Farmacologia della rete e convalida dei meccanismi antidepressivi di Qiangzhifang in un modello di ratto con depressione indotta da stress da contenzione cronica

Questa ricerca mira a indagare come il Qiangzhifang agisce contro la depressione, identificare i principi attivi chiave e comprendere i loro meccanismi d'azione. Questo studio colma la lacuna nella comprensione dei meccanismi specifici e dei componenti attivi del Qiangzhifang per il monitoraggio della depressione.

Studieremo come il Qiangzhifang influisce sul sistema immunitario per trovare la depressione ed esplorare le sue potenziali nuove applicazioni terapeutiche.

[Narratore] Per iniziare, costruisci il dispositivo di ritenuta per ratti selezionando un tubo di plastica trasparente con un diametro e una lunghezza adatti alle dimensioni del ratto, permettendo al ratto di stare in piedi e girarsi all'interno impedendo la fuga. Utilizzando una perforatrice per saldatore elettrico, praticare dei fori sui lati del tubo di plastica e sul coperchio per garantire una corretta circolazione dell'aria. Dividi i ratti in quattro gruppi, assicurandoti che ogni gruppo sia composto da 10 ratti. Un'ora dopo la somministrazione intragastrica giornaliera del farmaco, posizionare delicatamente i ratti nei dispositivi di contenzione, esclusi quelli del gruppo di controllo, e assicurarsi che siano in una posizione comoda. Somministrare fluoxetina a 2,7 milligrammi per chilogrammo al giorno al gruppo Fluoxetina e Qiangzhifang a due grammi per chilogrammo al giorno al gruppo Qiangzhifang tramite sonda gastrica utilizzando un volume di dosaggio di un millilitro per 100 grammi di peso corporeo per entrambe le soluzioni. Riempire le borracce degli animali da esperimento con acqua pura o una soluzione acquosa di saccarosio all'1%. Mettere ogni soluzione in un flacone separato, quindi pesare i flaconi. Metti una bottiglia di soluzione di saccarosio e una bottiglia di acqua pura all'ingresso dell'acqua di ogni gabbia per topi. Uno a sinistra e uno a destra per l'accesso gratuito all'acqua potabile. Dopo 30 minuti, invertire le posizioni delle bottiglie per evitare la preferenza laterale. Dopo un'ora, rimuovere tutte le bottiglie d'acqua. Pesarli prontamente per misurare i valori di consumo di entrambe le soluzioni. Quindi calcola il rapporto di preferenza settimanale per il saccarosio utilizzando l'equazione data. Pesare i ratti settimanalmente a un'ora fissa di sette del mattino. Per monitorare le variazioni del peso corporeo. Regola l'illuminazione nella scatola del campo aperto per una distribuzione uniforme e una chiara visibilità dei ratti nel software di tracciamento. Utilizza il sistema di tracciamento e analisi video per dividere la superficie inferiore della scatola del campo aperto in nove griglie quadrate uguali con otto griglie adiacenti alle pareti come area periferica e al centro come area centrale. Posiziona il ratto nella zona centrale della scatola da campo aperto e registra il suo movimento per cinque minuti utilizzando il sistema di tracciamento. Dopo aver testato ogni ratto, pulire la camera a campo aperto con etanolo al 75% per rimuovere l'odore residuo e prevenire interferenze con il comportamento del ratto successivo. Inserire la distanza totale delle attività in campo aperto e il numero di voci nella griglia centrale nei record del test in campo aperto. Prendi un cilindro dell'acqua in plexiglass trasparente e riempilo d'acqua a una temperatura compresa tra 23 e 25 gradi Celsius. Regola la profondità dell'acqua in base al peso dell'animale, assicurandoti che la coda del topo rimanga a una certa distanza dal fondo. Dopo aver attivato la telecamera e il sistema di acquisizione del segnale, posizionare lentamente i ratti nel cilindro dell'acqua, mantenendo il silenzio per tutta la durata dell'esperimento. Osservare e registrare la durata dell'immobilità fluttuante entro 300 secondi. Al termine della sessione, togliete immediatamente i ratti dall'acqua e asciugateli. Dopo ogni sessione, sostituire l'acqua nel cilindro per evitare qualsiasi influenza sul ratto successivo. Accedi, alla banca dati dei sistemi di farmacologia della medicina tradizionale cinese o TCMSP, alla banca dati delle erbe e alla banca dati TCMID. Usa i nomi delle otto medicine tradizionali cinesi a Qiangzhifang come parole chiave per cercare composti attivi e bersagli delle erbe. Raccogli informazioni sugli obiettivi da TCMSP e dalla banca dati svizzera di previsione degli obiettivi. Impostazione del valore del filtro su una probabilità maggiore di zero. Ora vai al database GeneCards e cerca la parola chiave depressione. Dopo aver ottenuto i bersagli genetici associati alla depressione, scarica il foglio di calcolo elettronico, filtra i punteggi genetici che sono più alti della media e compila un elenco di bersagli correlati alla depressione. Ora accedi allo strumento gen e carica i target composti seguiti dai file target della malattia. Tracciare i geni sovrapposti tra i presunti bersagli del composto e i bersagli della malattia. Quindi scarica l'immagine del diagramma. Infine, accedi al database delle stringhe e incolla i geni sovrapposti, in particolare l'elenco degli obiettivi sovrapposti anti-depressione Qiangzhifang nella finestra di dialogo dell'elenco dei nomi. Seleziona l'homo sapiens nella sezione dell'organismo e clicca su Cerca, seguito da Continua. Seleziona l'opzione esportazioni dalla barra del titolo e scarica la tabella riassuntiva Protein-Protein Interaction Network nei formati PNG e TSV. Nel test di preferenza per il saccarosio dopo 28 giorni, il gruppo di stress da restrizione cronica aveva una preferenza per il saccarosio significativamente più bassa rispetto al controllo. Mentre entrambi i gruppi trattati con Qiangzhifang e Fluoxetina hanno mostrato valori significativamente più alti rispetto al gruppo stress. L'aumento di peso corporeo è stato significativamente ridotto nel gruppo di contenzione cronica Stress rispetto al controllo dopo 28 giorni, ma è aumentato significativamente nei gruppi Qiangzhifang e fluoxetina rispetto al gruppo stress. I grafici di movimento in campo aperto hanno mostrato una ridotta esplorazione dell'area centrale nel gruppo di stress. Mentre entrambi i gruppi di trattamento hanno mostrato un'attività visibilmente più centrale. La distanza totale percorsa nel test in campo aperto non ha mostrato differenze significative tra tutti i gruppi. Anche il tempo nell'area centrale è stato significativamente ridotto nel gruppo stress e significativamente aumentato in entrambi i gruppi di trattamento. Inoltre, il tempo di immobilità nel test di nuoto forzato era più alto nel gruppo stressato e significativamente ridotto con entrambi i trattamenti.