientamento, dovrebbe essere possibile determinare la lateralità per gli occhi degli adulti. Tuttavia, questo è spesso impossibile per gli occhi fetali. La lateralità è importante per confermare che l'occhio corretto è stato rimosso e che corrisponda al referto. Le misurazioni prima del sezionamento sono documentate. In particolare, per gli occhi fetali un nomogramma è utile per escludere anomalie delle dimensioni oculari come la microftalmia.
Sulla base dell'anamnesi del paziente e della transilluminazione, viene pianificata la sezionamento . Il globo è solitamente sezionato orizzontalmente, il che richiede una corretta identificazione del piano orizzontale come descritto sopra. Se ci sono aree specifiche di interesse (ad esempio, coloboma, lesioni insospettate identificate alla transilluminazione o siti chirurgici come la trabeculectomia), il sezionamento viene adattato rispettivamente. Il risultato finale del sezionamento è una sezione PO appropriata (Figura 5 e Figura 6).
Un globo sezionato in modo approssimativo compromette una precisa correlazione clinicopatologica e l'interpretazione dei risultati istologici, con un potenziale impatto sul follow-up del paziente. Ad esempio, una delle diagnosi più minacciose da considerare è l'oftalmia simpatica23 , un'infiammazione granulomatosa cronica bilaterale dell'uvea che potenzialmente porta alla cecità dell'occhio rimanente (occhio simpatizzante). Questa entità deve essere esclusa in ogni globo e, in particolare, negli occhi ciechi e doloranti. Poiché questo è fondamentale per preservare l'occhio rimasto, le sezioni rappresentative del globo sono obbligatorie per la valutazione, preferibilmente come sezioni PO.
Nel caso in cui venga erroneamente effettuato un taglio attraverso l'intera cornea invece di sezionare la periferia, inviare la calotta con la cornea e il segmento anteriore e la sezione PO fallita. La seconda calotta deve essere rimossa come descritto sopra per inserire il globo nella cassetta. In particolare, gli occhi tisi possono mostrare metaplasia ossea dell'epitelio pigmentato retinico, rendendo quasi impossibile sezionare il globo. Decalcificare il globo in acido nitrico al 5% per 24 ore seguito da una soluzione di litio o solfato di sodio al 5% per 24 ore, conservare in acqua di rubinetto per 24-48 ore e riprovare a tagliare il globo. Ripetere la decalcificazione fino a quando il globo non può essere sezionato. Infine, dovrebbe essere eseguita la documentazione fotografica di ogni globo. Questo non è solo per motivi forensi, ma anche utile se si verificano risultati istologici inaspettati.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67944/67944fig01.jpg"> 
Figura 1: Diagramma di flusso per la preparazione, l'orientamento e il sezionamento di occhi non tumorali che elenca le fasi rilevanti in un approccio simile a una lista di controllo. Abbreviazione: LED = diodo a emissione luminosa. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67944/67944fig01large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67944/67944fig02.jpg"> 
Figura 2: Orientamento. La cornea è chiaramente visibile da una vista anteriore. (A) Le inserzioni dei quattro muscoli retti sono evidenziate da punte di freccia. (B) Il nervo ottico (asterisco) è visibile da una vista posteriore. La lunga arteria ciliare (freccia) segna il meridiano orizzontale. L'inserzione tipicamente carnosa del muscolo obliquo inferiore (punta di freccia) è approssimativamente temporale. Due delle vene del vortice sono evidenziate da frecce sottili. (C) L'inserzione tendinea del muscolo obliquo superiore (punta di freccia) è superiormente tra il muscolo retto superiore e il nervo ottico. Una vena a vortice è contrassegnata da una freccia sottile. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67944/67944fig02large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67944/67944fig03.jpg"> 
Figura 3: Grossolani. (A) Misura del diametro orizzontale e verticale in mm (linea tratteggiata). Misurazione del diametro corneale e, ad esempio, del diametro della cheratoplastica. (B) Misurare il diametro antero-posteriore in mm (linea rossa) e la lunghezza del nervo ottico (linea verde). Il nervo ottico viene sezionato trasversalmente (linea tratteggiata) e inviato separatamente per un'ulteriore elaborazione. (C) Transilluminazione regolare di un globo mediante una luce LED. (D) Durante la transilluminazione, si vede un'ombra causata da un tumore coroideale (freccia). Abbreviazione: LED = diodo a emissione luminosa. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67944/67944fig03large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67944/67944fig04.jpg"> 
Figura 4: Materiale estraneo extraoculare . (A) Globo con una banda/cerchiaggio che lo circonda (freccia; il nervo ottico è contrassegnato da un asterisco). (B) Dopo la dissezione orizzontale, la fascia di accerchiamento è ancora attaccata al globo (frecce). (C) Applicazioni multiple di materiale estraneo esterno per la chirurgia storica del distacco di retina costituito da placche (asterisco) e diverse fibbie sclerali (freccia). (D) La sezione corrispondente Ematossilina ed Eosina mostra la posizione intrasclerale di una fibbia (freccia) e l'immagine negativa di una placca extrasclerale (asterisco). La cornea è contrassegnata in C e D da una freccia sottile e il nervo ottico da una punta di freccia in D. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67944/67944fig04large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67944/67944fig05.jpg"> 
Figura 5: Sezionamento. (A) Il globo è posizionato con la cornea verso il basso (stesso occhio della Figura 2) e (B) sono contrassegnati i piani di sezione superiore (rosso) e inferiore (blu). (C) Il piano di sezione passa idealmente attraverso l'area periferica della cornea/limbare. (D) Dopo la rimozione della calotta superiore, si può osservare un distacco di retina a forma di imbuto. La sezione è solo vicina alla cornea periferica (freccia) ma anche questo è sufficiente per l'analisi. (E) La rimozione della calotta inferiore (notare la cornea periferica sulla sezione, freccia) produce la sezione del nervo ottico pupillare prevista. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67944/67944fig05large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67944/67944fig06.jpg"> 
Figura 6: Sezioni PO e calotte. (A) Sezione PO, (B) calotta superiore e (C) inferiore. La pars plicata del corpo ciliare è evidenziata dalle frecce in B e C. Le calotte prive di dettagli clinicamente rilevanti non devono essere ulteriormente elaborate e vengono invece archiviate. Abbreviazione: PO = nervo pupilla-ottico. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67944/67944fig06large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67944/67944fig07.jpg"> 
Figura 7: Occhi fetali e microftalmici. (A) Occhio fetale regolare, 21 settimane di gestazione e 10 mm di diametro AP. (B) Spingendo delicatamente con una pinza si scopre la lunga arteria ciliare posteriore (punte di freccia), che indica il meridiano orizzontale. (C) Dopo la bisezione, le strutture intraoculari possono essere ispezionate, compresa l'arteria ialoide (freccia). (D) Occhio microftalmico da adulto. La cornea è evidenziata da una freccia. (E) I globi erano divisi in due; Non è stato possibile identificare l'arteria ciliare posteriore lunga. Abbreviazione: AP = anteroposteriore. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67944/67944fig07large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67944/67944fig08.jpg"> 
Figura 8: Incisione coronale. Un'incisione coronale è utile se si intende eseguire l'imaging post mortem del fondo oculare. Durante la transilluminazione, la pars plana del corpo ciliare può essere identificata come una struttura circolare a bande. (A) Utilizzando un bisturi, viene praticata un'incisione circolare nell'area della pars plana (linea tratteggiata) e il segmento anteriore viene rimosso. (B) La retina e il nervo ottico possono essere documentati e visualizzati. (C) Il segmento anteriore viene quindi esaminato separatamente. (D) Sezione orizzontale con segmento anteriore rimosso. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67944/67944fig08large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
Figura supplementare S1: Unità microscopio da dissezione. Unità di lavoro con microscopio per chirurgia oftalmica dismesso. (A) Un tubo LED (freccia) e l'attrezzatura necessaria per la grossografia e il sezionamento. I materiali necessari sono (B) righello, righello a pinza, pinze e (C) microtomi/lame di rasoio. Per il sezionamento di globi adulti, si consigliano lame per microtomo (a destra); Per gli occhi fetali o altri campioni oculari, le lame di rasoio (a sinistra) sono sufficienti. (D) Microscopio da dissezione con una telecamera collegata per documentare il campione. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67944/suppl%20figure.jpg" target="_blank">Clicca qui per scaricare questo file.</a>

Grossificazione di globi non neoplastici, compresi gli occhi fetali

Grossing and sectioning of fetal and adult globes are critical steps in the histopathologic evaluation of ocular diseases. Proper handling of the globe is ...

La mia ricerca si concentra sulla patologia oftalmica, che comprende le correlazioni clinico-patologiche e la ricerca di base sul melanoma uveale. Finora, ho descritto diverse correlazioni cliniche patologiche, ad esempio sull'atrofia del nervo ottico di Schnabel, nonché i risultati post-chirurgici dopo il crosslinking corneale e gli impianti sottoretinici. L'ispezione macroscopica e il sezionamento di un globo è piuttosto impegnativo. I nostri protocolli dovrebbero aiutare i patologi a identificare le strutture oculari critiche e a sezionare correttamente un globo senza tumore.[Istruttore] Per iniziare, raccogli tutti gli elementi necessari per la procedura. Innanzitutto, identificare i quattro muscoli retti nel campione del globo oculare. E poi identificare il muscolo obliquo superiore dal suo aspetto di tenerezza mentre si inserisce nella sclera sulla superficie posterotemporale del globo. Successivamente, identificare il muscolo obliquo inferiore, che si inserisce temporalmente inferiormente nella sclera tra il muscolo retto laterale e il nervo ottico. Dopo aver identificato l'arteria ciliare posteriore lunga, determinare con precisione la lateralità del globo in base ai muscoli obliqui superiori e obliqui inferiori e all'arteria ciliare posteriore lunga. Utilizzando un calibro, misurare i diametri anteriore, posteriore, orizzontale e verticale del globo in millimetri. Esaminare e descrivere eventuali anomalie sulla superficie esterna del globo, comprese cicatrici, suture, materiali estranei o deformazioni. Successivamente, misura la cornea nei suoi diametri orizzontale e verticale in millimetri. Descrivere le caratteristiche corneali, tra cui trasparenza, presenza di cicatrici, segni di cheratoplastica, suture o vascolarizzazione. In questo globo è presente uno stafiloma anteriore superiormente. Misurare la lunghezza del nervo ottico e annotare eventuali anomalie, come emorragie nelle guaine. Se possibile, fai una sezione trasversale attraverso il nervo ottico e inviala separatamente per l'esame istologico. Ora, transillumina il globo utilizzando un tubo LED per evidenziare i difetti dell'iride e, in questo caso specifico, lo stafiloma anteriore. In questo caso, c'è un'ombreggiatura nasale. Eseguire la documentazione fotografica dell'intero globo. Usando una penna, segnare il meridiano verticale o il piano di sezione desiderato in modo che la sezione passi vicino al nervo ottico e alla cornea periferica. Utilizzando una lama microtone, sezionare il globo lungo la linea segnata fissandolo con l'altra mano. Rimuovere il culot e ispezionare per eventuali anomalie. Conservato in formalina o sottoposto per l'elaborazione istologica. Ora, ispeziona le strutture oculari interne, tra cui la camera anteriore, lo stato del cristallino, l'iride, il corpo ciliare, la coroide, la retina e il nervo ottico. La sclera viene osservata per anomalie, come l'ispessimento o l'atrofia. In quest'area, la sclera è assottigliata in corrispondenza dello stafiloma anteriore. Non c'è una lente e la parte posteriore dell'iride può essere vista direttamente. Il corpo ciliare ha una membrana ciclica. La retina è tipicamente staccata dopo l'enucleazione. Il nervo ottico atrofico può essere visualizzato insieme alla macula. E c'è un'area pigmentata nella coroide. Tenere il globo ora aperto e sezionarlo parallelamente ma sopra il nervo ottico. Ancora una volta, mirando attraverso la cornea periferica. Quindi rimuovere il culot e ispezionare eventuali anomalie residue. Conservare o inviare il campione per l'analisi istologica. Infine, eseguire la documentazione fotografica della sezione del nervo ottico pupillare e inviarla per un'ulteriore elaborazione. Sono state eseguite molteplici applicazioni di materiale estraneo esterno per la chirurgia storica del distacco di retina per un campione costituito da placche e diverse fibbie sclerali. La corrispondente sezione colorata con ematossilina ed eosina mostrava la posizione intrasclerale di un buccale, nonché l'immagine negativa di una placca extra sclerale. Il risultato target del sezionamento era una corretta sezione del nervo ottico pupale.

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