Name: Modello di iniezione minimamente invasivo di Cisterna Magna per studi di metastasi leptomeningee nei topi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-23T14:25:00.000+00:00
Duration: 7 min 14 s
Description: Scopri un metodo di iniezione minimamente invasivo nella cisterna magna per studiare le metastasi leptomeningee nei topi. Questo approccio riduce il trauma e il carico tumorale extracranico.

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<ol><li>Wilcox, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leptomeningeal+metastases+from+solid+tumors%3A+A+Society+for+Neuro-Oncology+and+American+Society+of+Clinical+Oncology+consensus+review+on+clinical+management+and+future+directions%5BTitle%5D)+AND+%22Neuro+Oncol%22%5BJournal%5D)">Leptomeningeal metastases from solid tumors: A Society for Neuro-Oncology and American Society of Clinical Oncology consensus review on clinical management and future directions.</a> Neuro Oncol. 26 (10), 1781-1804 (2024).</li>
<li>Wasserstrom, W. R., Glass, J. P., Posner, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnosis+and+treatment+of+leptomeningeal+metastases+from+solid+tumors%3A+experience+with+90+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer%22%5BJournal%5D)">Diagnosis and treatment of leptomeningeal metastases from solid tumors: experience with 90 patients.</a> Cancer. 49 (4), 759-772 (1982).</li>
<li>Remsik, J., Boire, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+path+to+leptomeningeal+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">The path to leptomeningeal metastasis.</a> Nat Rev Cancer. 24 (7), 448-460 (2024).</li>
<li>Kokkoris, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leptomeningeal+carcinomatosis.+How+does+cancer+reach+the+pia-arachnoid%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer%22%5BJournal%5D)">Leptomeningeal carcinomatosis. How does cancer reach the pia-arachnoid.</a> Cancer. 51 (1), 154-160 (1983).</li>
<li>Remsik, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leptomeningeal+metastatic+cells+adopt+two+phenotypic+states%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Rep%22%5BJournal%5D)">Leptomeningeal metastatic cells adopt two phenotypic states.</a> Cancer Rep. 5 (4), e1236(2022).</li>
<li>Chi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+cells+deploy+lipocalin-2+to+collect+limiting+iron+in+leptomeningeal+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Cancer cells deploy lipocalin-2 to collect limiting iron in leptomeningeal metastasis.</a> Science. 369 (6501), 276-282 (2020).</li>
<li>Yin, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+molecular+graded+prognostic+assessment+%28molGPA%29+model+specific+for+estimating+survival+in+lung+cancer+patients+with+leptomeningeal+metastases%5BTitle%5D)+AND+%22Lung+Cancer%22%5BJournal%5D)">A molecular graded prognostic assessment (molGPA) model specific for estimating survival in lung cancer patients with leptomeningeal metastases.</a> Lung Cancer. 131, 134-138 (2019).</li>
<li>Li, Y. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leptomeningeal+Metastases+in+Patients+with+NSCLC+with+EGFR+Mutations%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thorac+Oncol%22%5BJournal%5D)">Leptomeningeal Metastases in Patients with NSCLC with EGFR Mutations.</a> J Thorac Oncol. 11 (11), 1962-1969 (2016).</li>
<li>Li, Y. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unique+genetic+profiles+from+cerebrospinal+fluid+cell-free+DNA+in+leptomeningeal+metastases+of+EGFR-mutant+non-small-cell+lung+cancer%3A+a+new+medium+of+liquid+biopsy%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Oncol%22%5BJournal%5D)">Unique genetic profiles from cerebrospinal fluid cell-free DNA in leptomeningeal metastases of EGFR-mutant non-small-cell lung cancer: a new medium of liquid biopsy.</a> Ann Oncol. 29 (4), 945-952 (2018).</li>
<li>Posner, J. B., Chernik, N. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intracranial+metastases+from+systemic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Neurol%22%5BJournal%5D)">Intracranial metastases from systemic cancer.</a> Adv Neurol. 19, 579-592 (1978).</li>
<li>Kuiper, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treatment+and+survival+of+patients+with+EGFR-mutated+non-small+cell+lung+cancer+and+leptomeningeal+metastasis%3A+A+retrospective+cohort+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Lung+Cancer%22%5BJournal%5D)">Treatment and survival of patients with EGFR-mutated non-small cell lung cancer and leptomeningeal metastasis: A retrospective cohort analysis.</a> Lung Cancer. 89 (3), 255-261 (2015).</li>
<li>Tsukada, Y., Fouad, A., Pickren, J. W., Lane, W. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Central+nervous+system+metastasis+from+breast+carcinoma.+Autopsy+study%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer%22%5BJournal%5D)">Central nervous system metastasis from breast carcinoma. Autopsy study.</a> Cancer. 52 (12), 2349-2354 (1983).</li>
<li>Singh, M., Bakhshinyan, D., Venugopal, C., Singh, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preclinical+Modeling+and+Therapeutic+Avenues+for+Cancer+Metastasis+to+the+Central+Nervous+System%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Oncol%22%5BJournal%5D)">Preclinical Modeling and Therapeutic Avenues for Cancer Metastasis to the Central Nervous System.</a> Front Oncol. 7, 220(2017).</li>
<li>Shi, M. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PROTAC+EZH2+degrader-1+overcomes+the+resistance+of+podophyllotoxin+derivatives+in+refractory+small+cell+lung+cancer+with+leptomeningeal+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Cancer%22%5BJournal%5D)">PROTAC EZH2 degrader-1 overcomes the resistance of podophyllotoxin derivatives in refractory small cell lung cancer with leptomeningeal metastasis.</a> BMC Cancer. 24 (1), 504(2024).</li>
<li>Choi, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+bioluminescence+imaging+for+leptomeningeal+dissemination+of+medulloblastoma+in+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Cancer%22%5BJournal%5D)">In vivo bioluminescence imaging for leptomeningeal dissemination of medulloblastoma in mouse models.</a> BMC Cancer. 16 (1), 723(2016).</li>
<li>Zhao, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dura+immunity+configures+leptomeningeal+metastasis+immunosuppression+for+cerebrospinal+fluid+barrier+invasion%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Cancer%22%5BJournal%5D)">Dura immunity configures leptomeningeal metastasis immunosuppression for cerebrospinal fluid barrier invasion.</a> Nat Cancer. 5 (12), 1940-1961 (2024).</li>
<li>Boire, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complement+Component+3+Adapts+the+Cerebrospinal+Fluid+for+Leptomeningeal+Metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Complement Component 3 Adapts the Cerebrospinal Fluid for Leptomeningeal Metastasis.</a> Cell. 168 (6), 1101-1113.e13 (2017).</li>
<li>Zhang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metastasis+Initiation+Is+Coupled+with+Bone+Remodeling+through+Osteogenic+Differentiation+of+NG2%2B+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Discov%22%5BJournal%5D)">Metastasis Initiation Is Coupled with Bone Remodeling through Osteogenic Differentiation of NG2+ Cells.</a> Cancer Discov. 13 (2), 474-495 (2023).</li>
<li>Louis, K. S., Siegel, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+viability+analysis+using+trypan+blue%3A+manual+and+automated+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Cell viability analysis using trypan blue: manual and automated methods.</a> Methods Mol Biol. 740, 7-12 (2011).</li>
<li>Green, T. R. F., Ortiz, J. B., Harrison, J. L., Lifshitz, J., Rowe, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+Cryosectioning+of+Multiple+Rodent+Brains%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Simultaneous Cryosectioning of Multiple Rodent Brains.</a> J Vis Exp. (139), e58513(2018).</li>
<li>Feldman, A. T., Wolfe, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+Processing+and+Hematoxylin+and+Eosin+Staining%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Tissue Processing and Hematoxylin and Eosin Staining.</a> Methods Mol Biol. 1180, 31-43 (2014).</li>
<li>Shih, A. Y., Mateo, C., Drew, P. J., Tsai, P. S., Kleinfeld, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+polished+and+reinforced+thinned-skull+window+for+long-term+imaging+of+the+mouse+brain%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">A polished and reinforced thinned-skull window for long-term imaging of the mouse brain.</a> J Vis Exp. (61), e3742(2012).</li>
<li>Shih, A. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two-photon+microscopy+as+a+tool+to+study+blood+flow+and+neurovascular+coupling+in+the+rodent+brain%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Two-photon microscopy as a tool to study blood flow and neurovascular coupling in the rodent brain.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 32 (7), 1277-1309 (2012).</li>
<li>Drew, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+optical+access+through+a+polished+and+reinforced+thinned+skull%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Chronic optical access through a polished and reinforced thinned skull.</a> Nat Methods. 7 (12), 981-984 (2010).</li>
<li>Wilcox, J. A., Li, M. J., Boire, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leptomeningeal+Metastases%3A+New+Opportunities+in+the+Modern+Era%5BTitle%5D)+AND+%22Neurotherapeutics%22%5BJournal%5D)">Leptomeningeal Metastases: New Opportunities in the Modern Era.</a> Neurotherapeutics. 19 (6), 1782-1798 (2022).</li>
<li>Zhang, C., Lowery, F. J., Yu, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intracarotid+Cancer+Cell+Injection+to+Produce+Mouse+Models+of+Brain+Metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Intracarotid Cancer Cell Injection to Produce Mouse Models of Brain Metastasis.</a> J Vis Exp. (120), e55085(2017).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Provette Eppendorf da 1,5 ml</td><td>Biosharp</td><td>BS-15-M-S</td><td></td></tr><tr><td>Provetta da centrifuga da 15 ml</td><td>LABSELECT</td><td>CT-002-15A</td><td></td></tr><tr><td>Siringa da insulina da 31 g x 8 mm (0,3 ml)</td><td>Promesso</td><td>/</td><td></td></tr><tr><td>Trapano abrasivo</td><td>GLOBALEBIO</td><td>GEGZ-AM1</td><td></td></tr><tr><td>Tappetino termico per animali</td><td>woggee</td><td>/</td><td></td></tr><tr><td>Criomold</td><td>Supin</td><td>SP-AB-7 x 7 x 5</td><td></td></tr><tr><td>Creme depilatorie</td><td>Nair</td><td>1.00023E+11</td><td></td></tr><tr><td>D-luciferina</td><td>Biologia dell'oro</td><td>FORTUNA-1G</td><td></td></tr><tr><td>DMEM</td><td>Gibco</td><td>C11995500CP</td><td></td></tr><tr><td>FBS</td><td>Gibco</td><td>10270-106</td><td></td></tr><tr><td>Spettro IVIS</td><td>Calibratore</td><td>/</td><td></td></tr><tr><td>Ketamina</td><td>Jiangsu Hengrui Pharmaceuticals Co., Ltd.</td><td>H20193336</td><td></td></tr><tr><td>Temperatura di taglio ottimale</td><td>Sakura</td><td>4583-1</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldeide</td><td>SCR</td><td>80096618</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>Servicebio</td><td>G4202-500ML</td><td></td></tr><tr><td>Pen/Streptococco Amfotericina B</td><td>Gibco</td><td>15140122</td><td></td></tr><tr><td>Rasoio</td><td>Hipidog</td><td>2103CGMJ3373-GQ22N526</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio a stereofluorescenza</td><td>Olimpo</td><td>/</td><td></td></tr><tr><td>Pinze dritte</td><td>Beyotime</td><td>FS019</td><td>Necessità di autoclavaggio</td></tr><tr><td>Forbici chirurgiche</td><td>Beyotime</td><td>FS001</td><td>Necessità di autoclavaggio</td></tr><tr><td>Testa di fissaggio del mouse triangolare</td><td>Transcend vivoscope</td><td>TVS-FDM-027</td><td></td></tr><tr><td>TRITC-destrano, MW 70000</td><td>MedChemExpress</td><td>HY-158082C</td><td></td></tr><tr><td>Soluzione di tripsina/EDTA</td><td>Gibco</td><td>25200056</td><td></td></tr><tr><td>Microscopia a scansione laser a due fotoni</td><td>Olimpo</td><td>/</td><td></td></tr><tr><td>Adesivi tissutali Vetbond</td><td>3M</td><td>Codice: 1469SB</td><td></td></tr><tr><td>Xilazina</td><td>Sigma</td><td>Visualizzazione X1126</td><td></td></tr></tbody></table>

modello di iniezione minimamente invasivo di cisterna magna per studi di metastasi leptomeningee nei topi

Minimally Invasive Cisterna Magna Injection Model for Leptomeningeal Metastasis Studies in Mice

La Figura 1 illustra il posizionamento del topo per l'iniezione e il sito di puntura dalle viste laterali e frontali. La Figura 2 mostra immagini rappresentative di bioluminescenza in vivo di animali testati per la generazione di LM attraverso diversi approcci. Le cellule LLC1 marcate con GFP-luciferasi sono state iniettate negli animali attraverso diverse vie, seguite da imaging bioluminescente. Come mostrato nella <strong class="xfig...

Modello di iniezione minimamente invasivo di Cisterna Magna per studi di metastasi leptomeningee nei topi

Leptomeningeal metastasis (LM), the spread of cancer cells into the cerebrospinal fluid (CSF)-filled leptomeninges, is a rare yet devastating complication ...

Metastasi leptomeningee, è una forma molto grave e fatale di malattia metastatica. Il suo ambiente dipende probabilmente dall'interazione tra le cellule tumorali e il microambiente tissutale unico. Per i modelli animali, è molto importante studiare il meccanismo sottostante.Per studiare le metastasi leptomeningee in vivo, i ricercatori usano comunemente tecniche come l'arteria intra-cardiaca, intra-carotide o l'iniezione diretta di cellule tumorali nella cisterna magna o nei ventricoli cerebrali. Questi approcci aiutano a generare modelli murini affidabili per la ricerca LM. I tentativi attuali hanno notevoli limitazioni. Ad esempio, le iniezioni intracardiache spesso producono tumori al di fuori dello spazio leptomeningeo e possono portare a decessi non correlati alla LM. Mentre gli approcci carotidee sono altamente invasivi e richiedono molto tempo. Questo protocollo è in grado di generare rapidamente modelli LM. Bypassa la barriera emato-encefalica, rilascia con precisione le cellule tumorali nello spazio leptomeningeo e riduce sia i traumi chirurgici che il tempo prezioso.[Istruttore] Per iniziare, prendi 1 milione di cellule di carcinoma polmonare di Lewis o LLC1 in DMEM, inte

minimally-invasive-cisterna-magna-injection-model-for-leptomeningeal

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JoVE Journal

Cancer Research

Ricerca sul cancro

Fonte: Joshi, K., et al. Approccio chirurgico stereotassico per microiniettare il tronco encefalico caudale e il midollo spinale cervicale superiore attraverso la cisterna magna nei topi. J. Vis. Exp. (2022)Questo video mostra l'approccio stereotassico della cisterna magna per la somministrazione mirata al tronco encefalico e al midollo spinale superiore. Accedendo alla cisterna magna piena di liquido cerebrospinale, questo approccio consente iniezioni precise in aree difficili da raggiungere...

Approccio stereotassico della Cisterna Magna per la somministrazione terapeutica in un modello murino

Fonte: Zamboni, M., et al., Induzione della modifica delle cellule leptomeningee tramite iniezione intracisternale. J. Vis. Exp. (2020)Questo video mostra la procedura di somministrazione di un farmaco induttore nella cisterna magna di un topo anestetizzato. L'iniezione induce selettivamente l'espressione di marcatori fluorescenti nelle cellule della superficie cerebrale accessibili tramite il liquido cerebrospinale, confermata dall'imaging a fluorescenza.

Somministrazione mirata di farmaci in un modello murino tramite iniezione di Cisterna Magna

In questo video, descriviamo la procedura per rilasciare cellule tumorali di derivazione umana nella cisterna magna del cervello di un topo. Il modello murino ortotopico può essere utilizzato per studiare la diffusione metastatica del cancro alle meningi craniche.

Iniezione chirurgica di Cisterna Magna: un metodo per la somministrazione di cellule tumorali direttamente nel sistema nervoso centrale del modello murino

Qui descriviamo un protocollo per eseguire cisterna magna inserimento di una canula (CMc), un modo minimamente invasivo per offrire elementi traccianti, substrati e molecole di segnalazione nel liquido cerebrospinale (CSF). In combinazione con differenti modalità di imaging, CMc permette glifatico sistema e valutazione dinamica di CSF, come pure la consegna di tutto il cervello di vari composti.

Impianto di cannula in Cisterna Magna di roditori

Descriviamo un'iniezione intracisternache che impiega un ago piegato sulla punta che può essere stabilizzato al cranio, eliminando così il rischio di danni al parenchyma sottostante. L'approccio può essere utilizzato per la mappatura genetica del destino e manipolazioni delle cellule leptomeningeee e per il monitoraggio del movimento del fluido cerebrospinale.

Induzione di cellule leptomeningeali Modifica tramite iniezione intracisternale

La modellazione della metastasi cerebrale intracraniciale è complicata dall'incapacità di monitorare le dimensioni del tumore e la risposta al trattamento con metodi precisi e tempestivi. La metodologia presentata accoppia l'iniezione di tumore intracranico con l'analisi della risonanza magnetica, che se combinata, coltiva iniezioni precise e coerenti, un monitoraggio degli animali migliorato e misurazioni accurate del volume tumorale.

Modellazione delle metastasi cerebrali attraverso l'iniezione intracraniciale e la risonanza magnetica

Qui, descriviamo un modello di xenotrapianto murino che assomiglia funzionalmente a un serbatoio di Ommaya nei pazienti. Abbiamo sviluppato il Murine Ommaya per studiare nuove terapie per la malattia leptomeningea universalmente fatale.

Un modello murino di ommaya xenotrapianto per studiare la terapia mirata diretta della malattia leptomeningea

Descriviamo un modello murino di xenotrapianto di metastasi cerebrali di cancro al seno generate tramite iniezione di vena della coda di una linea cellulare di carcinoma mammario infiammatorio amplificata endogenamente da HER2.

Modellazione delle metastasi cerebrali tramite iniezione di vena della coda di cellule infiammatorie del cancro al seno

Il presente protocollo descrive lo sviluppo di un modello murino riproducibile di glioma del midollo spinale mediante l'iniezione di cellule tumorali nello spazio intervertebrale, offrendo un approccio più efficace e meno invasivo per la ricerca e lo sviluppo terapeutico.

Trapianto chirurgico di cellule tumorali nel midollo spinale di topi

Qui viene presentato un protocollo per valutare i vasi linfatici meningei (MLV) dei muri, che svolgono un ruolo importante in molteplici malattie neurologiche. L'obiettivo di questo protocollo è fornire un metodo integrato che consenta sia la valutazione funzionale del drenaggio dei tracce sia la caratterizzazione morfologica dettagliata della rete di MLV dorsali.

Protocollo integrato per la valutazione dei linfatici meningei: iniezione di cisterna magna, imaging dei linfonodi, dissezione meningea e colorazione dell'intero montaggio

Scopri un metodo di iniezione minimamente invasivo nella cisterna magna per studiare le metastasi leptomeningee nei topi. Questo approccio riduce il trauma e il carico tumorale extracranico.

Modello di iniezione minimamente invasivo di Cisterna Magna per studi di metastasi leptomeningee nei topi

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