Name: Isolamento di cellule polmonari contenenti retinoidi mediante smistamento cellulare (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-04-11T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 47 s
Description: Scopri come isolare cellule polmonari contenenti retinoidi mediante smistamento cellulare a fluorescenza attivata (FACS) in topi. Questo metodo rivela il ruolo protettivo dei retinoidi nel mantenimento della salute polmonare.

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<table><tbody><tr><td>pipetta sierologica da 10 mL</td><td>Avantor/VWR</td><td>76452-284</td><td></td></tr><tr><td>100 &micro; m filtro&nbsp;</td><td>Greiner Bio-One</td><td>542000</td><td></td></tr><tr><td>provetta con falco da 15 mL</td><td>Corning</td><td>352099</td><td></td></tr><tr><td>40 &micro; m filtro&nbsp;</td><td>Greiner Bio-One</td><td>542040</td><td></td></tr><tr><td>Provetta di falco da 50 mL</td><td>Corning</td><td>352070</td><td></td></tr><tr><td>Piatto per colture cellulari, 35 mm e acuto; 10 mm</td><td>Corning</td><td>430165</td><td></td></tr><tr><td>Terreni di selezione cellulare</td><td>Gibco</td><td>A59688DJ</td><td></td></tr><tr><td>Collagenasi di tipo IV&nbsp;</td><td>Worthington Biochemical Corporation</td><td>LS004188&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Sistema di smistamento cellulare Cytek Aurora&nbsp;</td><td>Cytek Biosciences</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dispase II</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D4693</td><td></td></tr><tr><td>DNase I</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>DN25</td><td></td></tr><tr><td>Tubo a fondo tondo in polipropilene da 5 ml di marca Falcon, 12 mm e acuto; 75 mm</td><td>Corning</td><td>352063</td><td></td></tr><tr><td>Tubo a fondo tondo in polistirene da 5 ml di marca Falcon con tappo del filtro cellulare, 12 mm e acuto; 75 mm</td><td></td><td>Corning 352235</td><td></td></tr><tr><td>Software FlowJo&nbsp;</td><td>Software di citometria a flusso</td> <td>Becton Dickinson</td><td></td></tr><tr><td>HBSS con Ca2+/Mg2+</td><td>Gibco</td><td>14925-092</td><td></td></tr><tr><td>HBSS senza Ca2+/Mg2+</td><td>Gibco</td><td>14175-095</td><td></td></tr><tr><td>Nalgene Filtri monouso sterili a flusso rapido per flaconi</td><td>ThermoFisher</td><td>595-3320</td><td></td></tr><tr><td>Lisi dei globuli rossi tampone</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>R7757</td><td></td></tr><tr><td>SpectroFlo CS software&nbsp;</td><td>Cytek Biosciences</td><td>Versione 1.3.0&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Design chirurgico Royaltek Lame per bisturi chirurgici in acciaio inossidabile</td><td>Fisher Scientific</td><td>22-079-683</td><td></td></tr><tr><td>SYTOX Colorazione verde a cellule morte</td><td>Invitrogen</td><td>S34860</td><td></td></tr><tr><td>Tamoxifen</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T2859</td><td></td></tr></tbody></table>

isolamento di cellule polmonari contenenti retinoidi mediante smistamento cellulare

Isolation of Lung Retinoid-Containing Cells by Cell Sorting

Isolamento di cellule polmonari contenenti retinoidi I polmoni di topo (da topi Lrat+/+ e Lrat-/-) sono stati digeriti enzimaticamente e le sospensioni di singole cellule sono state preparate e sottoposte a FACS secondo la procedura sopra descritta. Lo smistamento delle celle e l'acquisizione dei dati sono stati eseguiti su un sistema di smistamento cellulare Cytek Aurora™ gestito dal software SpectroFlo CS versione 1....

Isolamento di cellule polmonari contenenti retinoidi mediante smistamento cellulare

Retinoids (vitamin A and its metabolites) are an essential lipid component of the alveolar microenvironment, and cell-type specific retinoid metabolism is ...

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Una preparazione altamente purificato di cellule dendritiche del polmone del mouse è descritto. Particolare enfasi è data l'isolamento delle tradizionali sottoinsieme delle cellule dendritiche.

Isolamento di cellule polmonari mouse dendritiche

Questo video mostra la procedura per isolare le cellule gangliari retiniche primarie murine (RGC) utilizzando la citometria a flusso. Questo metodo consente lo studio futuro delle RGC, con l'obiettivo di comprendere meglio il principale declino dell'acuità visiva che deriva dalla perdita di RGC funzionali nelle malattie neurodegenerative.

Isolamento delle cellule gangliari retiniche murine mediante smistamento cellulare attivato dalla fluorescenza

Qui, forniamo un protocollo ottimizzato per l'isolamento e la clonazione della scarsa entità di cellule T periferiche Vδ1+CD4+ che è, come abbiamo mostrato di recente, un progenitore extratimico di cellule T αβ. Questa tecnica consente di isolare quantitativamente, clonare ed espandere in modo efficiente queste cellule in coltura ex vivo.

Isolamento e<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Cultura di Vδ1<sup&gt; +</sup&gt; CD4<sup&gt; +</sup&gt; Celle γδ T, un Extrathymic αβT-cellule progenitrici

Questo protocollo descrive una tecnica di isolamento per ottenere cellule mesenchimali stromali residenti polmonare primaria da ratti, attraverso l'uso di digestione enzimatica, la separazione gradiente di densità, aderenza plastica e CD146 + selezione perlina magnetica.

Isolamento di CD146<sup&gt; +</sup&gt; cellule residenti del polmone mesenchimali stromali da Rat Polmoni

lesioni al fegato sono accompagnate da espansione di cellule progenitrici che rappresenta una popolazione cellulare eterogenea. Classificazione Novel di questo compartimento cellulare consente di distintivo più sottoinsiemi. Il metodo qui descritto illustra l'analisi citofluorimetrica ed elevato isolamento purezza vari sottogruppi che possono essere utilizzati per ulteriori analisi.

L&#39;isolamento e arricchimento di fegato progenitrici sottoinsiemi identificati da un marcatore combinazione romanzo di superficie

Milioni di persone soffrono di malattie degenerative della retina che provocano cecità irreversibile. Un elemento comune di molte di queste malattie è la perdita delle cellule del ganglio retinico (RGC). Questo protocollo dettagliato descrive l'isolamento di RGC murine primari mediante selezione positiva e negativa con citometria a flusso.

Isolamento delle cellule della ganglioma della retina primaria (RGC) mediante citometria a flusso

Questo articolo fornisce una metodologia dettagliata per la dissociazione dei tessuti e gli approcci di frazionamento cellulare che consentono l'arricchimento di cellule epiteliali vitali dalle regioni prossimali e distali del polmone umano. Qui questi approcci sono applicati per l'analisi funzionale di cellule progenitrici epiteliali polmonari attraverso l'uso di modelli di coltura di organoidi 3D.

Isolamento e arricchimento di cellule progenitrici epiteliali polmonari umane per la coltura di organoidi

Questo protocollo descrive un metodo per l'isolamento di cellule endoteliali retiniche postnatali murine ottimizzate per la resa, la purezza e la vitalità delle cellule. Queste cellule sono adatte per approcci di sequenziamento di prossima generazione.

Isolamento di cellule endoteliali retiniche murine per il sequenziamento di nuova generazione

Sebbene impegnativo, l'isolamento delle cellule endoteliali polmonari è essenziale per gli studi sull'infiammazione polmonare. Il presente protocollo descrive una procedura per l'isolamento ad alto rendimento e ad alta purezza delle cellule endoteliali macrovascolari e microvascolari.

Isolamento e purificazione delle cellule endoteliali microvascolari e macrovascolari da campioni derivati dai polmoni

Presentato qui è un metodo riproducibile, economico e robusto per l'isolamento e l'espansione delle cellule epiteliali bronchiali primarie per il biobanking a lungo termine e la generazione di cellule epiteliali differenziate mediante coltura all'interfaccia aria-liquido.

Isolare le cellule epiteliali bronchiali dal tessuto polmonare resecato per il biobanking e stabilire colture di interfaccia aria-liquido ben differenziate

Questo protocollo descrive in dettaglio l'isolamento di popolazioni vive immunitarie e non immuni dal polmone di topo allo stato stazionario e in seguito all'infezione influenzale. Fornisce inoltre strategie di gating per l'identificazione di sottogruppi di cellule epiteliali e mieloidi.

Isolamento di popolazioni di cellule mieloidi ed epiteliali vive dal polmone di topo

Scopri come isolare cellule polmonari contenenti retinoidi mediante smistamento cellulare a fluorescenza attivata (FACS) in topi. Questo metodo rivela il ruolo protettivo dei retinoidi nel mantenimento della salute polmonare.

Isolamento di cellule polmonari contenenti retinoidi mediante smistamento cellulare

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