Name: In vivo Imaging del calcio di insiemi neuronali in reti di neuroni sensoriali primari in gangli trigeminali intatti (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-01T13:20:00.000+00:00
Duration: 7 min 55 s
Description: Impara l'imaging del calcio GCaMP in vivo nei gangli trigeminali intatti per studiare le reti neuronali sensoriali. Questo metodo consente di analizzare l'attività neuronale in risposta a stimoli meccanici e termici.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

<table><tbody><tr><td>Iniezione anasica (xilazina)</td><td>Covetrus, Akorn</td><td>33197</td><td></td></tr><tr><td>Flurar 5x/0,25 M27 obejctive</td><td>Cal Zeiss</td><td>420130-9900-000</td><td></td></tr><tr><td>Applicatori con punta in cotone</td><td>Mckesson</td><td>24-106-1S</td><td></td></tr><tr><td>Emostatico curvo</td><td>Strumenti per la scienza</td><td>13007-12</td><td></td></tr><tr><td>Regolatore di temperatura CC</td><td>FHC</td><td>40-90-8D</td><td></td></tr><tr><td>Termoforo DC Termoregolatore</td><td>FHC</td><td>40-90-2-05</td><td></td></tr><tr><td>Pinze rivestite in ceramica Dumont</td><td>Strumenti per la scienza</td><td>11252-50</td><td></td></tr><tr><td>Regolatore di temperatura CC FHC</td><td>FHC</td><td>40-90-8D</td><td></td></tr><tr><td>Fluriso (isoflurano)</td><td>MWI Salute Animale, Gruppo Piramal</td><td>501017</td><td></td></tr><tr><td>Friedman-Pearson Rongeurs</td><td>Strumenti per la scienza</td><td>16221-14</td><td></td></tr><tr><td>Schiuma gel</td><td>Pfizer</td><td>09-0353-01</td><td></td></tr><tr><td>ImmagineJ</td><td>Istituti Nazionali di Sanità</td><td>ij153</td><td></td></tr><tr><td>Ketaset (Ketamina)</td><td>Zoetis</td><td>KET-00002R2</td><td></td></tr><tr><td>Modello 923-B Supporto per testa per anestesia gassosa per topo (mouse adulto)</td><td>Strumenti Kopf</td><td>923-B</td><td></td></tr><tr><td>Nastro da palcoscenico verde luminescente</td><td>JSITON/ Amazon</td><td>B803YW8ZWL</td><td></td></tr><tr><td>Sistema di manipoli da laboratorio elettrico compatto M35</td><td>Buffalo Dental Manufacturing Co., Inc.</td><td>M35</td><td></td></tr><tr><td>Matrx VIP 3000 Vaporizzatore di isoflurano</td><td>Segno medio</td><td>91305430</td><td></td></tr><tr><td>Forbici per micro dissezione</td><td>Roboz</td><td>RS-5882</td><td></td></tr><tr><td>Forbici a molla per micro dissezione</td><td>Strumenti per la scienza</td><td>15023-10</td><td></td></tr><tr><td>Forbici a molla per micro dissezione</td><td>Roboz</td><td>RS-5677</td><td></td></tr><tr><td>Mini sonda termistore rettale</td><td>FHC</td><td>40-90-5D-02</td><td></td></tr><tr><td>Forbici operative</td><td>Roboz</td><td>RS-6812</td><td></td></tr><tr><td>Mouse Pirt-GCaMP3 C57/BL/6J</td><td>Università Johns Hopkins</td><td>N/A</td><td>Entrambi i sessi possono essere immaginati ugualmente bene. I topi dovrebbero avere almeno 8 settimane di vita a causa dell'espressione debole o intermittente del promotore di Pirt nei topi più giovani.</td></tr><tr><td>Cloruro di potassio</td><td>Fisher Scientifico</td><td>BP366-500</td><td></td></tr><tr><td>Fotogramma stereotassico</td><td>Kopf Modello 923-B</td><td>923-B</td><td></td></tr><tr><td>Maschera sterotattica (attiva) per topi < 30 g con tubi</td><td>RWD Scienze della vita</td><td>68663</td><td></td></tr><tr><td>Fresa per fessura conica TNT (31P)</td><td>Buffalo Dental Manufacturing Co., Inc.</td><td>31P-ORO</td><td></td></tr><tr><td>td-Tomato C57BL/6J topi</td><td>Laboratorio Jackson</td><td>7909</td><td></td></tr><tr><td>Piastra superiore, 6" x 10"</td><td>Newport</td><td>290-TP</td><td></td></tr><tr><td>Pipetta di trasferimento, 3mL</td><td>Cole Parmer</td><td>UX-06226-23</td><td></td></tr><tr><td>Mouse TrpV1-Cre C57BL/6J</td><td>Laboratorio Jackson</td><td>17769</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio confocale Zeiss LSM 800</td><td>Cal Zeiss</td><td>Pannello LSM800</td><td></td></tr><tr><td>Zeiss Zen 2.6 Blue Edition Software</td><td>Cal Zeiss</td><td>Zen (Edizione Blu) 2.6</td><td></td></tr></tbody></table>

in vivo imaging del calcio di insiemi neuronali in reti di neuroni sensoriali primari in gangli trigeminali intatti

In Vivo Calcium Imaging of Neuronal Ensembles in Networks of Primary Sensory Neurons in Intact Trigeminal Ganglia

Imaging di un gran numero di neuroni e di specifici rami del trigemino mediante scansione confocale del ganglio trigemino Pirt-GCaMP Dopo l'esposizione chirurgica ai TG nei topi Pirt-GCaMP3, la microscopia confocale consente l'imaging di oltre &gt;3.000 neuroni contemporaneamente (Figura 4). Ciò fornisce il potente vantaggio di osservare migliaia di neuroni TG contemporaneamente nel loro normale contesto fisiologico. I transitori spontanei di Ca2+ possono esser...

In vivo Imaging del calcio di insiemi neuronali in reti di neuroni sensoriali primari in gangli trigeminali intatti

Calcium imaging is an important tool for monitoring signaling mechanisms that either influx Ca2+ into the cytosol or release Ca2+ from intracellular Ca2+ ...

in-vivo-calcium-imaging-neuronal-ensembles-networks-primary-sensory

Research

Ricerca

JoVE Journal

Neuroscience

Neuroscienze

Fonte: Shannonhouse, J., et al. In vivo Imaging del calcio di insiemi neuronali in reti di neuroni sensoriali primari in gangli radicali dorsali intatti. J. Vis. Exp. (2023). Il video mostra una tecnica di imaging del calcio in vivo per monitorare l'attività neuronale nei gangli della radice dorsale (DRG) di un topo transgenico. I neuroni DRG esprimono un indicatore di calcio che aumenta l'intensità della fluorescenza dopo il legame con il calcio. Gli stimoli meccanici o termici applicati a una...

Imaging del calcio in vivo di insiemi neuronali nei gangli della radice dorsale intatti di un topo

Descriviamo una procedura sperimentale per la misura di attività neuronale attraverso finestre ottiche dual sopra bilaterale corticies somatosensoriale primaria (S1) in Thy1-GCaMP6s topi transgenici utilizzando 2 fotoni (2P) microscopia in vivo.

Imaging di attività neurale nella corteccia somatosensoriale primaria utilizzando Thy1-topi transgenici GCaMP6s

Qui presentiamo come esporre il ganglio genicolato di un topo da laboratorio vivo e anestetizzato e come utilizzare l'imaging del calcio per misurare le risposte degli insiemi di questi neuroni agli stimoli del gusto, consentendo prove multiple con diversi stimolanti. Ciò consente confronti approfonditi di quali neuroni rispondono a quali tastants.

Imaging in vivo del calcio delle risposte del neurone ganglio genicolato di topo agli stimoli del gusto

Questo protocollo descrive l'esposizione chirurgica del ganglio della radice dorsale (DRG) seguito da GCaMP3 (indicatore Ca2+ codificato geneticamente; Green Fluorescent Protein-Calmodulin-M13 Protein 3) Ca2+ imaging degli insiemi neuronali utilizzando topi Pirt-GCaMP3 mentre si applica una varietà di stimoli alla zampa posteriore omolaterale.

In vivo Imaging del calcio di insiemi neuronali in reti di neuroni sensoriali primari nei gangli della radice dorsale intatti

Il presente protocollo delinea l'imaging del calcio in vivo per misurare le risposte di insiemi di neuroni DRG lombari-6 a stimoli somatici e viscerali. Confronti approfonditi possono essere effettuati tra i neuroni che rispondono a diversi stimoli. Questo protocollo è prezioso per studiare i meccanismi del dolore viscerale e della stimolazione somatica, come l'agopuntura.

in vivo Imaging del calcio della risposta dei neuroni dei gangli della radice dorsale a stimoli somatici e viscerali

Gli indicatori di calcio geneticamente codificati (GECI) consentono una solida analisi a livello di popolazione della segnalazione sensoriale dei neuroni. Qui, abbiamo sviluppato un nuovo approccio che consente la visualizzazione GECI in vivo dell'attività dei neuroni dei gangli trigeminali del ratto.

In Vivo Imaging del calcio dei neuroni sensoriali nel ganglio trigeminale del ratto

Attività spontanea di sviluppare le reti neuronali può essere misurato con AM-estere forme di calcio-sensibili coloranti indicatore. Variazioni di calcio intracellulare, indicando l'attivazione neuronale, vengono rilevati come variazioni transitorie della fluorescenza indicatore con uno o due fotoni di imaging. Questo protocollo può essere adattato per una serie di reti neuronali...

Calcio Imaging funzionale nello sviluppo di reti corticali

Trasporto retrogrado di colorante fluorescente etichetta una sotto-popolazione di neuroni basati su proiezione anatomica. Assoni con etichetta possono essere mirati...

Retrograda Etichettatura fluorescente Consente mirata extracellulare singola unità di registrazione da parte dei neuroni identificati<em&gt; In vivo</em

Con il suo piccolo corpo trasparente, ben documentato neuroanatomia e una serie di tecniche genetiche suscettibili e...

In vivo imaging di calcio neuronale in C. elegans

In questo articolo introduciamo veloce micro-ionoforesi di neurotrasmettitori come tecnica per studiare l'integrazione di segnali post-sinaptici con elevata precisione spaziale e temporale.

Veloce micro-ionoforesi di glutammato e GABA: un utile strumento per indagare l&#39;integrazione Synaptic

Impara l'imaging del calcio GCaMP in vivo nei gangli trigeminali intatti per studiare le reti neuronali sensoriali. Questo metodo consente di analizzare l'attività neuronale in risposta a stimoli meccanici e termici.

In vivo Imaging del calcio di insiemi neuronali in reti di neuroni sensoriali primari in gangli trigeminali intatti

Esplora altri video