18 luglio 2025
Questo protocollo descrive una procedura passo-passo per il prelievo di un alloinnesto di parete addominale vascolarizzato e reinnervato, descrivendone in dettaglio i punti di riferimento anatomici, i requisiti tecnici e le future potenziali applicazioni cliniche.
Il nostro laboratorio francese si concentra sul miglioramento del VCA per migliorare i protocolli di raccolta, ottimizzare la conservazione dell'innesto, la strategia per ridurre il danno da ischemia e riperfusione e indurre la tolleranza umana.
Le principali sfide attuali nel VCA includono la standardizzazione dei metodi di approvvigionamento e lo sviluppo di solide tecniche di conservazione dei tessuti protocollate per garantire la vitalità del trapianto e migliorare i risultati funzionali e immunologici a lungo termine. Questo protocollo è destinato ai team specializzati in VCA per aiutarli a eseguire allotrapianti addominali ottimizzati in modo affidabile e riproducibile. A differenza di altre tecniche, questo protocollo fornisce una guida passo passo per ottenere un trapianto di parete addominale reinnervata, che è la chiave per un recupero funzionale ottimale.
Il nostro dipartimento di ricostruzione francese si concentra sul miglioramento della rigenerazione nervosa, un campo in crescita che utilizza tecniche come TMR, APNI e condotti nervosi. Ciò è particolarmente rilevante durante la fase di trapianto di questo innesto.
Il nostro protocollo solleva domande chiave su quante riparazioni nervose sono necessarie e quali tecniche utilizzare per ottenere una reinnervazione motoria significativa e un recupero funzionale.
Il nostro laboratorio si concentrerà sulla conservazione del trapianto, che è la chiave per un trapianto di successo, e questo protocollo potrebbe essere un modello molto utile se raccolto su un donatore di razza morta, ma deve essere fatto sotto rigorosa autorizzazione di ricerca.
[Istruttore] Per iniziare, posizionare il paziente supino sul tavolo operatorio con le braccia lungo il corpo. Usa una matita dermografica per tracciare la linea di confine superiore a partire dal processo xifoideo dello sterno. Estendere questa linea lateralmente, tracciando il margine inferiore della gabbia toracica su entrambi i lati fino a raggiungere una linea verticale situata da due a tre centimetri lateralmente alla spina iliaca antero-superiore. Definisci il confine laterale con una linea verticale posizionata da due a tre centimetri lateralmente alla spina iliaca antero-superiore. Da questo punto, tracciare una linea verso il basso per raggiungere il polso dell'arteria femorale situato a circa sette-10 centimetri sotto il legamento inguinale. Quindi, disegna il confine inferiore estendendo una linea dal polso dell'arteria femorale verso la colonna vertebrale pubica su ciascun lato. Collega entrambi i lati del disegno lungo la linea mediana, terminando in corrispondenza della sintesi pubica per completare il contorno triangolare. Eseguire un'incisione cutanea sottocostale bilaterale lungo la linea precedentemente segnata utilizzando una lama di bisturi fredda. Quindi, utilizzando un dispositivo di elettrocauterizzazione, incidere il tessuto sottocutaneo fino a raggiungere la fascia muscolare. Incidere la fascia sovrastante i muscoli retti dell'addome per esporre i corpi muscolari sottostanti e sezionare le inserzioni costali dei muscoli retti dell'addome con il dispositivo di elettrocauterizzazione. Ora identifica i vasi epigastrici superiori dietro i muscoli retti, ligilali con cura e sezionali con l'elettrocauterizzazione dietro ciascun muscolo retto mobilizzato, incidi l'aponeurosi muscolare profonda, quindi la fascia trasversale e infine la fascia peritoneale parietale. Sezionare lateralmente i muscoli obliqui esterni per esporre e identificare la linea semilunare. Eseguire un'incisione cutanea con una lama di bisturi fredda seguendo il confine laterale precedentemente segnato. Utilizzare un dispositivo di elettrocauterizzazione per continuare l'incisione attraverso il tessuto sottocutaneo fino a raggiungere lo strato aponeurotico dei muscoli obliqui esterni. Successivamente, incidere il muscolo obliquo esterno seguito dal muscolo obliquo interno, mantenendo un margine laterale di due o tre centimetri dalla linea semilunare. Quindi, individuare i nervi toracolombari tra i muscoli interni obliqui e trasversali dell'addome e sezionare attentamente questi nervi lateralmente il più lontano possibile per preservarli. Una volta fissati i nervi toracolombari, incidere il muscolo trasverso dell'addome seguito dalla fascia trasversale e quindi dalla fascia peritoneale parietale. Durante il rilascio dell'allotrapianto, identificare i profondi peduncoli epigastrici inferiori situati sulla superficie profonda dei muscoli retti dell'addome. Praticare un'incisione cutanea lungo il disegno inferiore utilizzando una lama di bisturi fredda. Utilizzando un bisturi elettrico, continuare la dissezione attraverso il tessuto sottocutaneo fino a raggiungere il piano aponeurotico muscolare crurale della coscia. Ora identifica la grande vena safena, legala e sezionala. Quindi individuare il nervo cutaneo femorale laterale e sezionarlo. Incidere la fascia crurale, assicurandosi che sia inclusa nel campione dell'innesto. Successivamente, sollevare i due lembi cutanei della fascia triangolare situati sotto i legamenti inguinali fino a quando i vasi femorali non sono esposti. Su entrambi i lati, sezionare attentamente l'arteria e la vena femorale, insieme ai loro rami collaterali, compresi i vasi iliaci epigastrici inferiori superficiali e circonflessi superficiali. Continuare la dissezione verso l'arteria iliaca esterna e la vena, identificando e preservando i vasi iliaci epigastrici inferiori profondi e circonflessi profondi. Quindi, avvolgere i vasi epigastrici inferiori profondi con un anello di silicone per proteggerli. Per continuare la dissezione sopra il legamento inguinale, rimuovere la fascia muscolare sopra il muscolo iliaco per evitare di danneggiare i vasi iliaci circonflessi profondi. Usando un bisturi elettrico, staccare i muscoli retti dell'addome dalle loro inserzioni pubiche, assicurandosi che i vasi epigastrici inferiori profondi rimangano intatti. Successivamente, legare e sezionare il contenuto del canale inguinale, compreso il legamento rotondo dell'utero e il nervo ileoinguinale nelle donne. Per completare la dissezione, legare e tagliare i vasi iliaci circonflessi profondi, iliaci circonflessi superficiali e i vasi epigastrici inferiori superficiali alle loro origini sui vasi iliaci e femorali esterni. Assicurarsi che i due peduncoli vascolari epigastrici inferiori profondi rimangano attaccati sia all'allotrapianto della parete addominale che al corpo del donatore. Dopo aver rimosso i visceri addominali, identificare e contrassegnare i vasi epigastrici inferiori profondi su entrambi i lati, in genere un'arteria e due vene per lato. Sezionare e legare attentamente questi vasi alla loro origine dai vasi iliaci esterni, quindi sezionare i vasi per rilasciare l'innesto. Ora cateterizzare ogni arteria epigastrica inferiore profonda utilizzando una cannula vascolare dotata di rubinetto e fissarla al lume arterioso con una legatura. Infine, collegare un set di irrigazione alle cannule e sciacquare l'innesto con uno o tre litri di soluzione di conservazione dell'Università del Wisconsin temperata a quattro gradi Celsius. Mantenere una portata di circa 100 millilitri al minuto a bassa pressione, non superiore a 100 millimetri di mercurio fino a quando l'effluente non diventa limpido. La lunghezza media utilizzabile dei nervi toracolombari sezionati da entrambi i lati destro e sinistro era di 68 millimetri con lunghezze dei singoli nervi che variavano da 60 a 85 millimetri. L'arteria epigastrica inferiore profonda misurava 85 millimetri a sinistra e 71 millimetri a destra prima di entrare nell'innesto.
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Questo protocollo descrive una procedura passo dopo passo per il prelievo di un allograft della parete addominale vascolarizzato e reinnervato, illustrandone i punti di riferimento anatomici e i requisiti tecnici. Ha lo scopo di migliorare i protocolli di allotrapianto composito vascolarizzato (VCA) per ottenere esiti clinici più efficaci.
L'approvvigionamento standardizzato e la conservazione di innesti allogenici di parete addominale vascolarizzati e reinnervati affrontano una lacuna critica nel trapianto ricostruttivo per difetti addominali complessi. Questo protocollo sostiene la ricerca traslazionale consentendo una vitalità dell'innesto riproducibile e un recupero funzionale, influenzando direttamente le fasi iniziali della scoperta e lo sviluppo di modelli preclinici nell'ingegneria tissutale. La sua adozione può ridurre le incertezze meccanicistiche e orientare le decisioni strategiche nei programmi di ricerca e sviluppo in medicina rigenerativa e trapiantologia.
Questo protocollo si inserisce nel percorso di scoperta e sviluppo preclinico per il trapianto ricostruttivo, sostenendo sia studi meccanicistici iniziali sia lo sviluppo di modelli traslazionali.