Name: In vivo Applicazione delletichettatura di prossimità basata su TurboID in Drosophila melanogaster (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-13T13:15:00.000+00:00
Duration: 9 min 59 s
Description: Scopri l'etichettatura di prossimità con TurboID per mappare le interazioni proteiche di zucchini nelle cellule germinali di Drosophila melanogaster. Questo metodo identifica interattori noti e nuovi coinvolti nel ripiegamento proteico e nel traffico cellulare.

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<ol><li>Kim, D. I., Roux, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Filling+the+void%3A+Proximity-based+labeling+of+proteins+in+living+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Trend+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Filling the void: Proximity-based labeling of proteins in living cells.</a> Trend Cell Biol. 26 (11), 804-817 (2016).</li>
<li>Mair, A., Xu, S. L., Branon, T. C., Ting, A. Y., Bergmann, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proximity+labeling+of+protein+complexes+and+cell-type-specific+organellar+proteomes+in+Arabidopsis+enabled+by+turboid%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Proximity labeling of protein complexes and cell-type-specific organellar proteomes in Arabidopsis enabled by turboid.</a> eLife. 8, e47864(2019).</li>
<li>Qi, Y., Katagiri, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Purification+of+low-abundance+Arabidopsis+plasma-membrane+protein+complexes+and+identification+of+candidate+components%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+J%22%5BJournal%5D)">Purification of low-abundance Arabidopsis plasma-membrane protein complexes and identification of candidate components.</a> Plant J. 57 (5), 932-944 (2009).</li>
<li>Branon, T. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+proximity+labeling+in+living+cells+and+organisms+with+turboid%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Efficient proximity labeling in living cells and organisms with turboid.</a> Nat Biotechnol. 36 (9), 880-887 (2018).</li>
<li>Rhee, H. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proteomic+mapping+of+mitochondria+in+living+cells+via+spatially+restricted+enzymatic+tagging%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Proteomic mapping of mitochondria in living cells via spatially restricted enzymatic tagging.</a> Science. 339 (6125), 1328-1331 (2013).</li>
<li>Roux, K. J., Kim, D. I., Raida, M., Burke, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+promiscuous+biotin+ligase+fusion+protein+identifies+proximal+and+interacting+proteins+in+mammalian+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">A promiscuous biotin ligase fusion protein identifies proximal and interacting proteins in mammalian cells.</a> J Cell Biol. 196 (6), 801-810 (2012).</li>
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 <a target="_blank" href="https://case.edu/medicine/nutrition/centers-and-collaborations/case-center-proteomics-and-bioinformatics/proteomics-and-small-molecule-mass-spectrometry-core/quantitative-proteomics">https://case.edu/medicine/nutrition/centers-and-collaborations/case-center-proteomics-and-bioinformatics/proteomics-and-small-molecule-mass-spectrometry-core/quantitative-proteomics</a> (2025).</li>
<li>Udeshi, N. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antibodies+to+biotin+enable+large-scale+detection+of+biotinylation+sites+on+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Meth%22%5BJournal%5D)">Antibodies to biotin enable large-scale detection of biotinylation sites on proteins.</a> Nat Meth. 14 (12), 1167-1170 (2017).</li>
<li>Ummethum, H., Hamperl, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proximity+labeling+techniques+to+study+chromatin%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Genet%22%5BJournal%5D)">Proximity labeling techniques to study chromatin.</a> Front Genet. 11, 450(2020).</li>
<li>Han, S., Li, J., Ting, A. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proximity+labeling%3A+Spatially+resolved+proteomic+mapping+for+neurobiology%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Proximity labeling: Spatially resolved proteomic mapping for neurobiology.</a> Curr Opin Neurobiol. 50, 17-23 (2018).</li>
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<li>Zamudio, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DNA+methylation+restrains+transposons+from+adopting+a+chromatin+signature+permissive+for+meiotic+recombination%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Dev%22%5BJournal%5D)">DNA methylation restrains transposons from adopting a chromatin signature permissive for meiotic recombination.</a> Genes Dev. 29 (12), 1256-1270 (2015).</li>
<li>Cha, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Therapeutic+modulation+of+gsto+activity+rescues+fus-associated+neurotoxicity+via+deglutathionylation+in+als+disease+models%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Cell%22%5BJournal%5D)">Therapeutic modulation of gsto activity rescues fus-associated neurotoxicity via deglutathionylation in als disease models.</a> Dev Cell. 57 (6), 783-798.e8 (2022).</li>
<li>Pulver, S. R., Berni, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+fundamentals+of+flying%3A+Simple+and+inexpensive+strategies+for+employing+Drosophila+genetics+in+neuroscience+teaching+laboratories%5BTitle%5D)+AND+%22J+Undergrad+Neurosci+Educ%22%5BJournal%5D)">The fundamentals of flying: Simple and inexpensive strategies for employing Drosophila genetics in neuroscience teaching laboratories.</a> J Undergrad Neurosci Educ. 11 (1), A139-A148 (2012).</li>
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<li>Zhang, B., Zhang, Y., Liu, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Highly+effective+proximate+labeling+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22G3%22%5BJournal%5D)">Highly effective proximate labeling in Drosophila.</a> G3. 11 (5), jkab077(2021).</li>
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<li>Waring, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphogenesis+of+the+eggshells+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Int+Rev+Cytol%22%5BJournal%5D)">Morphogenesis of the eggshells in Drosophila.</a> Int Rev Cytol. 198, 67-108 (2000).</li>
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<li>Zada, A., Khan, I., Zhang, M., Cheng, Y., Hu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Airid-based+proximity+labeling+for+protein-protein+interaction+in+plants%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Airid-based proximity labeling for protein-protein interaction in plants.</a> J Vis Exp. (187), e64428(2022).</li>
<li>Fang, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lowering+sample+requirements+to+study+tyrosine+kinase+signaling+using+phosphoproteomics+with+the+tmt+calibrator+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Proteomics%22%5BJournal%5D)">Lowering sample requirements to study tyrosine kinase signaling using phosphoproteomics with the tmt calibrator approach.</a> Proteomics. 20 (24), 2000116(2020).</li>
<li>Park, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((One-stage+tip+method+for+tmt-based+proteomic+analysis+of+a+minimal+amount+of+cells%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Omega%22%5BJournal%5D)">One-stage tip method for tmt-based proteomic analysis of a minimal amount of cells.</a> ACS Omega. 8 (22), 19741-19751 (2023).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Turboid-based+proximity+labeling+for+in+planta+identification+of+protein-protein+interaction+networks%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Turboid-based proximity labeling for in planta identification of protein-protein interaction networks.</a> J Vis Exp. (159), e60728(2020).</li>
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<li>Bosch, J. A., Chen, C. L., Perrimon, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proximity-dependent+labeling+methods+for+proteomic+profiling+in+living+cells%3A+An+update%5BTitle%5D)+AND+%22WIREs+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Proximity-dependent labeling methods for proteomic profiling in living cells: An update.</a> WIREs Dev Biol. 10 (1), e392(2021).</li>
<li>Rayaprolu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+type-specific+biotin+labeling+in+vivo+resolves+regional+neuronal+and+astrocyte+proteomic+differences+in+mouse+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Cell type-specific biotin labeling in vivo resolves regional neuronal and astrocyte proteomic differences in mouse brain.</a> Nat Commun. 13, 2927(2022).</li>
<li>Uckun, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+profiling+of+the+alk+proximitome+in+the+developing+Drosophila+brain%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">In vivo profiling of the alk proximitome in the developing Drosophila brain.</a> J Mol Biol. 433 (23), 167282(2021).</li>
<li>Xiong, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+proteomic+mapping+through+gfp-directed+proximity-dependent+biotin+labelling+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">In vivo proteomic mapping through gfp-directed proximity-dependent biotin labelling in zebrafish.</a> Elife. 10, e64631(2021).</li>
<li>Holzer, E., Rumpf-Kienzl, C., Falk, S., Dammermann, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+modified+turboid+approach+identifies+tissue-specific+centriolar+components+in+C.+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Genet%22%5BJournal%5D)">A modified turboid approach identifies tissue-specific centriolar components in C. elegans.</a> PLoS Genet. 18 (4), e1010150(2022).</li>
<li>Artan, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interactome+analysis+of+Caenorhabditis+elegans+synapses+by+turboid-based+proximity+labeling%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Interactome analysis of Caenorhabditis elegans synapses by turboid-based proximity labeling.</a> J Biol Chem. 297 (3), 101094(2021).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Turboid-based+proximity+labeling+reveals+that+ubr7+is+a+regulator+of+n+nlr+immune+receptor-mediated+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Comm%22%5BJournal%5D)">Turboid-based proximity labeling reveals that ubr7 is a regulator of n nlr immune receptor-mediated immunity.</a> Nat Comm. 10 (1), 3252(2019).</li>
<li>Baumgartner, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Drosophila+zad+zinc+finger+protein+kipferl+guides+rhino+to+pirna+clusters%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">The Drosophila zad zinc finger protein kipferl guides rhino to pirna clusters.</a> eLife. 11, e80067(2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Antibodies</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Anticorpo secondario IgG (H+L) anti-topo forte, HRP</td><td>Invitrogen</td><td>31430</td><td></td></tr><tr><td>Anticorpo secondario anti-coniglio di capra (H+L) altamente adsorbito di grado analitico, alexa fluor plus 488</td><td>Invitrogen</td><td>A32731</td><td></td></tr><tr><td>Anticorpo secondario anti-coniglio di capra (H+L) sensibile alla luce, HRP</td><td>Invitrogen</td><td>31460</td><td>Grado analitico,</td></tr><tr><td>anticorpo HSP90 sensibile alla luce (coniglio)</td><td>Tecnologia di segnalazione cellulare</td><td>4874</td><td>Anticorpo policlonale</td></tr><tr><td>Pierce Proteina streptavidina, HRP</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>21126</td><td>Grado analitico</td></tr><tr><td>Streptavidina, Alexa Fluor 594 coniugato</td><td>Invitrogen</td><td>S11227</td><td>Fotosensibile, grado</td></tr> <tr><td>analiticoAnticorpo V5-tag (topo)</td><td>Anticorpo monoclonale</td> <td>Invitrogen</td><td>R960-25</td></tr><tr><td>Anticorpo V5-tag (coniglio) (D3H8Q)</td><td>Tecnologia di segnalazione cellulare</td><td>13202</td><td>Anticorpo monoclonale</td></tr><tr><td>Fly Lines</td><td>Company</td><td>Numero catalogo</td><td>Comments/Description</td></tr><tr><td>pUASp Tom20 V5-TurboID/ TM3</td><td>Korea Drosophila Stock Center</td><td>2373-2</td><td>Fly stock</td></tr><tr><td>pUASp Zucchini V5-TurboID/Cyo</td><td>Korea Drosophila Stock Center</td><td>2188</td><td>Fly stock</td></tr><tr><td>pUASP_attB_V5-TurboID-NES/Cyo</td><td>Korea Drosophila Stock Center</td><td>2635-4</td><td>Fly stock</td></tr><tr><td>con [*]; P{w[+mC]=matalpha4-GAL-VP16}V2H</td><td>Bloomington Drosophila Stock Center</td><td>7062</td><td>Fly stock</td></tr><tr><td>Equipments and Consummables</td><td>Company</td><td>Catalog Number</td><td>Comments/Description</td></tr><tr><td>Bilancia analitica</td><td>Mettler Toledo</td><td>ME204</td><td>0,1 mg di risoluzione</td></tr><tr><td>Amersham Protran 0,45 NC nitrocellulosa Western Blotting membrane (300 mm e tempi; 4 m)</td><td>Cytiva</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>10600002-Axygen 1,7 mL MaxyClear Snaplock Microcentrifuge Tube</td><td>Corning</td><td>MCT-175-C</td><td>Co-polimero</td></tr><tr><td>MARCA&nbsp; Vetro di copertura (22 mm x 22 mm)</td>Puntali per pipette sfusi in <td>vetro borosilicato</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td></td></tr><tr><td>BR470055 (10 &; micro; L)</td><td>Vertex</td><td>4110N00</td><td></td></tr><tr><td>Puntali per pipette sfusi in propilene (1000 &; micro; L)</td><td>Vertex</td><td>4330N00</td><td></td></tr><tr><td>Puntali per pipette sfusi in propilene (200 &; micro; L)</td><td>Vertex</td><td>4230N00</td> Piastra per colture cellulari di <td>propilene</td></tr><tr><td>(96 pozzetti)</td><td>SPL</td><td>300096</td><td>Polistirene, tipo a fondo piatto</td></tr><tr><td>Centrifuga (con rotore da 1,5-2 mL)</td><td>Eppendorf</td><td>5424 R</td><td>Centrifuga refrigerata ad angolo fisso</td></tr><tr><td>(con rotore da 5 mL)</td><td>Eppendorf</td><td>5425 R</td><td>Cucchiaio chimico refrigerato ad angolo fisso</td></tr><tr><td></td><td>-</td><td>- </td><td>Sistema</td></tr> di <tr><td>imaging ChemiDoc</td> in acciaio inossidabile <td>Biorad</td><td>12003153</td><td>Western blot sistema di imaging</td></tr><tr><td>CO2 fly pad</td> <td>-</td><td></td> <td>Scheda anestetica</td></tr><tr><td>CO2 serbatoio e regolatore</td> <td>-</td><td></td> <td>Attenzione al gas ad alta pressione e alle vertigini</td></tr><tr><td>Incubatrice compatta</td><td>JSR</td><td>JSGI-10T</td><td>Attenzione all'alta temperatura</td></tr><tr><td>Microscopio a scansione laser confocale</td><td>Zeiss</td><td>LSM 710</td><td>Attenzione al raggio laser intenso</td></tr><tr><td>Tubo conico (15 mL)</td><td>SPL</td><td>50015</td><td>Polipropilene /Polietilene ad alta densità&nbsp;</td></tr><tr><td>Provetta conica (50 mL)</td><td>SPL</td><td>50050</td><td>Polipropilene /Polietilene ad alta densità&nbsp;</td></tr><tr><td>Bilancia digitale</td> <td>-</td><td>--</td><td></td></tr> <tr><td>Timer digitale</td> <td>-</td><td>--</td><td></td></tr> <tr><td>Piatto di dissezione</td> <td>-</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Silicone Dumont #5SF Pinze</td><td>Fine Science Tools</td><td>11252-00</td><td>Punte super sottili, attenzione agli oggetti appuntiti</td></tr><tr><td>Magnete DynaMag-2</td><td>Invitrogen</td><td>12321D</td><td>Per provette per microcentrifuga da 1,5-2 ml</td></tr><tr><td>Fisherbrand&nbsp; Vetrini per microscopio Superfrost Plus (25 mm x 75 mm)</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-550-15</td><td>Attenzione agli oggetti appuntiti</td></tr><tr><td>Bottiglie di cibo per mosche (con tappo di carta)</td><td>Hansol Tech</td><td>FFB-21010-Fiale</td><td></td></tr> <tr><td>per alimenti per mosche (con tappo di cotone)</td><td>Hansol Tech</td><td>FFV-11010-Ultrasuonatore</td><td></td></tr> <tr><td>focalizzato</td><td>Covaris</td><td>M220</td><td>Attenzione alle onde ultrasoniche</td></tr><tr><td>Coltello per gel</td><td>Invitrogen</td><td>EI9010</td><td>Acciaio inossidabile con manico in plastica</td></tr><tr><td>Grado 3MM Carta assorbente Chr (46 cm e tempi; 57 cm)</td><td>Cytiva</td><td>3030-917</td><td>Carta Whatmann</td></tr><tr><td>Omogeneizzatore portatile e pestello in plastica</td><td>Kimble</td><td>749540-0000</td><td>Motore senza fili</td></tr><tr><td>Blocco termico</td><td>Fine PCR</td><td>ALB6400</td><td>Attenzione alle alte temperature</td></tr><tr><td>Tessuto privo di lanugine</td><td>Yuhan-Kimberly</td><td>41112</td><td>- </td></tr><tr><td>Azoto liquido</td><td>-</td><td>-</td><td>Attenzione al congelamento e all'ustione</td></tr><tr><td>Spettrofotometro per micropiastre</td><td>Agilent Technologies</td><td>Ottica</td><td>basata su monocromatore</td></tr><tr><td>Epoca Microonde</td><td>-</td><td>-</td><td>Attenzione per l'alta temperatura</td></tr><tr><td>milliTUBE 1 mL fibra AFA</td><td>Covaris</td><td>PN 520135</td><td>Vetro</td></tr><tr><td>Mini serbatoio gel</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>A25977</td><td>Attenzione ai</td></tr><tr><td>gel proteici NuPAGE Bis-tris mini ad alta temperatura, 4&ndash; 12%, 1,0 1,5 mm, 10 pozzetti</td><td>Invitrogen</td><td>NP0323BOX</td><td>Contiene poliacrilammide, attenzione alla tossicità</td></tr><tr><td>NuPAGE Bis-tris mini gel proteici, 4&ndash; 12%, 1,0 1,5 mm, 15 pozzetti</td><td>Invitrogen</td><td>NP0321BOX</td><td>Contiene poliacrilammide, attenzione alla tossicità</td></tr><tr><td>Pennello per vernice (&Oslash; 1,8 mm)</td><td>Hwa hong</td><td>791240-Pipetman</td><td></td></tr> <tr><td>L (P1000L)</td><td>Gilson</td><td>FA10006M</td><td>Micropipetta monocanale con espulsore metallico</td></tr><tr><td>Pipetman L (P200L)</td><td>Gilson</td><td>FA10005M</td><td>Micropipetta monocanale con espulsore metallico</td></tr><tr><td>Pipetman L ( P20L)</td><td>Gilson</td><td>FA10003M</td><td>Micropipetta monocanale con espulsore metallico</td></tr><tr><td>Pipetman L (P2L)</td><td>Gilson</td><td>FA10001M</td><td>Micropipetta monocanale con espulsore metallico</td></tr><tr><td>Alimentazione</td><td>Scienza principale</td><td>MP-310</td><td>Attenzione all'elettricità ad alta tensione</td></tr><tr><td>Rotatore programmabile</td><td>Biosan</td><td>RS-24-Protein</td><td></td></tr> <tr><td>LoBind&nbsp; tubi</td><td>Eppendorf</td><td></td> <td>30108302-Lama</td></tr> <tr><td>di rasoio</td><td>Dorco</td><td>304020</td><td>Acciaio inossidabile, attenzione agli oggetti appuntiti</td></tr><tr><td>Rullo</td><td>-</td><td>-</td><td>-Pipetta</td></tr> <tr><td>sierologica (10 mL)</td><td>SPL</td><td>91010</td><td>Polistirene</td></tr><tr><td>Pipetta sierologica (25 mL)</td><td>SPL</td><td>91025</td><td>Polistirene</td></tr><tr><td>Pipetta sierologica (5 mL)</td><td>SPL</td><td>91005</td> Pipetta sierologica <td>in polistirene</td></tr><tr><td>(50 mL)</td><td>SPL</td><td>91050</td><td>Provette</td></tr> per <tr><td>microcentrifuga a bassa ritenzione con tappo a scatto in polistirene (1,5 mL)</td><td>Thermo Scientific</td><td>3451PK</td><td>Tampone in spugna in polipropilene</td></tr><tr><td></td><td>Invitrogen</td><td>EI9052-Stereomicroscopio</td><td></td></tr> <tr><td></td><td>Zeiss</td><td>Stemi 508-Stereomicroscopio</td><td></td></tr><tr><td>&nbsp;</td><td>Leica</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ThermoMixer&nbsp; C</td><td>Eppendorf</td><td>5382000015</td><td>Con blocchi da 1,5 e 5 ml</td></tr><tr><td>Pinzetta</td><td>Aven Tools</td><td>18526</td><td>Plastica, punte piatte</td></tr><tr><td>Miscelatore a vortice</td><td>Scientific Industries</td><td>SI-0236-XCell</td><td></td></tr> <tr><td>II Modulo di blocco</td><td>Invitrogen</td><td>EI9051</td><td>Attenzione alle alte temperature</td></tr><tr><td>XCell&nbsp; SureLock mini-cell</td><td>Invitrogen</td><td>EI0001</td><td>Attenzione alle alte temperature</td></tr><tr><td><forte>Sostanze chimiche</forte></td><td><forte>Azienda</forte></td><td><forte>Numero di catalogo</forte></td><td><forte>Commenti/Descrizione</forte></td></tr><tr><td>Acetone</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>650501</td><td>Grado analitico</td></tr><tr><td>Acetonitrile</td><td>Supelco</td><td>1.00029.1000</td><td>Grado LC-MS, attenzione alla tossicità per inalazione e</td></tr> alle <tr><td>fiale standard di albumina infiammabile (contenenti albumina sierica bovina (BSA) a 2 mg/mL in soluzione salina allo 0,9% e azoturo di sodio allo 0,05%)</td><td>Thermo Scientific</td><td>23209</td><td>Parte dei kit per il dosaggio delle proteine BCA Pierce (Thermo Scientific, 23225)</td></tr><tr><td>Albumina, siero bovino</td><td>Bioshop</td><td>ALB001</td><td>Bicarbonato di ammonio di grado analitico</td></tr><tr><td></td><td>Sigma-Aldrich</td><td>09830</td><td>Biotina di grado analitico</td></tr><tr><td>&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>B4639</td><td>Grado per colture cellulari e tissutali</td></tr><tr><td>Cloruro di calcio (CaCl2)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C5670</td><td>Substrato</td></tr><tr><td>ECL occidentale</td> per colture cellulari Clarity <td>Biorad</td><td>1705060</td><td>Grado analitico</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>MBD0015</td><td>Sensibile alla luce, grado analitico</td></tr><tr><td>Ditiotreitolo (DTT)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>R0861</td><td>Grado analitico</td></tr><tr><td>Siero fetale bovino</td><td>Corning</td><td>35-015-CV</td><td>Grado di coltura cellulare</td></tr><tr><td>Acido formico</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F0507</td><td>Grado di reagente, attenzione alla tossicità per inalazione Mezzo per</td></tr><tr><td>insetti di Grace</td><td>Gibco</td><td>11595030</td><td>Grado di coltura cellulare</td></tr><tr><td>Lievito secco istantaneo</td><td>No Brand</td><td>N1019</td><td>-</td></tr><tr><td>Iodoacetamide</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>I1149</td><td>Sensibile alla luce, grado analitico</td></tr><tr><td>Metanolo</td><td>Carlo Erba</td><td>41484</td><td>Grado analitico</td></tr><tr><td>Smalto per unghie</td><td>-</td><td>-</td><td>Tampone</td></tr> per <tr><td>campioni Novex Tris-glicina SDS di tipo trasparente (2X)</td><td>Invitrogen</td><td>LC2676</td><td>Grado analitico</td></tr><tr><td>NuPAGE MOPS SDS Running Buffer (20X)</td><td>Invitrogen</td><td>NP0001</td><td>Grado analitico</td></tr><tr><td>PageRuler Scala proteica prestained</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>26616</td><td>Grado analitico</td></tr><tr><td>Fenilmetansulfonilfluoruro&nbsp;</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>36978</td><td>Grado analitico</td></tr><tr><td>Soluzione salina tampone fosfato</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P4417</td><td>Grado analitico</td></tr><tr><td>Pierce 16% Formaldeide (p/v)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>28908</td> Kit per <td></td></tr><tr><td>il dosaggio delle proteine BCA Pierce</td> di grado analitico e sensibile <td>alla luce Thermo Scientific</td><td>23225</td><td>Grado</td></tr> <tr><td>analiticoReagente Pierce BCA A (contenente carbonato di sodio, bicarbonato di sodio, acido bicinchoninico e tartrato di sodio in idrossido di sodio 0,1 M)</td><td>Thermo Scientific</td><td>23228</td><td>Parte dei kit di analisi delle proteine Pierce BCA (Thermo Scientific, 23225)</td></tr><tr><td>Reagente Pierce BCA B (contenente il 4% di solfato rameico)</td><td>Thermo Scientific</td><td>1859078</td><td>Parte dei kit di analisi delle proteine Pierce BCA (Thermo Scientific, 23225)</td></tr><tr><td>Acido propionico</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Set da cocktail di</td><td></td></tr><tr><td>inibitori della proteasi</td> di grado ACS <td>402907</td> III <td>Calbiochem</td><td>539134 Grado di coltura cellulare e tissutale</td></tr><tr><td>SlowFade Gold Antifade Mountant</td><td>Invitrogen</td><td>S36936</td><td></td></tr><tr><td>Cloruro di sodio (NaCl)</td><td>Bioneer</td> sensibile alla luce <td>C-9025</td><td>Grado analitico</td></tr><tr><td>Desossicolato di sodio</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D6750</td><td>Grado analitico</td></tr><tr><td>Sodio dodecil solfato</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>71736</td><td>Grado molecolare</td></tr><tr><td>Idrossido di sodio (NaOH)</td><td>Biosesang</td><td>SR2018-100-00</td><td>Grado analitico</td></tr><tr><td>Acqua tripla distillata</td> <td>-</td><td></td> <td>Soluzione salina ultrapura (tipo 1)</td></tr> <tr><td>Tris-tamponata</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>94158</td><td>Grado analitico</td></tr><tr><td>Tampone di trasferimento Tris-glicina</td><td>Koma Biotech</td><td>K0341001</td><td>Grado analitico</td></tr><tr><td>Tris-HCl, pH 8</td><td>Bioneer</td><td>C-9006</td><td>Grado analitico</td></tr><tr><td>Triton x-100</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>93443</td><td>Grado molecolare</td></tr><tr><td>Tripsina</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>20233</td><td>Grado per coltura cellulare</td></tr><tr><td>Tween 20</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P9416</td><td>Urea molecolare</td></tr><tr><td></td><td>Sigma-Aldrich</td><td>U5378</td><td>Molecolare & grado per coltura cellulare</td></tr></tbody></table>

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